The clinical specimens used in this study were collected during the period from March 4, to December 30, 1983, from children's hospitals in Seoul area. They came from clinically apparent cases of diarrheal disease in hospitals. Many specimens were taken from rectal Swabs. During this period, 2166 stool cultures were streaked onto MacConkey plate and were them deposited in selenite broth. Colonies resembling pathogens on MacConkey medium were picked to KIA, Urea agar, malonate broth, ONPG broth, SIM. Reaction on those media cultures were identified biochemically with using API 20E test kit and confirmed serologically with commercially avabile Salmonella antisera(Difco) or Shigella antisera(Denka, Japan). The sensitivity of Salmonella and Shigella tested to ampicillin cephalosporin, chloramphenicol, colistin, gentamicin, tetracycline, streptomycin, nalidixic acid, neomycin, polymyxin B was performed by means of disc diffusion method recommended by Bauer-Kirby, using the discs prepared in BBL Laboratory. 1. There were 34 (1.6%) isolations of Salmonella cultures and 52(2.4%) isolations of Shigella from the 2,116 specimens. Only 53%of Salmonella were isolated by direct streaking on MacConkey plating media, by contrast, 80% of the Shigella were isolated directly. 2. Shigella flexneri types comprised 56% of the Shigellae isolate from 52 Shigellae identified 24% of Salmonella enteritidis ser typhimurium were identified. 3. Concerning to Salmonella and Shigella occurance according to month and sex, They shows relatively higher for the male than in case of female, and 2-3 age were shown the highest group. 4. October is the month with highest incidences. 5. In the sensitivity patterns of Shigellae, most of them were appeared to be resistant ampicillin, streptomycin, tetracycline, in case of Salmonella, 15% of them were resistant to chloramphenicol.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 금은화를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 금은화를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methanol를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균(Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Salmonella paratyphimurium, Shigella flexneri, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 금은화 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 금은화의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Shigella dysenteriae가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 금은화의 ethyl acetate 추출물과 인진쑥의 ethyl acetate 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과, 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 금은화의 ethyl acetate 추출물이 식중독 유발세균의 성자에 미치는 효과를 검정하기 위해 Staphylococcus epidermidis 및 Shigella dysenteriae의 배양액에 금은화의 ethyl acetate 추출물을 각각 3,000ppm 농도로 첨가했을 시, Staphylococcus epidermidis의 생육이 12시간까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Shigella dysenteriae의 생육도 12시간까지 지연시킬 수 있었다. 이상의 결과 금은화의 ethyl acetate 추출물은 Staphylococcus epidermidis와 Shigella dysenteriae의 성장을 억제시킴을 알 수 있었다.
Shigella infection usually produces gastrointestinal symptoms but rarely causes urinary tract infection. A 7-year-old girl was admitted for fever, chills, right flank pain, and dysuria. She had no vomiting or diarrhea. There was mild tenderness in her right lower abdomen, and right CVA tenderness was also noted. Acute pyelonephritis was diagnosed by abdominal CT. She showed improvement with intravenous administration of antibiotics. The first urine culture grew $1{\times}10^5$ CFU/mL Shigella dysenteri. Although urinary tract infections due to Shigella species are extremely rare, Shigella species should be considered as a possible cause of pediatric urinary tract infection. We report the first case of urinary tract infection caused by S. dysenteri, which presented as acute pyelonephritis without gastrointestinal symptoms in a child.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 연교를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 연교를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methanol를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균 (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Salmonella paratyphimurium, Shigella flexneri, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 연교 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 연교의 열수 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Staphylococcus epidermidis와 Shigella flexneri가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 연교의 열수 추출물과 느릅나무의 methanol 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 연교의 열수 추출물이 식중독 유발세균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 Staphylococcus epidermidis 및 Shigella flexneri의 배양액에 연교의 열수 추출물을 각각 10,000 ppm 농도로 첨가했을 시, Staphylococcus epidermidis의 생육이 12시간 이상까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Shigella flexneri의 생육도 24시간까지 지연시킬 수 있었다. 이상의 결과 연교의 열수 추출물은 S. epidermidis와 Shigella flexneri의 성장을 효과적으로 억제시킴을 알 수 있었다.
장감염성 설사환자의 가검물로부터 분리된 30균는 모두 Shigella sonnei로 동정되었다. 이들 균주의 항생제 내성을 조사한 결과 30균주 중 27균주가 Tr(Trimethoprim-sulfamethoxazol)에서 내성을 보였고, 이들 중 SG-48균주는 Ap(Ampicillin), Cp(Cephalothin); Pi(Fiperacillin)에 대해서도 내성을 보인 반면, 나머지 3균주는 모든 항생제에 감수성을 나타내었다. 분리된 30균주 중 4균주를 선발하여 성장 검사를 실시한 결과 선발된 S. sonnei는 pH 4와 pH 9의 조건에서는 모두 성장이 저해되었으며, NaCl 9%첨가구의 경우 4균주의 성장이 저해되었으나 SG-73균주는 배양24시간 이후부터 성장하였다. 선발된 S. sonnei를 4$^{\circ}C$에서 배양한 경우 모든 균의 성장이 저해되었으나, 1$0^{\circ}C$에서 배양한 경우 배양 5일 이후부터 성장하였으며 영양결핍환경에서는 배양 15일까지 높은 균수를 유지하였다. 선발된 S. sonnei를 6$0^{\circ}C$에서 30분간 가열처리 한 경우 4~5 log cycle 감소하였으며, 7$0^{\circ}C$에서 5분 가열처리에 의해서는 검출되지 않았다.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 청피를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 청피를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methanol를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균 (Staphylococcus-aureus, Bacillus cereus, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Ercherichia coli. Salmonella typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aruginoia, Shigella sonnei) 에 대하여 항균효과를 조사하였다. 청피 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 청피의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Staphylococcus auren와 Pseudomonas aeruginosa가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 청피의 ethyl acetate 추출물이 식중독 유발세균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 Bacillus cereus 및 Shigella sonnei의 배양액에 청피의 ethyl acetate 추출물온 각각 5,000 ppm 농도로 첨가했을 시, Bacillus cereus의 생육이 24시간 이상까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Shigella sonnei의 생육도 12시간까지 지연시킬 수 있었다.
각종 식중독의 원인균으로 중요시되는 11종의 균주에 대해서 황금탕 및 황금 추출물의 항균력을 검토한 결과, 황금탕 추출물은 Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli O111 및 Escherichia coli O126에서 항균력을 나타내었고, 황금 추출물은 Staphyoccus aureus, Bacillus cereus, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli O111, Escherichia coli O126 및 Escherichia coli O157에서 항균력을 나타내었다. Listeria monocytogenes에 대해서는 황금탕 및 황금 추출물 모두 항균력이 없었고, Escherichia coli O157에 대해서는 황금탕 추출물은 항균력이 없었으나, 황금 추출물은 항균력을 나타내었다. 황금탕 추출물의 최소저해농도는Staphyloccus aureus와 Bacillus cereus에서 40 mg/mL, Shigella flexneri 와 Salmonella Enteritidis에서 100 mg/mL이었고, 황금 추출물의 최소저해농도는 Bacillus cereus에서 10 mg/mL, Staphylococcus aureus, Shigella flexneri 및 Salmonella Enteritidis에서 20 mg/mL이었으며, 황금탕 및 황금 추출물 모두 Staphyloccus aureus와 Bacillus cereus에 대해 48시간까지 배양하는 동안 최소저해농도 이상에서는 균이 거의 생육하지 못하였다. 이상에서 황금탕 추출물보다는 황금 추출물의 항균력이 더 강하며, 황금탕 추출물의 식중독 세균들에 대한 항균력은 황금에 의한 것으로 생각된다. 또한, 항균력이 확인된 세균으로 인한 각종 식중독에 황금탕의 사용 가능성을 고려할 만하며, 황금 추출물에 대한 천연 식품 보존료로서의 이용 가능성을 검토할 가치가 있다고 사료된다.
1973년부터 1985년 사이에 대구지방에서 분리된 Shigella는 약 1,200주였는데, 대부분이 Shigella flexneri였고, S. sonnei는 약 20%였으며, S. dysenteriae와 S. boydii는 극히 적었다. 분리균의 95%이상이 chloramphenicol(Cm), tetracycline(Tc), streptomycin(Sm), sulfisomidine(Su), ampicillin(Ap), trimethoprim(Tf) 등의 전부 또는 일부 약제에 내성이었으며, kanamycin, nalidixic acid(Na)와 rifampin(Rf)에 내성인 균주는 소수 있었으나, cephaloridine, gentamicin, amikacin 등에 내성인 균주는 없었다. 1973년에 분리된 균은 약 절반이 약제내성이었으나, 1977년 이후 분리된 균은 95% 이상이 약제내성이었다. 1977년 까지는 Cm, Tc, Sm 및 Su의 4제 내성균이 가장 많았으나 1978년 부터는 Cm, Tc, Sm, Su, Ap 및 Tp의 6제 내성균이 가장 많았다. 약 75%의 균이 그 약제내성을 접합에 의하여 Escherichia coli에 전달하였으므로 이 약제내성은 R plasmid에 의한 것으로 생각되었다. 대다수의 균에 있어서 약제내성 전부를 E. coli에 전달하였으나, Na와 Rf의 내성은 전달되지 않았다. 일부 균주의 약제내성은 E. coli에 전달될 때 분리되는 일이 있었으나, 그 수는 극히 적었다. Shigella의 R Plasmid는 대부분이 비적합성군(incompatibility group) F II에 분류되었으나, 극소수는 B군에 속하였고 군별이 안되는 것도 있었다.
Shigella remains to be an important enteric pathogen in this country for the present. Moreover, most of the isolates have become multiple resistant to various antibiotics which used to be drugs of choice for shigellosis. This study was made as an attempt to assess the present stage of antibiotic resistance and the incidence and transferability of R factors of Shigella. A total of one hundred and seventeen strains of Shigella isolated from patients in Seoul and provincial area between 1982 and 1983 were tested for their resistant to antimicrobial agents and transmission of R-plasmid. Antibiotic susceptibilities were determined by an agar dilution method. Muller hinton agar were used for the assay of drug resistance and tryptic soy broth were used for propagating medium for conjugation. Shigella isolated found to be one or more antibiotics were considered potential donor of R-plasmid. The following results were obtained. 1. Among 117 strains of Shigella isolated, 111 strains(94.9%) were found to be resistant to one or more drugs tested and 97.3% of these resistant strains were multiply resistant, indicating the multiply resistant strains were more than the single resistant strains. Only six strains were susceptible to all drugs tested. 2. Among 117 strains of Shigella isolated, 107 strains(91.5%) were resistant to Tetracyclin(Tc), 106 strains(90.6%) to Chloramphenicol(Cp) and Streptomycin(Sm), 97 strains(82.9%) to Ampicillin(Ap), 68 strains(58.1%) to Cephaloridine(Cr), 10 strains(8.5%) to Nalidixic acid(Na), 5 strains(4.3%) to Kanamycin(Km) and 2 strains(1.7%) to Rifampicin. No strain was resisfant to Amikacin(Ak) and Gentamicin(Gm). 3. All drug-resistant Shigella strains, except three, were multiply resistant to two or more drugs. Fifty eight strains were resistant to five drugs, followed by 26 strains resistant to dour drugs, 12 strains resistant to three drugs and 11 strains resistant to six drugs. 4. The 73% of multiply drug-resistant Shigella transferred their resistance to E. coli by conjugation and the resistance was considered to be mediated by R-plasmid. Resistance to Nalidixic acid and Rifampicin were not transferred by conjugation to recipient. As for the transferability of resistance to each seperate drug, Ap resistance was transferred with 73.2% frequence and Cm and Tc resistance were transferred with approximately 50-60% frequence whereas Sm and Cr resistance were transferred in 19.1-21.4% The other four drugs resistant failed to transfer their resistance to recipient. 5. As for the incidence and transferability of resistance to each seperate drug, the strains resistant to Tc and Cm were encountered most frequently with the rate of 91-92%, whereas transfer of Tc and Cm were low, 51-52%. The incidence of Sm resistance was very high(90.6%) but transferability of drugs resistance was much lower(25.4%). Though the incidence of Km reristance was much lower(4.3%) transferability of Km resistance was considerably higher(60%). 6. The greater the multiplicity of resistance, the greater was the likelihood that part of all of the resistance markers would be transferable.
In order to determine the virulence properties of eleven strains of Sh. flexneri isolated from diarrheal patients the congo red test, the $Ser{\acute{e}}ny$ test, the HeLa cell invasion test and electrophoresis of plasmids were carried out. The results were summarized as follows. 1. Virulent strains were not determined by the result of Congo red absorption test. 2. Virulent strains showed positive reaction by the Sereny test and the HeLa cells invasion, but avirulent strains revealed negative reaction at those tests. 3. The temperature condition of bacterial growth was a factor of virulent expression. 4. Virulent strains were mostly possessed of a 130.3 Mdal plasmid, but avirulent strains were not.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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