Vibrio vulnificus is an opportunistic pathogen that causes septicemia in humans. To identify the genes associated with its pathogenicity, in vivo expression technology (IVET) was used to select genes specifically expressed in a host, yet not significantly in vitro. Random lacZ-fusions in the genome of V vulnificus strain MO6-24/O were constructed using an IVET vector, pSG3, which is a suicide vector containing promoterless-aph and -lacZ as reporter genes. A total of ${\sim}18,000$ resulting library clones were then intraperitoneally injected into BALB/c mice using a colony forming unit (CFU) of $1.6{\times}10^6$. Two hours after infection, kanamycin was administered at $200{mu}g$ per gram of mouse weight. After two selection cycles, 11 genes were eventually isolated, which were expressed only in the host. Among these genes, VV20781 and VV21007 exhibiting a homology to a hemagglutinin gene and tolC, respectively, were selected based on having the highest frequency. When compared to wild-type cells, mutants with lesions in these genes showed no difference in the rate of growth rate, yet a significant decrease in cytotoxicity and the capability to form a biofilm.
Enterobacter sakazakii may be related to outbreaks of meningitis, septicemia, and necrotizing enterocolitis, mainly in neonates. To reduce the risk of E. sakazakii in baby foods, thermal characteristics for Korean E. sakazakii isolates were determined at 52, 56, and $60^{\circ}C$ in saline solution, rehydrated powdered infant formula, and dried baby food. In saline solution, their D-values were 12-16, 3-5, and 0.9-1 min for each temperature. D-values increased to 16-20, 4-5, and 2-4 min in rehydrated infant formula and 14-17, 5-6, and 2-3 min in dried baby food. The overall calculated z-value was 6-8 for saline, 8-10 for powdered infant formula, and 9-11 for dried baby food. Thermal inactivation of E. sakazakii during rehydration of powdered infant formula was investigated by viable counts. Inactivation of cultured E. sakazakii in infant formula milk did not occur for 20 min at room temperature after rehydration with the water at $50^{\circ}C$ and their counts were reduced by about 1-2 log CFU/g at $60^{\circ}C$ and 4-6 log CFU/ml with the water at 65 and $70^{\circ}C$. However, the thermo stability of adapted E. sakazakii to the powdered infant formula increased more than two times. Considering that the levels of E. sakzakii observed in powdered infant formula have generally been 1 CFU/100 g of dry formula or less, contamination with E. sakazakii can be reduced or eliminated by rehydrating water with at least $10^{\circ}C$ higher temperature than the manufacturer-recommended $50^{\circ}C$.
Polymerase chain reaction (PCR) is the most rapid and widely used method to detect viral pathogens. However, this method does not provide histopathologic nature of the virus. In situ hybridization (ISH) with oligonucleotide probes is attractive because it is a rapid method for detection and identification of viral pathogens at sites of tissue infection. In order to understand the histopathologic characterictics of Red sea bream iridovirus (RSIV), viral-hemorrhagic septicemia (VHS) virus and viral nervous necrosis (VNN) virus to cultured olive flounder, we her applied ISH method to various kinds of olive flounder tissues with PCR-positive for these three viruses. We found that these viruses showed different tissue tropism and were detected from different cell types. Our results suggest that ISH is useful not only in rapid detection of viral pathogens but also in understanding the histopathologic characters of specific viral pathogens.
Han, Mi Na;Byeon, Hyeon Seop;Han, Seong Tae;Jang, Rae Hoon;Kim, Chang Seop;Choi, Seok Hwa
Korean Journal of Veterinary Service
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v.41
no.4
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pp.257-262
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2018
Avian pathogenic E. coli (APEC) causes severe economic losses in the poultry farms, due to systemic infections leading to lethal colisepticemia. It causes a variety of diseases from air sac infection to systemic spread leading to septicemia. Secondary infection contains opportunistic infections due to immunosuppression disease. Collibacillosis causes the great problems in the poultry industry in Korea. Thus, it is necessary to identify and classify the characteristics of E. coli isolate of chicken origin to confirm the diversity of symptoms and whether they are transmitted among the farms. Fragment analysis is identify the difference in the number of Variable-Number Tandem-Repeats (VNTRs) for genotyping. VNTRs have repeating structure (Microsatellite, Short tandem repeats; STR, Simple sequence repeats; SSR) in the chromosome. This region can be used as a genetic marker because of its high mutation rate. And various lengths of the amplified DNA fragment cause the difference in the number of repetition of the DNA specific site. The number of repetition sequences indicates the separated size of fragments, so the each fragments can be distinguished by specific samples. The results of the sample show that there is no difference in six microsatellite loci (yjiD, aidB, molR_1, ftsZ, b1668, yibA). There are differences among the farms in relation of the number of repetitions of other six microsatellite loci (ycgW, yaiN, yiaB, mhpR, b0829, caiF). Four (ycgW, yiaB, b0829, caiF) of these six microsatellite loci show statistically significant differences (P<0.05). It means that the analysis using four microsatellite loci including ycgW, yiaB, b0829, and caiF can confirm among the farms. Five E. coli samples in one farm have same SSR repetition at all markers. But, there are significant differences from other farms at Four (ycgW, yiaB, b0829, caiF) microsatellite loci. These results emphasize again that the four microsatellite loci makes a difference in the amplified DNA fragments, enabling it to be used for E. coli genotyping.
A monitoring was performed to survey the mortalities that had occurred in the aquaculture farms of olive flounder (Paralichthys olivaceus) in South Korea from 2015 to 2017. The indirect inquiry for entire farms and the sample survey for selected farms were carried out. The aquatic organism disease inspectors, who have a national license for the diagnosis and prevention of aquatic organism diseases and a have close relationship with the farms, investigated the rates and causes of mortalities according to the standard manual. The mortality rate by sample survey of farms in 2015, 2016, and 2017 were 24.78% (Chunnam: 17.86%, Jeju: 28.69), 30.19% (Chunnam: 24.45%, Jeju: 32.65), and 21.59% (Chunnam: 10.57%, Jeju: 26.00%), respectively. The major cause of mortality was scuticociliatosis, and the mortality caused by viral hemorrhagic septicemia and emaciation disease (Jeju) were also high. Our results can contribute to effective establishment prevention of epidemics system and acquired status as a disease-cleansing country.
Korni, Fatma M. M.;Moawad, Usama K.;Mohammed, Asmaa N.;Edrees, Asmaa
Journal of fish pathology
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v.35
no.1
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pp.77-92
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2022
Aquaculture development is based on the ideas of increasing production while reducing economic losses. Bacterial diseases are the leading source of fish cases. Citrobacter freundii has been linked to septicemia and mortality all over the world. In the current study, the cause of mortality in O. niloticus was C. freundii MW279218. External hemorrhages were seen on the affected fish, as well as paleness in the liver and kidney congestion. C. freundii MW279218 had a median lethal dosage of 1.5×105 CFU/mL. Zinc oxide and zinc oxide nanoparticles (ZnO-NPs) were tested for their biocidal effectiveness against C. freundii MW279218. The lethal effect of ZnO-NPs for C. freundii MW279218 was 100% when compared to zinc oxide compound, and the inhibition zone width was 2.31.1mm at the highest tested concentrations (70 mg/L) compared to the lowest (35 and 45 mg/L, respectively). Fish were fed three different diets for 28 days: diet 1 (no additives), diet 2 (100 mg of ZnO-NPs/kg of feed), and diet 3 (200 mg of ZnO-NPs/kg of feed). Organs were also collected for histopathology 96 hours after injection (P<0.05). In the groups given 200 mg of ZnO-NPs, there was 10% mortality and 80% RPS. The group fed 100 mg of ZnO-NPs/kg, on the other hand, had 20% mortality and 60% RPS, compared to 50% mortality in the control positive group. Histopathological examinations demonstrated significant alterations in the control positive group and mild lesions in the hepatopancreas of the groups administered 100 mg ZnO-NPs/kg of feed. The groups fed 200 mg of ZnO-NPs/kg diet, on the other hand, showed no histological alterations. ZnO-NPs were found to be effective in the up regulation of both IL-10 and complement 5 immune-related genes.
Pathogenic Escherichia coli is the cause of a wide range of diseases in pigs, including diarrhea, edema disease, and septicemia. Diarrhea caused E. coli may result in significant economic losses, making pathogenic E. coli an important pathogen for the swine industry. This study investigated the prevalence of virulence factor genes, antimicrobial resistance phenotypes, and resistance genes in E. coli isolated from feces of piglets in Korea between 2017 and 2020. As a result, 119 pathogenic E. coli isolates were obtained from 601 fecal samples. The F4 adhesin gene and the STb enterotoxin gene were commonly present in E. coli isolated from diarrhea samples. The dominant virulotypes of isolates from diarrhea samples were STb, Stx2e, and F4:LT:STb. More than 80% of the screened isolates were resistant to ampicillin, sulfisoxazole, chloramphenicol, or tetracycline. To confirm the resistance mechanisms for β-lactam or quinolone, we investigated the genotypic factors of resistance. Each of the ceftiofur-resistant E. coli produced an extended-spectrum β-lactamase encoded by blaCTX-M-14, blaCTX-M-27, and blaCTX-M-55. And all ciprofloxacin-resistant E. coli harbored mutations in quinoloneresistance-determining-regions. In addition, some of the ciprofloxacin-resistant E. coli contained the plasmid-mediated-quinolone-resistance genes such as qepA, qnrB1, or qnrD. This study has confirmed that the F4 fimbria and the STb enterotoxin are the most predominant in pathogenic E. coli isolated from piglets with diarrhea in Korea and there is a great need for responsible and prudent use of antimicrobials to treat colibacillosis.
Salmonellosis caused by a number of serotypes of Salmonella is an infectious, acute or chronic, zoonotic disease and characterized by enteritis and diarrhea, septicemia in animal. In these studies we investigated the prevalent serotypes of Salmonella causing animal salmonellosis in Korea and the 71 strains of Salmonella spp. were isolated from materials such as mesenteric lymph nodes, fecal samples from slaughtered animal. With the identification test results, the most prevalent serotypes were, in order, S stanley 31 strains (43.7%), S typhimurium 19 strains (26.8%) and S montevideo 11 strains (15.5%), respectively. And we could establish the method for detection of antibodies to broad variety of Salmonella serotypes. Lipopolysaccharide(LPS) antigen extracted from Salmonella was more sensitive and specific than outer membrane protein antigen from that for detection of Salmonella antibody by using an indirect ELISA. The optimal concentration of antigen was 100ng/ml of LPS, the dilutions of conjugate and serum were 1 : 1,000~2,000 and 1 : 200~400, respectively. The mix LPS-ELISA which was used by mixing LPS from S typhimurium (group B), S choleraesuis (group C) and S enteritidis (group D) were more rapid and effective than that used LPS from individual strain for detection of Salmonella serogroup O4, O7 and O9 antibody at the same time. We could obtain the high values of optical density ($0.73{\pm}0.32$) by mix LPS-ELISA on the farm which had occurred salmonellosis, but very low values of $0.17{\pm}0.06$ on the negative farm of salmonellosis. So, the mix LPS-ELISA may be used to monitor the serological surveillance for the presence of infection with a number of serotypes of Salmonella and would be useful for prevention and control of salmonellosis in animal.
The use of intravenous solutions for fluid replacement has become an integral part of patient care, This widespread use of intravenous solutions has increased the risk of contamination that can lead to septicemia and phlebitis. The literature regarding contamination of in use intravenous solutions recommends a standard 24-hour time limit on the use of these fluids. But the desings of these studies did not incorporate a time variable related to contamination. In other studies, however, time was a manipulated variable: but data regarding the onset of contamination were conflicting. Because published reports conflict with regard to a time standard related to the use of intravenous therapy, additional empirical data are needed upon which to base the standards of care regulating use of intravenous therapy. This study investigated rate of contamination in simulated in-use intravenous solutions to obtain data from which to recomend a standard time period for the administration of intravenous solutions. In this study samples were drawn from 60 bottles of 5% D/W solution at predetermined time intervals over 48 hours and samples were inoculated to Thio-glychollate Broth. After 10 days' culturing in that Broth, samples were cultured on blood agar plates for 18∼48 hours to determine the rate of contamination. was found at all time Period, regardless of the presence or absence of nurse's gloving in the preparation of fluids, the location in which the experimentations were performed, the contamination level of surrounding air, or the length of time during which solutions were opened. Data from this study support the use of a 48-hour time period on which to base the standard involved in ready-to-use simple intravenous solutions without additives. In emergency departments and critical care areas where intravenous solutions are prepared in advance, the suggested time standard supported by the data generated from this study is 48 hours, not 24 hour. Data from this study support a 24-hour time standard for changing in-use intravenous solutions when the contamination results from the manipulation of intravenous infusion system by hospital personnel, or from some other exogenous sources during administration. Because contamination that does occur within 48 hours in intravenous solutions must be introduced from some exogenous sources, further empirical studies based on the identification of sources of contamination and factors that affect the rate of contamination, are needed to investigate the currently employed standard of intravenous therapy and to provide the patient with more efficient and safer intravenous thereapy.
From January 1985 to September 1990, 7 patients with carcinoma of the extrahepatic biliary system received external radiaiton therapy combined with hyperthermia. Of the 3 patients with extrahepatic bile duct cancer, two were primary cholangiocarcinoma and one was metastatic peripancreatic carcinoma. Of the 4 patients with carcinoma of the gallbladder, two were locor-egionally advanced and unresectable carcinoma and the remaining two were local-regional recurrence after cholecystectomy. They were all pathologicallly proven adenocarcinoma. The radiation dose received ranged from 3000 cGy/2weeks to 5040 cGy/7 weeks. The hyperthermia was done once or twice a week and 4 to 12 sessions in total. The tumor response was confirmed by T-tube cholangiography, percutaneous transhepatic cholangiography and CT scan. 6 out of 7 ($86\%$) showed partial regression of the tumor. The median survival time was 7 months (range $4\~11$ months).6 out of 7 patients were dead: one died of septicemia, 4 of primary disease, one of distant metastases. Only one out of 7 patients is still alive but new metastatic lesion was found. There was not any treatment related deaths. There was also no evidence of treatment related problems with liver, stomach and duodenum, although the observation period was short.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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