Effects of genotype and culture medium on plant regeneration from cotyledon segments of red pepper(Capsicum annuum L.) was investigated. Among combinations of IAA(0.25 and 0.50 mg/L) and zeatin(2.0 and 4.0 mg/L) added to MS medium, combination of 2.0 mg/L zeatin and 0.25 mg/L IAA was shown to be the best for shoot differentiation from cotyledon segments. Shoot regeneration from cotyledon explants took 9 to 25days, depending on genotypes and culture media. Early shooting was observed in Yeongyangjaelae, Putgochw, Karkovskij-A-35, Gris I-A-1 on MS medium containing 2.0 mg/L zeatin and 0.25 IAA mg/L. Percent of explants producing shoots, as also influenced by genotypes and culture media, were over 90% for 621, Yeongyangjaelae, Putgochw, Nikko jacksacgmulgochw, Ch-6-Num-216, and Kajenskij-A-35 when cultured on MS medum supplemented with 2.0 mg/L zeatin and 0.25 mg/L IAA and for Fresno chile, PI 169126, Kajenskij-A-35, jacksacgmulgochw, and PI 297438 on MS medium including 2.0 mg/L BA and 1.0 mg/L IAA.
Hypocotyls explants of melon seedling were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and 0.5 mg/L benzyl aminopurine (BA) for 6 weeks to produce somatic embryos. In somatic embryos produced through intervening bright yellow friable (BYF) from the explants, somatic embryos with two-cotyledon (26%) and horn-type cotyledon (74%) were observed. The procambial strand of cotyledons was originated from circular procambial tissues of lower hypocotyls. The circular procambial independently divided into two procambial strand at the edge of cotyledonary-node, and then connected to each cotyledon to form somatic embryos with two-cotyledon. When cotyledon was horn-type, the circular procambial strand in lower hypocotyls would continuously remain connected to the cotyledon. However, somatic embryos with two or horn type cotyledon formed an abnormal shoot apex without the tunica-corpus structure or dome shape in the inter-cotyledonary area. These results demonstrated that the variation of cotyledon in somatic embryos was closely related to procambial tissue differentiation and shoot apical formation.
Differential expression of the three chlorophyll afb binding (cab) protein gene (cabl, cab2, and cab3) promoters of Arabidopsis thaliana was studied in tobacco plants transformed with cab-CAT (chloramphenicol acetyltransferase) translational fusions. CAT activity was measured to monitor the activities of the cab promoters. The activity of cabi promoter was higher than the other two in transformed tobacco leaves and also in calli and shoots derived from the leaves. Their activities were organ-specific and were the lowest in roots, medium in stems, and the highest in leaves. The relative activity of cabi promoter in stems comparing to it activity in leaves was, however, much higher than the values of cab2 and cab3. When the cab promoter activity was expressed as CAT activity per unit chlorophyll instead of CAT activity per unit protein, the relative cab] promoter activity (stem/leaf) became almost unity. This result suggests that cab2 and cab3 show photosynthetic organ-specificity but cabl does not. Similar result was obtained in the differentiation process of stems and leaves from shoots derived from the transgenic tobacco leaves.leaves.
Chinese foxglove (Rehmannia glutinosa) is receiving much attention as one of the principal medicinal crops and the crude drug damand expands rapidly.This study was conducted to obtain the basic breeding information of Chinese foxglove. Effects of supplemental plant growth regulators were investigated on leaf tissue for proliferation. 100% callus formation, 31% plantlet regeneration and 6% root differentiation were obtained by adding 0.5 mg/L NAA and 2.0 mg/L BA. 2,4-D and Zeatin treatment also resulted in 95% increase in callus formation, but shoot was not formed. During the subculture, callus propagation rate recorded 15.4% with 0.2 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA and plant regeneration improved on MS medium supplemented with 0.2 mg/L NAA and 0.5 mg/L kinetin. The number of shoot formed ranged from 1.7 on WPM medium to 3.4 on MS medium with 0.1 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. Supplementation of 1.0 g/L activated charcoal improved the In vitro plant growth.
Young Hee Kwon;Won IL Choi;Hee Kyu Kim;Kyung Ok Kim;Ju Hyoung Kim;Yong Sup Song
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.23-23
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2021
Apple (Malus×domestica Borkh.; Rosaceae) is an important fruit crop grown mainly in temperate regions of the world. Tissue culture in vitro is a biotechnological technique that has been used to genetically improve cultivars (scions) and rootstocks. This could be important in the production of genetically uniform scions and rootstocks for commercial apple production. In nurseries, apple plants are produced by grafting scions onto rootstocks. The Cornell-Geneva (Geneva® series) breeding program has bred several dwarf rootstocks that are resistant to diseases and pests and are also cold hardy. This study was conducted to determine the optimal medium strength to improve sprouting shoot rate of apical meristem of the apple rootstocks of fire blight resistance. The apple rootstocks apical meristem at size (0.2 mm to 0.3 mm) with axillary buds were cultured on the MS(Murashige & Skoog) medium supplemented with plant growth regulators. The sprouting ratio and growth characteristics was evaluated after eight weeks in vitro culture. The highest rate of bud differentiation and shoot formation were 23.8% and 55.6%, respectively. After 6 weeks, shoots were regenerated from apical meristem, and their growth characteristics was significantly varied on the respective basal medium with different plant growth regulators. Our studies showed that the apple rootstocks the apple rootstocks of fire blight resistance plantlets could be successfully produced from apical meristem differentiated out of young twigs via organogenic regeneration.
In order to provide basic information for the application of tissue culture to a rice breeding program. experiments were carried out on the callus formation from seedings and anthers and organ differentiation from the callus of rice varieties and their hybrids. It appeared that in general the callus tissue was more easily induced in japonicas than in indicas with significant varietal differences. A highly significant positive correlation (r=0.896$^{**}$) was obtained between the fresh weight of callus induced in NAA medium and in 2, 4-D medium in the same variety. Callus formed on the medium with 2, 4-D was more friable than that formed on the medium with NAA. The callus formation from seedlings was better than from anthers in upland rice varieties. The easiness of the callus formation appeared to be a dominant character in crosses of rice varieties. Varietal difference was also noticed in the organ differentiation from the callus and the root differentiation seemed to be easier than the shoot differentiation. Most of the plants derived from the cal1us were albinos and the frequency of occurrence of albinos was greater in callus of seedlings than in that of anthers. Greater amount of callus tissue was formed from anthers of $F_1$ plants than anyone of their parents in remote-crosses but it was clear in close-crosses. A highly significant positive correlation (r=0.504$^{**}$) was found between the callus formation from seedlings and from anthers.
Embryogenic calli of Codonopsis lanceolata were cultured on MS agar medium containing various concentrations of sucrose as a carbon source. Upon transfer to MS basal medium, somatic embryos of cotyledonary stage converted to plantlets. When sucrose was added with greater than 4%, the number of shoots and roots regenerated from somatic embryo increased. However, the growth of shoots and roots was retarded in agar medium with more than 2% sucrose, but promoted in medium with lower concentration of sucrose. Saponin contents of shoots regenerated from somatic embryos, embryogenic calli, non-embryogenic calli, and native roots were determined by HPLC. Saponin contents of native root was variable, depending on regenerant, embryogenic calli, and cotyledonary embryos. The saponin contents of regenerated roots in medium with high sucrose was similar to native roots. Saponins content based on cell differentiation to shoot and root was dramatically decreased. This results could be effectively controlled for the production of useful secondary metabolites.
When cultured soybean immature seed on 15th days after flowering, suitable temperature in formation of callus were $24{\sim}27^{\circ}C$, and embryogenic callus(EC) were generated at medium containing NAA with growth regulators, and then, results were subcultured the EC, a plenty of shoots and roots were formed at medium supplemented BA 2mg/1 and IAA 2mg/1, respectively, however when used at medium the same time supplemented BA 2mg/1 and IAA 2mg/1, formation of cullus was energetic, and a symptom of organization was not showed , Total lipid contents include in each cultures were increased at low temperature of cultural conditions as much as possible, but glycolipid, phospholipid, free sterol contents were a little increased at $24{\sim}27^{\circ}C$, and free sterol content was increased at a case of embryogenic structure were generated. In fatty acid compositions in each cultures, the contents of unsaturated fatty acid were plenty in EC, and unsaturation rate was 0.837. Besides, in sterol compositions, cholesterol content was remarkably high in EC than that of other cultures.
The enzyme invertase contributes to sugar unloading, pathogen defense, differentiation and development in plants. We cloned the complete cDNA of a soluble acid invertase from pea seedlings (Pisum sativum) via RT-PCR and the rapid amplification of the cDNA end (RACE) technique. The full-length cDNA of the soluble pea invertase comprised 2237 bp and contained a complete open reading frame encoding 647 amino acids. The deduced amino acid sequence showed high homology to soluble acid invertases from various plants. Northern blot analysis demonstrated the soluble acid invertase gene of P. sativum was strongly expressed in sink organs such as shoot tips and root tips, and induced by abscisic acid, gibberellic acid and jasmonic acid in shoots. Especially, gibberellic acid enhanced the gene expression of the soluble acid invertase in a time-dependent manner. This study presents that the gene expression patterns of a soluble acid invertase from pea are strongly consistent with the suggestion that individual invertase gene product has different functions in the growing plant.
A large amount of information is currently available for somatic embryogenesis of plants. However, one common problem related to somatic embryos is that the conversion rate can be low for some species. Apical meristems are responsible for post-embryonic growth of the embryo. The low percentage observed is most likely a result of poor apical meristem development or defects in the meristem organization during somatic embryogenesis. In flowering plants, apical meristems are well developed by the late heart stage of zygotic embryo development. In conifers, such as white spruce, apical meristems are formed at the pre-cotyledon stage. Thus, apical meristem development occurs very early, prior to the maturation stage of embryo development. Once formed, meristems are stably determined. In the somatic embryo, as exemplified by white spruce, since embryo development is not synchronous, tissue differentiation including apical meristem formation occurs throughout the“maturation”stage. Different apical meristem organizations can be found among different individuals within a population. In contrast to their zygotic counterparts, the apical meristems appear not to be stably determined as their organization, as the shoot apical meristem especially, can be easily modified or disrupted. Precocious germination seldom results in functional plantlets. All these observations suggest that the conditions for somatic embryo maturation have not been optimized or are not suitable for meristem formation and development. The following strategies could improve meristem development and hence conversion: 1. Simulate in ouuio conditions to promote meristem development prior to the“maturation”treatment.2. Prevent deterioration of apical meristem organization during somatic embryo maturation.3. Promote further meristem development during embryo germination.
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