• 제목/요약/키워드: shoot tip

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Cloning and Characterization of Novel Soluble Acid Invertase Which is Responsible to JA, ABA and GA During Tip Growth of Pea Seedlings (Pisum sativum)

  • Kim, Dong-Giun;Zhang, Jiesheng
    • 환경생물
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    • 제27권4호
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    • pp.406-413
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    • 2009
  • The enzyme invertase contributes to sugar unloading, pathogen defense, differentiation and development in plants. We cloned the complete cDNA of a soluble acid invertase from pea seedlings (Pisum sativum) via RT-PCR and the rapid amplification of the cDNA end (RACE) technique. The full-length cDNA of the soluble pea invertase comprised 2237 bp and contained a complete open reading frame encoding 647 amino acids. The deduced amino acid sequence showed high homology to soluble acid invertases from various plants. Northern blot analysis demonstrated the soluble acid invertase gene of P. sativum was strongly expressed in sink organs such as shoot tips and root tips, and induced by abscisic acid, gibberellic acid and jasmonic acid in shoots. Especially, gibberellic acid enhanced the gene expression of the soluble acid invertase in a time-dependent manner. This study presents that the gene expression patterns of a soluble acid invertase from pea are strongly consistent with the suggestion that individual invertase gene product has different functions in the growing plant.

Particle Bombardment 방법을 이용한 인공 씨감자의 형질전환 (Genetic Transformation of Intact Potato Microtuber by Particle Bombardment)

  • 최경화;전재흥;김현순;정영희;임용표;정혁
    • 식물조직배양학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.87-91
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    • 1997
  • 제초제 저항성 유전자를 코팅시킨 입자를 particle bombardment 기법으로 자주감자 품종의 인공씨감자에 도입시켰다. 발아직전에 있는 인공씨감자의 생장점 부위를 집중적으로 particle bombardment 한 후 발아한 인공씨감자를 온실에 심었다. 온실에서 5주동안 생육시킨 후 northern 분석결과 유전자가 발현된 2개의 형질전환체를 선발하였고 제초제 살포 실험을 한 결과 형질전환 되지않은 식물체는 모두 고사하였지만 형질전환된 2개의 자주감자 식물체는 생존하였다.

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The identification of optimum condition for direct regeneration in black raspberry

  • Ran, Choi-Heh;Park, Pill-Jae;Lee, Hee-Kwon;Joong, Yun-Song;Lee, In-Sok
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제35권2호
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    • pp.163-167
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    • 2008
  • Adventitious buds appeared within 2 weeks on the base of the petiole explants and increased for two months. A maximum of regeneration (15.6%) was obtained on the medium containing $1.5\;{\mu}M$ TDZ in combination with $1\;{\mu}M$ IBA. To know which explants are the best for the induction of regeneration, three explants such as leaf, petiole and leaf-petiole were used. Among the explant types, the leaf-petiole explant was significantly more effective than leaf and petiole for promoting adventitious shoots, with leaf-petiole inducing at the highest regeneration frequency (33.7%). The regeneration frequency of adventitious shoots in the leaf-petiole explants was significantly affected by leaf size and the position of explants. The leaf-petiole smaller than 5 mm leaf in width was induced at the highest regeneration frequency (68.9%). The smaller leaf sizes, the greater regeneration frequency. Also when the leaves are nearer to the shoot tip, the regeneration frequency is higher. When the rooted micro-shoots were transferred to the soil after growing for 6 weeks in the media, the survival rate was 90%.

Tissue culture of medicinal plants: micropropagation, transformation and production of useful secondary metabolites

  • Yoshimatsu, Kayo
    • 한국식물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국식물생명공학회 2005년도 추계학술대회 및 한일 식물생명공학 심포지엄
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    • pp.88-94
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    • 2005
  • Plant tissue culture studies have been done for the preservation of medicinal plant resources and efficient production of pharmaceutically important secondary metabolites. Micropropagation methods for Cephaelis ipecacuanha have been established and these methods enabled much more efficient propagation of the plants than the conventional methods using seedling or layering. The C. ipecacuanha plants derived from tissue culture grew uniformly in the field and they showed higher alkaloid contents compared to the plants grown from seedlings. Hairy root cultures of C. ipecacuanha and Panax ginseng have been established by infection with Agrobacterium rhizogenes, and the production of important pharmaceuticals by these cultures have been successfully demonstrated. In the case of C. ipecacuanha, the highest alkaloid yields from the hairy roots cultured for 8 weeks were 2.75-fold cephaeline (5.5 mg) and one third emetine (0.7 mg) compared with those from the roots of one-year old plant propagated through shoot-tip culture and cultivated in a greenhouse (2.0 mg cephaeline and 2.0 mg emetine). In the case of P. ginseng, ginsenoside contents in the hairy roots optimally cultured for 4 weeks were much higher than those in the roots of 4-year old field-grown plant. Thus our medicinal plant tissue cultures demonstrate desirable properties. However, they are always exposed to danger of microbial contamination or unexpected trouble of culture facilities. Cryopreservation of plant tissue cultures is a reliable method for long-term preservation. Cryopreservation studies on these cultures are also presented.

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Fluridone affects quiescent centre division in the Arabidopsis thaliana root stem cell niche

  • Han, Woong;Zhang, Hanma;Wang, Myeong-Hyeon
    • BMB Reports
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    • 제43권12호
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    • pp.813-817
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    • 2010
  • Plants undergo cell division throughout their life in order to maintain their growth. It is well known that root and shoot tip of plants possess meristems, which contain quiescent cells. Fluridone (1-methyl-3-phenyl-5-(3-trifluromethyl (phenyl))-4-(1H)-pyridinone) is an established inhibitor of both ABA and carotenoid biosynthesis. However, the other functions of fluridone remain undiscovered. In this report, we provide experimental evidence that fluridone plays a role in the division of the quiescent centre of the Arabidopsis root meristem. This study examined the effects of exogenous fluridone and ABA on the development of the stem cell niche in Arabidopsis root. We show that fluridone promoted the division of stem cells in the quiescent centre, whereas exogenous ABA suppressed quiescent centre division. Furthermore, we established a novel regulatory function for fluridone by demonstrating that it plays an important role in postembryonic development.

지배실생(용천뽕/개량뽕)의 생장점에 Colchicine 처리로 창성한 내동성계 4배체뽕 (Cold-hardiness Tetraploid Induced by Colchicine Treatment in Mulberry Seedings(Morus alba L. Yongchonppong/Kaeryanppong))

  • 박광준
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.1-7
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    • 1994
  • 용천뽕에 개량뽕을 교배하여 채종한 종자가 발아하는 생장점에 0.2% colchicine용액을 적하처리하여 4배성인 4원뽕 11호, 12호, 13호 및 14호를 창성하였으며 그 주요특성은 다음과 같다. 1. 이른봄의 발아개엽기는 개량뽕과 비슷한 중뽕이다. 2. 잎은 대형 또는 중형의 심장형이며 표면은 강강감이 있으며, 잎두께, 잎면적중, 수분율이 2배체에 비하여 증가 되었다. 3. 2배체인 교배모품종에 비하여 평균가지길이는 짧고 마디사이길이와 측지수는 두 모품종의 중간정도이었다. 4. 가지끝마름율은 1.6~2.5%로서 강한 내동성(cold hardiness)을 나타내고 있으므로 내동성이 강한 3배체 육성소재로 유망하다.

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휴면아 경정 배양법을 통한 포도 '거봉' 에서 Grapevine fleck virus의 제거 (Elimination of Grapevine fleck virus from infected grapevines 'Kyoho' through meristem-tip culture of dormant buds)

  • 김미영;조강희;천재안;박서준;김세희;이한찬
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제44권4호
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    • pp.401-408
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    • 2017
  • 본 연구진은 세계 최초로 GFkV에 단독 감염된 포도 품종 거봉의 휴면아로부터 직접 경정 분열조직을 절취하여 배양함으로써 별도의 열처리나 화학처리 없이 GFkV가 제거된 신초 재생에 성공하였다. GFkV는 포도 식물체의 체관에만 한정적으로 존재하고 접목으로 감염되는 포도 바이러스이다. 경정조직은 $4^{\circ}C$에서 일정기간 저장된 1년생 경화가지의 휴면아로부터 0.3 mm (73 절편체)와 0.8 mm (5절편체)를 절취하였는데, 절취 부위는 생장점(apical meristem)을 포함하여 2 ~ 5개의 엽원기(leaf primordia)와 미분화 원기(uncommitted primordia) 1 ~ 4개를 포함하였다. 절취된 경정조직을 BA 3.0 mg/L와 IBA 0.1 mg/L가 혼합된 배지에 16주간 배양한 결과, 0.3 mm와 0.8 mm의 경정조직에서 각각 4.1%와 40.0%의 신초 재생률이 관찰되었고, 재생된 신초에서의 바이러스 제거율(재생된 신초수에 대한 RT-PCR negative 신초수의 백분율)은 0.3 mm의 경정조직에서는 100%를, 0.8 mm에서는 50%를 나타내었다. 신초를 증식시킨 후 감염바이러스를 다시 진단한 결과, 신초가 처음 재생되었을 때의 진단결과와 동일하였다. 휴면아로부터 분열조직을 배양하여 바이러스가 제거된 신초를 확보한 예는 세계적으로 보고된 바가 없는 것으로서, 본 연구진의 새로운 바이러스 제거방법은 향후 포도 뿐만 아니라 과수를 포함한 낙엽성 수목의 무병묘 생산에 매우 유용하게 활용될 수 있을 것이다.

참나물 현탁배양세포 유래 배발생캘러스에서 HD-Zip 유전자, Phc5의 클로닝과 특성 (Cloning and Characterization of Homeodomain-Zip Gene, Phc5 in Embryogenic Callus derived from Pimpinella brachycarpa Suspension Cultured Cells)

  • 손수인;김준철
    • 식물조직배양학회지
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    • 제26권2호
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    • pp.121-126
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    • 1999
  • 참나물 (Pimpinella brachycarpa)의 엽병 (petiole)절편체로부터 캘러스가 MS배지 (0.5mg/L 2,4-D와 0.1mg/L BAP)에서 유도되었으며 이들 캘러스로부터 치밀하게 배열된 세포집단(cell cluster)을 선발하여 현탁배양하였다. 이들 현탁배양세포들은 0.1 mg/L NAA가 포함된 MS고체배지에 배양되어 배발생 (embryogenic) 캘러스로 성장하였다. 배발생캘러스는 연한 노란색을 띠며 체세포배로 분화되었으며 이들 체세포배는 MS액체배지에서 발아되어 식물체로 성장하였다. 참나물 현탁배양세포 유래 배발생캘러스로부터 분리한 mRNA로부터 cDNA library를 합성하여 PCR을 수행한 결과 제조된 library의 삽입절편의 크기가 대부분 500bp이상임을 확인하였다. 이들 cDNA library로부터 전체 1.5 $\times$$10^{6}$개의 plaque를 혼성화하여 일차의 screening을 통해 19개의 cDNA clone을, 이차의 screening을 통해 5개의 cDNA clone을 얻었으며 이중 4개의 cDNA clone은 참나물 shoot의 HD-Zip 유전자인 Phz4 유전자와 동일한 약 1.4 kb 정도인 것으로 나타났으나, 1개의 cDNA clone, Phc5는 약 1.5kb정도의 크기를 나타내었다. 1.5kb인 Phc5는 Phz4유전자의 5'쪽으로 163bp의 염기가 추가로 발견되어 총 1,531 bp에 해당하였으며 18개의 polyA tail을 가지고 있었다. Phc5는 284번째에 ATG개시코돈이 있고 302개의 아미노산을 암호화하는 906개의 단백질 암호화 부위와 Homeodomain을 갖고 있었다. Phc5로부터 추정된 단백질은 기존 전사조절자에서 많이 보고된 HD의 구조적 특징을 갖고 있었다.

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기내배양시 몇가지 생장조절물질이 감자의 생장점 및 경엽조직편으로부터의 Callus 및 기관분화에 미치는 영향 (Effects of the Phytohormones on the Organ Differentiation and the Callus Induction from the Meristem Tip and the Segments of the Leaf and Stem of Potato by in vitro Culture)

  • 김충수;조재성;최창열
    • 한국작물학회지
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    • 제26권4호
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    • pp.344-349
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    • 1981
  • 감자의 생장점배양시 기본배지의 종류 및 기본배지에 첨가되는 2,4-D, NAA 및 Benzyladenine이 감자의 생장점으로부터의 기관의 분화 및 생장과 Callus의 유기에 미치는 영향을 구명하고져 본실험을 준행하였던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 기본배지중에 Benzyladenine (BA)의 농도를 증가시킬수록 감자 생장점에서 유기된 경의 신장은 현저히 촉진되었으나 BA를 첨가함 배지상에서는 근 및 Callus는 전혀 유기되지 않았다. 2. NAA를 0.5ppm 이상 함유하고 있는 배지상에서는 경의 분화가 완전히 억제되었고 모두 Callus가 유기되었으며 NAA의 농도를 증가시킬수록 Callus의 생장은 촉진되었다. 3. 2.4-D 1.0ppm 이하 함유하는 배지상에서 경의 분화가 완전히 억제되었고 Callus가 유기되었으며 Callus 생장율은 2.4-D 농도가 높을수록 많았는데 2,4-D보다는 NAA 첨가배지사에서 Callus의 생장율은 현저한 증가를 보였다. 4. NAA만을 첨가한 배지상에서는 경의 분화 및 생장이 억제되었으나 BA와 NAA를 조합처리하였을 때는 NAA 0.01ppm에서보다 0.1ppm에서 경의 분화 및 생장이 현저히 증가되었으며 2,4-D와 BA의 조합처리에서도 같은 경향이었던 바 BA와 NAA 혹은 2,4-D의 조합처리시에는 경의 분화 및 신장이 촉진되는 방향으로의 교호작용이 현저하였다. 5. 엽편보다는 경편에서 Callus의 유기 및 생장이 양호하였으며 이들 경엽조직편으로부터의 Callus 유기 및 생장에는 NAA보다는 2,4-D가 더욱 효과적이 었다. 6. MS 표준배지보다는 MS배지의 농도를 $\frac{1}{2}$ 로 희석하여 배지중의 무기성분 농도를 저하시킨 배지상에서 거의 경의 분화 및 신장이 현저히 촉진되었다. 7. 감자 생장점배양시 경의 유기 및 생장에는 MS \frac{1}{2} 배지에 BA 1.0ppm 및 NAA 혹은 2,4-D 0.1ppm을 첨가한 배지가 가장 효과적이었다.

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Rosenvingea orientalis (Scytosiphonaceae, Phaeophyceae) from Chiapas, Mexico: life history in culture and molecular phylogeny

  • West, John A.;Zuccarello, Giuseppe C.;Pedroche, Francisco F.;De Goer, Susan Loiseaux
    • ALGAE
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    • 제25권4호
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    • pp.187-195
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    • 2010
  • The genus Rosenvingea is well known in the tropics. Four species have been reported from Pacific Mexico: R. floridana, R. antillarum, R. intricata and R. sanctae-crucis. We collected a plant (Boca del Cielo, Chiapas) that we identified as Rosenvingea orientalis, a species not previously reported from Pacific Mexico. We were able to characterize the life cycle of this species for the first time in laboratory culture. It reproduced exclusively by plurilocular sporangia (plurangia). The mature plants were up to 6 cm long with cylindrical to compressed fronds (to 2 mm wide) with dichotomous branches in the upper half of the thallus. The medulla was hollow with 2-3 layers of large inflated colourless cells at the periphery. The cortex was comprised of 1 layer of small cells, each with a single chloroplast and pyrenoid. Linear plurangial sori with phaeophycean hairs formed along the mature fronds. Zoospore germlings developed into prostrate filamentous systems, each with a single phaeophycean hair that gave rise to a single erect shoot with multiple hairs arising near the tip. Molecular phylogeny using the psaA gene placed this isolate within the Scytosiphonaceae. It does not confirm the exact identification of R. orientalis, although its placement close to other Rosenvingea sequences was confirmed and morphological evidence supports its placement in R. orientalis. Our culture investigations indicated that it has an asexual life cycle. Further collections are needed to resolve the full generic and specific relationships of Rosenvingea and related taxa, and their reproductive patterns.