Kim, Sun-Lim;Chi, Hee-Youn;Kim, Jung-Tae;Hur, On-Sook;Kim, Deog-Su;Suh, Sae-Jung;Kim, Hyun-Bok;Cheong, Ill-Min
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.56
no.4
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pp.349-360
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2011
The objectives of present study were to characterize the peptides which were isolated from Korean fermented soybean paste, chungkukjang, and to determine their antioxidant activities. Four fractions were collected from the methanol extract of chungkukjang by using a recycling preparative HPLC. Among fractions, Fr-2 was identified to be highly potent free radical scavenging activity in the assay of 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) and nitroblue tetrazolium(NBT)-reduction inhibition. Base on antioxidant effects, fraction Fr-2 was employed for the refraction with a prep-column and separated into five fractions of which two fractions were identified to have higher antioxidant activity. To confirm the amino acid constituents of antioxidant fractions Fr-2-2 and Fr-2-3 were analyzed, and eight kinds of amino acids such as aspartic acid, threonine, serine, glutamic acid, glycine, lysine, histidine, and arginine were identified as the constituent amino acids. Antioxidant activities of the separated peptides were further assessed cell viability with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl terazolium bromide (MTT), and fluorescence-activated cell sorting (FACS) analysis of H4IIE cells treated with hydrogen peroxide (H2O2). Chungkukjang peptides have shown their ability to protect H4IIE rat hepatoma cells against H2O2- induced oxidative stress by concentration and time-dependent manner. Therefore, These results indicated that fermented soybean paste chungkukjang will be promoted the antioxidant and radical scavenging activities, and beneficial for health. The antioxidant peptide fractions Fr-2-2 and Fr-2-3 were denominated as P-NICS-1 and P-NICS-2, respectively. However, further studies were required to clarify their amino acid sequences and molecular properties, and physiological significances.
The multiple 7S globulins composed of two fractions (A and B) in the electrophoresis with Davis' method were isolated at different stages of the soybean seed development. Electrophoresis of their subunits liberated in PAWU solvent [phenol-acetic acid-water (2 : 1 : 1) solution plus 5M urea] yielded 4 major bands. Observation of both the electrophoretic bands of the multiple 7S fractions(7S-A and 7S-B) and those of their subunits was suggestive of a similarity of the subunit pattern between two 7S fractions. The two fractions in multiple 7S globulins were isolated with DEAE-Sephadex A-50 column$(2.0{\sim}100cm)$ chromatography. They were separated into 2 fractions in a linear gradient concentration of 0.28 to 0.40M NaCl with phosphate buffer (pH 7.8) containing 10mM ${\beta}-mercaptoethanol$(ME). The isolated protein was dissociated into subunits with two different solvent systems; in PAWU solvent and in Tris-HCl buffer(pH 8.0) containing 1% sodium dodecyl sulfate (SDS) and 40mM ME. The dissociated subunits were subjected to electrophoresis in PAWU-treated 7.5% acrylamide gel and in 1% SDS-treated 5.6% acrylamide gel. In PAWU gel electrophoresis, total 7S globulin was separated into 5 major bands, two of which were occupied in common by two 7S fractions(7S-A and 7S-B). In SDS gel electrophoresis, total 7S globulin was separated into 7 major bands, three of which were overlapped with the subunit of the two 7S fractions. The above results alluded us to the presence of a common and/or similar subunit between the multiple 7S globulins.
The purpose of this research was to isolate an active component on immunoytes from 70% MeOH extract of Codonopsis lanceolatae Radix(CLE). CLE was fractionated successively with hexane, methylene chloride, n-butyl alcohol and water, and then the water fraction was separated with molecularporous membrane tubing(m.w. 3,500). Each fraction(50mg/kg) was administered p.o. once a day for 7 days in BALB/c mice respectively. None of these fractions affected the apoptosis and mitochondrial transmembrane potential in thymocyte. Hexane and methylene chloride fractions decreased CD4$^{[-10]}$ CD8$^{+}$ single-positive cells, and the water fraction enhanced CD4$^{+}$ CD8$^{[-10]}$ single-positive cells in thymocyte. The proliferation of thymocytes was decreased by the fraction hexane, but was enhanced by the water fraction. Hexane, methylene chloride and butyl alcohol fractions suppressed the production of nitric oxide, which was not affected by the water fraction. Hexane and butyl alcohol fraction suppressed the phagocytic activity, but water fraction enhanced it. The components(m.w. 3,500 above) separated from the water fraction enhanced the proliferation of thymocyte, the population of CD4$^{+}$ CDB$^{[-10]}$ single-positive cells, and phagocytic activity in macrophage. These results suggest that the stimulative components of proliferation, TH population and phagorytc activity is in the water fraction, and the molecular weight is 3,500 above. (Korean J Nutrition 31(6) : 1076~1081, 1998) 1998)
This experiment was conducted to separate X-and Y-bearing spermatozoa of boar semen. The ratio of X-and Y-bearing spermatozoa to total spermatozoa included in ejaculated semen obtained from 4 boars raising at the College of Agriculture, Seoul National University and treated by the sedimentory or electrophoretic technique was estimated. For the electrophoresis, the semen specimen was placed into the co, pp.r loop electrodes in 30cc of glass tube at room temperature for 30 minutes and in order to sedimentary separation, the semen was sedimented in 5$^{\circ}C$ water for 50 minutes. The sperm fluorescent stainning technique was performed by the method of Bhattacharya etal (1976). The results obtained were as follows; 1. Average rate of B-body bearing spermatozoa in normal boar semen was 45.15${\pm}$4.20%, and no significant difference was observed between 1st (44.88${\pm}$6.41%) and 2nd (42.75${\pm}$4.17%) fraction of fractionally collected semen. 2. Spermatozoa were separated into several different fractions by sedimentation. B-body a, pp.arances from the top and bottom fraction were 53.70% and 33.43%, respectively. There were highly significant difference between the top and bottom fractions. 3. The swine spermatozoa were separated into X-and Y-bearing spermatozos by electrophoresis without interferring the sperm motility. The rates of B-body bearing spermatozoa attracted on the anode and cathode were 60.4% and 21.8%, respectively. Highly significant difference betwee two fractions was also observed.
Component having antioxidant activity on lard during heating was separated from hexane extract of spinach, and its characteristic chemical structure was speculated through nuclear magnetic resonance spectroscopy, liquid chromatography-mass spectrometry, and Fourier transform infrared spectrophotometry. Lard was heated with hexane-, ethyl ether-, ethyl acetate-, or ethanol extract of spinach at $180^{\circ}C$ for 20 hr. Hexane extract of spinach, having highest antioxidant activity on lard during heating, was fractionated by silicic acid column chromatography (SACC), and SACC fractions having higher antioxidant activity on lard during heating were further separated by thin layer chromatography (TLC). Isolated compound from SACC fractions of hexane extract of spinach by TLC had sugar moieties and benzene ring along with hydroxy, carbonyl, and alkyl groups in the structure.
Antimicrobial activities of the organosoluble extracts, seperated fractions and isolated lignans from the leaves tissue of Magnolia kobus DC. var. borealis Sarg. were investigated. The results are summarized as follows : 1. The inhibitory components against the spore growing test were concentrated on light petroleum ether and diethyl ether soluble fractions. The light petroleum ether solubles of the leaves tissue had terpenes compound, so, that they caused growing inhibition. These appearance showed high values of Rf on TLC bioautography and GC analyses with monoterpenes. 2. In the lignans, syringaresinol(X III), medioresinol(VI), phillygenin(VIII), kobusinol A(X) showed relatively high inhibitory effects in the spore growing test, and these are all showed structural characteristic of the phenolic hydroxyl group of guaiacyl and syringyl skelecton. 3. The light petroleum ether soluble fraction showed the strongest inhibitory effect against the antimicrobial activity in the seperated fractions. 4. The inhibitory effects of the lignans against the bacteria showed not so pronounced independantly, but the extracts and separated fractions contained with these lignans showed something synergism.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.4
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pp.822-829
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1999
Antimicrobial activity of dandelion(Taraxacum platycarpum D.) was investigated. Methanol extract of dried dandelion was fractionated to hexane, chloroform, ethylacetate, butanol and aqueous fraction. Ethylacetate fraction among these fractions showed the highest inhibitory effect on the microorganisms such as B. subtilis, L. monocytogenes, S. aureus, E. coli and V. parahaemolyticus at $500\mu\textrm{g}/disc$. Ethylacetate fraction was further fractionated into 13 fractions by silica gel column and thin layer chromatography(TLC). The results showed that ethylacetate fractions No. 4, 5 and 6 had high antimicrobial activity. These were mixed again, re separated and five fractions were obtained. Among them, No. 2 fraction had the highest inhibitory effect on the microorganisms, which was then separated into six fractions. In the 3rd fractionation, No. 3 fraction was identified as benzoic acid by HPLC, $^{1}H-NMR$ and GC MS.
Antimicrobial activity of Plantain(Plantago asiatica L.) was investigated. Methanol extract of dried Plantain was fractionated to hexane, chloroform, ethylacetate, butanol and aqueous fraction. Ethylacetate fraction among these fractions showed the highest inhibitory effect on the microorganisms such as B. subtilis, E. coli, and V. parahaemolyticus at 500 $\mu\textrm{g}$/disc. Ethylacetate fraction was further fractionated into 8 fractions by silica gel column and thin layer chromatography(TLC). The results showed that ethylacetate fractions No. 2 and 3 had the highest anti-microbial activity. They were mixed again, re-separated, and seven fractions were obtained. Among them, No.4 and 6 fraction had the highest inhibitory effect on the microorganisms, which were then separated into four fractions. In the 3rd fractionation, No.4 fraction was identified as hexadecanoic acid by HPLC, $^1$H-NMR and GC-MS.
To develop mil fat fractions with desirable physico-chemical properties, anhydrous milk fat (AMF) was fractionated by one- and two-stage extractions using supercritical $CO_2$(SC-$CO_2$). Tow-stage extraction of AMF was performed by first producing tow fractions, an extract and a residue at 4$0^{\circ}C$/241bar, which were subsequently used as the feed for an extraction at 6$0^{\circ}C$/241bar and 4$0^{\circ}C$/345bar, and separated into five and four fractions, respectively, based one extraction time. These fractions were quantified and analyzed for fatty acids and physico-chemical properties. SHort-chain (C4~C8) fatty acids in extract fractions from an extract were 200~150% compared with those of the original AF. Long-chain (C14~C18) fatty acids in extract fractions from a residue were 118~141%. The ratio of unsaturated fatty acids in the residue fraction was 131%. Melting point ranged from 22 to 43$^{\circ}C$, iodine value 21.8 to 36.9, and saponification value 255 to 221 in the extract and residue fractions. SC-$CO_2$ fractionation of AMF by two-stage extraction offers the possibility of developing ractions with discrete fatty acid compositions and physico-chemical properties such as melting point, iodine value and saponification value.
This study investigated the chemical composition and ruminal degradability of corn stover in three maize-planting regions in Qiqihaer, Heilongjiang Province, China. The whole stover was separated into seven morphological fractions, i.e., leaf blade, leaf sheath, stem rind, stem pith, stem node, ear husk, and corn tassel. The assessment of nutritive value of corn stover and its fractions was performed based on laboratory assays of the morphological proportions, chemical composition, and in situ degradability of dry matter (DM), neutral detergent fiber (NDF), and acid detergent fiber (ADF). The chemical composition of corn stover was significantly different from plant top to bottom (p<0.05). Among the whole corn stover and seven morphological fractions, leaf blade had the highest crude protein (CP) content and the lowest NDF and ADF contents (p<0.05), whereas stem rind had the lowest CP content and the highest ADF and acid detergent lignin (ADL) contents (p<0.05). Ear husk had significantly higher NDF content and relatively lower ADL content than other corn stover fractions. Overall, the effective degradability of DM, NDF, and ADF in rumen was the highest in leaf blade and stem pith, followed by ear husk. The results indicate that leaf blade, ear husk, and stem pith potentially have higher nutritive values than the other fractions of corn stover. This study provides reference data for high-efficiency use of corn stover in feeding ruminants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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