• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제14권1호
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• pp.155-167
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• 1997

본 연구는, HBV의 증식 및 감염력을 파악하는데 가장 중요한 표지자로 알려진 HBV DNA를 최근 임상에서 많이 이용되고 있는 PCR법을 사용해 검출함으로써 기존의 dot blot법과 PCR법을 비교하고, 만성 간질환 환자에서 HBV의 e항원, 항체체계에 따른 HBV DNA의 검출율을 PCR법을 이용하여 알아봄으로써 HBV의 증식 및 감염력을 파악하고자 무증상 HBsAg 보유자 17명(HBeAg 양성 9명, anti-HBe 양성 8명), 만성 B형 간염 환자 91명(HBeAg 양성 50명, anti-HBe 양성 41명), 간경변증 한자 57명(HBeAg 양성 21명, anti-HBe 양성 36명), 원발성 간세포암 환자 27명(HBeAg 양성 10명, anti­HBe 양성 17명)을 대상으로 HBV DNA의 검출빈도를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Dot blot법의 경우 HBeAg 양성인 환자군, anti-HBe 양성인 환자군에서의 HBV DNA의 검출율은 각각 58.9%, 34.3% 이었고, PCR법에 의한 검출율은 상기군에서 각각 72.2%, 53.9%였다. HBeAg 음성인군에서의 PCR법에 의한 HBV DNA 검출율은 무증상 HBsAg 보유자의 경우 25.0%, 만성 B형 간염 환자군의 경우 61.0%, 간병변증 환자군의 경우 52.8%, 원발성 간세포암 환자군의 경우 52.9%였다. 무증상 HBsAg 보유자에서 HBeAg 양성인 군과 음성인 군간의 HBV DNA 검출율은 각각 77.8%, 25.0%로 유의한 차이가 있었으나, 나머지 군에서는 HBeAg 양성인 군과 음성인 군간의 HBV DNA 검출율의 유의한 차이는 없었다. 이상의 결과로 PCR을 이용할 경우 기존의 dot blot보다 훨씬 예민하게 HBV DNA를 검출할 수 있고, HBsAg 양성인 만성 간질환 환자의 대부분에서는 HBeAg 및 anti-HBe 표식자 체계와는 무관하게 바이러스의 증식이 지속되고 있음을 알 수 있었으며, PCR법이 무증상 HBsAg 보유자의 예후를 알 수 있는 지표로서 유용성에 대한 가능성을 의미하나 확실한 의의를 알기 위하여 전향적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

• 한국가금학회지
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• 제37권2호
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• pp.181-190
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• 2010

본 연구에서는 Mycoplasma gallisepticum F 주 생독 백신(PoulShot$^{(R)}$ MG-F)의 안전성과 효능을 평가하였다. 충청북도 진천과 경기도 안성 지역의 산란계 농장을 선정하여, 백신과 야외주 공격 접종에 따른 혈청 역가 변화, 상부 호흡기에서의 마이코플라즈마균 재분리, 조직학적 병변과 백신 접종군 및 백신 미접종군 간의 산란율 및 오파란율의 차이를 농장별로 평가하였다. 백신 접종에 의한 혈청 역가 변화는 백신 접종 후 3주부터 확인되었으며, 농장에 따라 접종 후 23주에서 31주까지 지속됨으로써 백신 항체가 오랫동안 유지되는 것을 확인할 수 있었다. 또한 상부 호흡기에서 MG-F 재분리 및 PCR에 의한 유전자 검출도 백신 접종 후 31주까지 양성이었다. 이러한 항체 및 항원의 지속적인 검출은 상부 호흡기에 MG-F 백신주의 집락 형성이 오랫동안 지속된다는 것을 의미하는 것이다. 동일한 방법으로 백신 접종군에 대한 야외주 공격 접종 후 상부 호흡기에서의 백신주 집락 형성을 분석한 결과, 공격 접종 후 3주까지 백신주의 집락 형성율이 야외주보다 동등하거나 높은 것으로 확인됨으로써 야외주 공격에 대한 백신주의 방어력이 입증되었다. MG-F의 안전성과 생산성 측면에서의 효능을 야외 농장에서 검증하기 위하여 두 실험 농장에서 백신 접종군과 백신 미접종군간의 산란율 및 오파란율을 비교하였다. 그 결과, MG-F 접종에 따른 임상적 부작용과 산란율 하락은 발견되지 않았으며, 오히려 백신 접종군의 오파란율이 백신 미접종군보다 평균 1~3% 낮은 것으로 분석됨으로써 백신 접종에 의한 난질 개선 효과가 있음이 확인되었다. 따라서, PoulShot$^{(R)}$ MG-F 생균백신을 산란계에 접종하였을 때 임상적으로 안전하였으며, 오랜 기간 야외 감염에 방어할 수 있는 항체 형성과 상부 호흡기에서의 지속성이 확인됨으로써 마이코플라즈마 야외 감염을 효율적으로 방어할 수 있을 것으로 판단된다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
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• 제15권2호
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• pp.85-90
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• 2012

Purpose: Commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits have been considered less reliable for children than for adults. The aim of this study was to compare four ELISA kits and in-house immunoblotting based on the analysis of anti-H. pylori-IgG antibody reactivity. Methods: A total of 399 serum samples were collected at the GNU Hospital during 1998-1999. All sera were tested using ELISA and immunoblotting. Statistically significant differences were determined by the $x^2$ test. Results: The overall seropositivity rates using GAP IgG, Genedia IgG, HM-CAP, Pyloriset EIA-G, and immunoblotting were 13.0%, 25.1%, 18.3%, 15.8%, and 62.9%, respectively. Immunoblotting showed a higher seropositivity rate than did all four ELISA kits in all age groups. Genedia IgG had the highest seropositivity among the ELISA kits. The seropositivity rate for children aged 13 to 18 months was lowest, and that of children aged 15 years was highest (90.0%). The seropositivity rate for children aged 7 months to 5 years was significantly lower than that for children aged 6 to 15 years among the four ELISA kits (p<0.0001) and immunoblotting (p=0.02). Conclusion: Immunoblotting is the most sensitive test for detection of anti-Helicobacter pylori IgG antibodies among the serological tests in this study. These results emphasize the need for standardization when commercial ELISA tests are used in different nations or in young age groups. Immunoblotting could be a suitable noninvasive assay for serodiagnosis and seroepidemiologic study of H. pylori infection in Korean children.

• 생명과학회지
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• 제26권5호
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• pp.620-631
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• 2016

바이로이드는 매우 작은 RNA 분자로 구성되어 있으며, 외피 단백질이 없고 오로지 식물에만 감염되어 질병을 유발한다. 바이로이드 감염 질병을 예방하거나 진단하는 것은 상당히 어려운 일이며, 이는 병징이 초기에는 발견되지 않고 수확기에 접어들어서 발견되기 때문이다. 한편, 혈청학적인 방법은 식물 병원체를 검출하기 위해 주로 사용되었으나 바이로이드는 핵산인 RNA로만 구성되어 있기 때문에 이 방법으로 검출할 수가 없다. 때문에 바이로이드를 검출하기 위해 주로 사용되는 방법은 분자 생물학적인 방법으로, 초기에는 바이로이드의 분자적인 크기와 구조적 특징을 이용한 겔 전기 영동 방법이 주로 사용되었다. 그 후에는 역전사 반응과 중합효소 연쇄반응을 접목시킨 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR) 방법이 활용되었고, 그에 대한 효율적인 결과 확인을 위해 형광 물질을 도입한 실시간 역전사 중합효소 연쇄반응(Real-time RT-PCR)이 도입되었다. 그러나 그들은 온도를 변화시키기 위한 값비싼 기기와 전문적인 인력이 필요함으로 현장에서는 활용되기가 어렵다. 최근 개발된 고리 기반의 등온 증폭법(Loop-mediated isothermal amplification)의 경우, 온도의 변화가 필요 없어 비싼 온도 조절 기기가 필요하지 않다. 또한 매우 높은 증폭 효율을 지니며 반응 시간이 짧은 등의 여러 장점을 지니고 있기에 최근 현장 진단용 기술에 도입되고 있다. 이러한 배경으로, 이 총설에서는 바이로이드 유발 질병에 대하여 요약하고 그에 대한 검출 및 진단 방법에 대한 연구 동향에 대하여 기술하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제30권2호
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• pp.83-90
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• 1992

Toxoplasma증의 혈청학적 진단에 있어서 민감도를 증가시키기 위해 간접 latex 응집반응의 결과와 비교하면서 ELISA를 개발하였으며, 뇌척수액의 검사 시료로서의 가능성을 검토하였다. 아울러 중추신경계 질환환자로부 터기생충질환을 감별하기 위하여 1986년부터 1991년까지 전국 카 병원에서 채취한 혈청과 뇌척수액에 대하여 간접 latex 응집반응(ILA)과 ELISA를 실시하여 Toxoplasma 항체 보유 양상을 비교 검토하였다. 전체 2,016 건의 혈청에 대해 ILA를 실시하여 76건(3.8%)의 양성 (1:32이상의 titer)을 얻었다. 그러나 양성 혈청환자에서 채취한 뇌척수액에서는 낮은 titer의 반응은 있었으나 양성은 나타나지 않았다. 이들 양성 혈청의 양성 혈청 및 음성 혈청에 대하여 ELISA로 항체검사를 실시한바 ILA의 titer가 1 : 32인 군에서 통계적으로 유의한 차이를 나타내는 항체값을 얻었으며, 그 흡반도는 0.40이었다. 뇌척수액에 대한 ELISA로는 ILA의 1 : 64 titer군에서 통계 적으로 유의한 차이가 나타났고 그때의 흡광도 0.27을 양성 판단의 기준으로 사용하였다. ELISA에 의한 항체 검사상 전체 혈청에서 7.0%의 양성을 검출하여 ILA보다 약 2배 정도의 높은 민감도를 보였으며, 뇌척수액에서 는 5.6%의 양성률을 보여 ELISA는 뇌척수액에서의 항체 검출시 유용한 방법이라고 판단하였다. ILA에 비하여 ELISA는 약 2배 정도 높은 양성률을 내었고 양성률은 나이에 마라 40대 이후 급격한 증가를 보였으며, 여성보 다는 남성에서 약 2배 정도 양성률이 높게 나타났다. ELISA에 의한 뇌척수액의 항체 검사에서는 양성률의 성별 차이를 나타내지 않았다. 이상의 결과로 판단할 때, ELISA가 ILA보다 Toxoplasma 항체 검출의 민감도가 높았으며, 뇌척수액은 ELISA의 좋은 검사시료가 되며, 특히 중추신경계 Tocxoplnsma증의 진단에 있어 뇌척수액에 대한 항체 검사에서 ELISA가 유용하다고 판단하였다.

• 환경위생공학
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• 제1권1호
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• pp.69-79
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• 1986

랫트와 마우스에 M. Pulmonis의 감염률을 조사하기 위해 마우스 310수 랫트 330수를 사용하여 이 균에 의한 여러가지 친화성조직중 가장 높게 감염을 일으키는 부위와 각 채취부위별로 검체의 배양검사 및 보체결합 반응에 따른 특이항체 양성률등의 실험을 수행하여 다음 결론을 얻었다. 1. 마우스와 렛트에서 M. Pulmonis의 양성률이 높은 부위는 마우스에서 구강, 안, 비강순이고 랫트에서 비강, 기관지, 구강 순으로 나타냈다. 2. M. Pulmonis 양성률은 A사육장의 마우스 50수중 6수$(12\%)$이며, B사육장에서는 8수$(16\%)$이었다. 한편 랫트에서 60수중 33수$(55\%)$와 42수$(70\%)$로 각각 나타냈다. 3. 랫트와 마우스에서 채취한 혈청으로 보체결합 반응을 통하여 얻은 특이적인 항체가가 1:5(< 1:5)보다 낮은 경우는 마우스 100수중 73수$(73\%)$이고 1:5 보다 높은 항체가를 보인 경우에는 24수$(24\%)$ 이었으며 나머지 3수$(3\%)$는 항보체기능으로 측정하지 못했다. 한편 랫트에서 1: 5보다 낮은 항체가를 보인 경우에는 총 120수중 42수$(35\%)$ 이고 1: 5보다 높은 경우 73수$(61\%)$의 양성율을 보였으며 나머지 $6\%$는 항보체 기능으로 측정이 안되었다.

• 생명과학회지
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• 제30권8호
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• pp.731-741
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• 2020

코로나바이러스감염증-19(COVID-19)는 SARS-CoV-2에 의해 발병된다. 지금까지 인간에게 감염되는 7 가지 종류의 코로나 바이러스가 보고되었다. 그 중, HCoV-229E, HCoV-OC43, HCoV-NL63, 그리고 HCoV-HKU1 등 4종류의 코로나바이러스는 감기와 같은 단순 호흡기 질환을 유발한다고 보고되었다. 반면, SARS-CoV는 2002년에, MERS-CoV는 2012년에 각각 대유행을 일으킨 바 있다. 가장 최근에는 2019년 12월 중국 우한에서 처음 보고된 SARS-CoV-2가 전세계적인 대유행의 원인이 되고 있다. 이러한 SARS-CoV-2를 진단하고, 치료하고, 예방하기 위해서는 신속 정확한 진단키트, 치료제, 그리고 안전한 백신의 개발의 필수적으로 요구된다. 이러한 강력한 도구들을 개발하기 위해서는 SARS-CoV-2의 표현형, 유전자형, 그리고 생활주기 등의 연구가 선행되어야 한다. SARS-CoV-2의 진단기술은 현재 크게 두가지의 큰 분야인 분자진단과 면역혈청학적 진단으로 구분할 수 있다. 분자진단의 경우 SARS-CoV-2의 유전체를 대상으로 하며, 면역혈청학적 진단은 SARS-CoV-2의 항원 단백질 혹은 SARS-CoV-2에 대한 항체를 대상으로 한다. 본 총설에서는 SARS-CoV-2의 표현형, 유전체 구조, 그리고 유전자 발현에 대해서 정리하고, SARS-CoV-2에 대한 다양한 진단 기술 등에 대한 기초지식을 제공하고자 한다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제16권9호
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• pp.3595-3604
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• 2015

Hepatocellular carcinoma (HCC) has been one of the most fatal malignant tumors worldwide and its associated morbidity and mortality remain of significant concern. Based on in-depth reviews of serological diagnosis of HCC, in addition to AFP, there are other biomarkers: Lens culinaris agglutinin-reactive AFP (AFP-L3), descarboxyprothrombin (DCP), tyrosine kinase with Ig and eprdermal growth factor (EGF) homology domains 2 (TIE2)-espressing monocytes (TEMs), glypican-3 (GPC3), Golgi protein 73 (GP73), interleukin-6 (IL-6), and squamous cell carcinoma antigen (SCCA) have been proposed as biomarkers for the early detection of HCC. The diagnosis of HCC is primarily based on noninvasive standard imaging methods, such as ultrasound (US), dynamic multiphasic multidetector-row CT (MDCT) and magnetic resonance imaging (MRI). Some experts advocate gadolinium diethyl-enetriamine pentaacetic acid (Gd-EOB-DTPA) MRI and contrast-enhanced US as the promising imaging madalities of choice. With regard to recent advancements in tissue markers, many cuting-edge technologies using genome-wide DNA microarrays, qRT-PCR, and proteomic and inmunostaining studies have been implemented in an attempt to identify markers for early diagnosis of HCC. Only less than half of HCC patients at initial diagnosis are at an early stage treatable with curative options: local ablation, surgical resection, or liver transplant. Transarterial chemoembolization (TACE) is considered the standard of care with palliation for intermediate stage HCC. Recent innovative procedures using drug-eluting-beads and radioembolization using Yttrium-90 may exhibit beneficial effects in HCC treatment. During the past few years, several molecular targeted agents have been evaluated in clinical trials in advanced HCC. Sorafenib is currently the only approved systemic treatment for HCC. It has been approved for the therapy of asymptomatic HCC patients with well-preserved liver function who are not candidates for potentially curative treatments, such as surgical resection or liver transplantation. In the USA, Europe and particularly Japan, hepatitis C virus (HCV) related HCC accounts for most liver cancer, as compared with Asia-Pacific regions, where hepatitis B virus (HBV) may play a more important role in HCC development. HBV vaccination, while a vaccine is not yet available against HCV, has been recognized as a best primary prevention method for HBV-related HCC, although in patients already infected with HBV or HCV, secondary prevention with antiviral therapy is still a reasonable strategy. In addition to HBV and HCV, attention should be paid to other relevant HCC risk factors, including nonalcoholic fatty liver disease due to obesity and diabetes, heavy alcohol consumption, and prolonged aflatoxin exposure. Interestingly, coffee and vitamin K2 have been proven to provide protective effects against HCC. Regarding tertiary prevention of HCC recurrence after surgical resection, addition of antiviral treatment has proven to be a rational strategy.

• 농촌의학ㆍ지역보건
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• 제16권1호
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• pp.61-69
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• 1991

Serodiagnosis of Clonorchis sinensis infections will probably be a first choice tool for screening of clonorchiasis in a future because of increasing difficulties in collection and examination of stools. The sensitive test such as ELISA can he used effectively. However there are some limitations in serological diagnosis for the detection of serum antibody. One of the major problems is the non-specificity of the antigens which produce cross reaction with other helminthic infection sera. To solve this problem. many investigators have tried to purify the antigens used. In this study, we determined the antigenic profile of the crude saline extract antigen of C. sinensis at early developmental stage based on SDS-PAGE and immunoblotting techniques for the purpose of understanding the nature of C. sinensis worm antigen The following results were obtained : 1) The SDS-PAGE showed many protein hands ranging from 10Kd to 91Kd relative molecular weight. Among them, 66, 46, 40, 33, 27, 24, 16, 14 and 10Kd bands were observed as a principle bands. The protein components of C. sinensis changed chronologically during their early developmental period. 44Kd band was stained unclearly in antigen of 2 weeks worm, but changed to concentrated state in antigen of 5 weeks worm. 35Kd band was found in antigen of 2 weeks worm, however this band was disappeared in antigen of 5 weeks worm. 22Kd band also lost its staining property gradually. 2) In spite of differences in antigenic profile, there was no differences in the data obtained by microplate ELISA using each antigen preparation. Absorbance value began to rise in between 2 to 3 weeks after infection. 3) By EITB. serum antibody recognized major protein bands with molecular weight of 91, 85, 63, 46, 40, 33, 24, 14 and 10Kd hand respectively. Among them 66, 33, 17 and 14Kd bands were observed as non-specific band because they reacted even in normal control sera. Generally, gradual increase of positive reactions were observed as the infection period of C. sinensis was prolonged. In other hand, the reaction of 10Kd hand did not occurred when 26th week sera was tested. 4) The positive reactions using antigens of 2 weeks worm, especially on 40 and 24Kd bands, were most strong and sharply demarcated compared to those of 3~5 weeks worm antigen.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권20호
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• pp.9005-9008
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• 2014

Background: Gastric cancer is the second leading course of cancer death worldwide and H. pylori infection is an important risk factor for gastric cancer development. This study was design to evaluate the clinical, pathological features, survival rate and prevalence of H. pylori infection in gastric cancer in Thailand. Materials and Methods: Clinical information, histological features, endoscopic findings and H. pylori status were collected from gastric cancer patients from Thammasat university hospital during June 1996-December 2011. H. pylori infection was assessed by histological evaluation, rapid urease test and serological test. Clinical information, endoscopic findings and histopathology of all patients were recorded and compared between patients with active or non-active H. pylori infection. Results: A total of 100 gastric cancer patients (55 men and 45 women with mean age of $55{\pm}16.8years$) were enrolled in this study. Common presenting symptoms were dyspepsia (74%), weight loss (66%), anemia (63%) and anorexia (38%). Mean duration of symptoms prior to diagnosis was 98 days. Overall prevalence of H. pylori infection was 83% and active H. pylori infection was 40%. 1-year and 5-year survival rates were 43% and 0%. There was no significant difference between active H. pylori infection in different locations (proximal vs non-proximal: 47.1% vs 48.5%; P-value = 0.9, OR=0.9; 95%CI=0.3-3.1) and histology of gastric cancer (diffuse type vs intestinal type: 47.4% vs 50%; P-value = 0.8, OR=0.9, 95%CI=0.3-2.7). However, linitis plastica was significantly more common in non-active than active H. pylori infection (27.9% vs 0%; P-value<0.0001, OR=13.3, 95%CI=3.2-64.5). Moreover, gastric cancer stage 4 was higher in non-active than active H. pylori infection (93% vs 50%, P-value<0.001). Conclusions: Prevalence of H. pylori infection in Thai gastric cancer patients was high but active infection was low. Most gastric cancer patients presented in advance stage and had a grave prognosis. Screening for gastric cancer in high risk individuals might be an appropriate tool for early detection and improve the treatment outcome for this particular disease in Thailand.