• 한국수산과학회지
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• 제47권1호
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• pp.45-51
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• 2014

Scuticociliates are regarded as serious pathogens in marine aquaculture worldwide. In Korea, they cause mass-mortalities in fish such as the commercially important olive flounder Paralichthys olivaceus. In particular, mixed infections of scuticociliates with pathogenic bacteria have been commonly reported. During efforts to identify natural marine-algae derived products that possess anti-bacterial and anti-scuticociliate properties, we found that an 80% methanolic extract of the red alga Polysiphonia morrowii Harvey exhibits both anti-scuticociliate activity against Miamiensis avidus, which is a major causative agent of scuticociliatosis, and anti-bacterial activities against fish pathogenic bacteria. Activity-guided fractionation and isolation of the 80% methanolic extract of P. morrowii yielded three bromophenols, which were identified as 3-bromo-4,5-dihydroxybenzyl methyl ether (1), 3-bromo-4,5-dihydroxybenzaldehyde (2) and urceolatol (3) based on spectroscopic analyses. 3-bromo-4,5-dihydroxybenzyl methyl ether (1) showed the highest anti-bacterial and anti-scuticociliate activities, with a minimal inhibitory concentration (MIC) of $62.5{\mu}g/mL$ (against Vibrio anguillarum) and minimal lethal concentration (MLC) of 62.5 ppm (in seawater). Investigations of the anti-bacterial and anti-scuticociliate activities of seventeen bromophenol derivatives, including the three isolated natural bromophenols, showed that the existence of an electron donating group or atom with a non-covalent electron pair at $C_4$ of the 2-bromophenol structure may be important in anti-scuticociliate activity. These findings suggest that the extract and bromophenol derivatives of P. morrowii may provide useful alternatives in aquaculture anti-scuticociliate therapies.

• 한국어병학회지
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• 제15권2호
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• pp.77-82
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• 2002

Effects of stress-induced suppression of humoral immunity on scuticociliate killing activity of olive flounder plasma were investigated. Changes in glucose level. alternative complement activity and Iysozyme activity of plasma by handling stress were analysed in relation to in vitri parasiticidal activity of plasma. The plasma glucose level was about two times higher in fish after a handling stress than in control fish. Plasma lysozyme activity and natural haemolytic activity were decreased in suessed fish.The scuticociliate killing activity of plasma was significantly lower in stressed fish than in non-stressed control fish. The present results indicated that stress-induced immunodepression could be a cause of scuticociliatosis occurrence in olive flounder.

• 한국어병학회지
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• 제34권1호
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• pp.47-53
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• 2021

Scuticociliates are one of the serious parasitic threats faced by the marine aquaculturists worldwide. To date, Uronema nigricans, Philasterides dicentrarchi, Miamiensis avidus, Uronema marinum, and Pseudocohnilembus persalinus have been reported as the important culprit species causing scuticociliatosis in fish. The present paper reports the finding of an additional scuticociliate isolate from the gill of diseased olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea. Based on the morphological characteristics, a scuticociliate in this study was identified as Paranophrys marina. Phylogenetic analysis placed P. marina as a sister lineage to three species of Pseudocohnilembus and Mesanophrys carcini within the order Philasterida.

• 한국어병학회지
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• 제33권2호
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• pp.177-184
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• 2020

In an attempt to find a feed additive showing an anti-scuticociliate effect, extracts from Citrus unshiu Peel were tested against virulent scuticociliate infection. The most effective anti-scuticociliate killing activity in vitro was observed in the extract squeezed from homogenizing water-soaked dried tangerine peel (DTP). In addition, we have investigated the effect of DTP as a feed additive on growth rate and anti-parasitic activity of olivaceus flounder. DTP extract added diets (0.1, 0.5, 1, and 5%/feed weight) were fed to flounder for 7 days for checking a growth rate and 14 days for a challenging test. As a result, the feed conversion rate was significantly improved only in 1% DPT extract group compared to the control and 0.5% DTP extract fed group showed 100% of survival rate in the challenge test, all of which indicating that DTP extract would be a potential feed additive against scuticociliatosis.

• 한국양식학회지
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• 제20권2호
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• pp.106-113
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• 2007

양식넙치에서 분리된 스쿠티카섬모충 P. dicentrarchi에 대한 생물학적 특성을 규명하기 위해 배양, 생육환경, 화합물의 in vitro 구제실험 등을 실시하였다. P. dicentrarchi 배양실험 결과 세포, 세균, 넙치치어 배합사료, 뇌 조직과 로티퍼 조직 등의 유기물을 먹이로 활발히 증식하였다. 생육환경 조건은 염분농도 $5{\sim}45\;ppt,\;pH\;6{\sim}9$ 범위에서 증식이 이루어졌으며, 온도는 $10{\sim}30^{\circ}C$ 범위에서 생존 및 증식이 가능하나 $10{\sim}25^{\circ}C$ 범위에서 활발한 증식이 이루어졌다. P. dicentrarchi의 화합물 구제실험 결과 포르말린 300, 400 ppm에 30분, 200 ppm에 60분, 100 ppm에 90분, 50 ppm에서 120분 만에 구제효과를 보였다. 과산화수소 약욕에 따른 구제효과는 300 ppm에서 60분, 200 ppm에서 90분 만에 구제효과를 보였으며, 150 ppm 처리구와 100 ppm 처리구에서는 150분 만에 각각 운동성을 완전히 상실하여 구제효과를 보였다.

• 한국수산과학회지
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• 제54권5호
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• pp.652-659
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• 2021

Microorganism-derived compounds, such as peptidoglycan, lipoteichoic acid, and β-glucan were supplemented in the scuticociliate Miamiensis avidus (M. avidus) vaccine to verify the specify component contribution to the adjuvant effect. Vaccine was formulated with the inactivated M. avidus antigen (YS2, 4.44×10⁵ cells/fish) in combination with either peptidoglycan (10 ㎍ and 100 ㎍/fish), lipoteichoic acid (5 ㎍ and 50 ㎍/fish), or β-glucan (10 ㎍ and 100 ㎍/fish). Olive flounder injected with peptidoglycan supplemented vaccine (10 ㎍ and 100 ㎍/fish) exhibited significant protection, and the relative percent survival (RPS) was 55% and 65% at 4 weeks post vaccination (wpv), respectively, at the corresponding doses. The vaccine groups with added lipoteichoic acid (5 ㎍ and 50 ㎍/fish) exhibited RPS of 40% and 5%, respectively. Additionally, the group with added β-glucan (100 ㎍/fish) exhibited RPS of 35%, but no effect was observed in the group with added 10 ㎍/fish β-glucan. At 8 wpv, olive flounder injected with peptidoglycan and lipoteichoic acid supplemented vaccines exhibited protection with RPS range of 11/11% and 5/21%, respectively, at the respective doses. M. avidus vaccine containing 10 ㎍ and 100 ㎍/fish of β-glucan exhibited the RPS of 32% and 37%, respectively. Conclusively, peptidoglycan contributed in high protection of the M. avidus vaccine, and thus, it can be used as an effective adjuvant in the M. avidus vaccine.

• 한국어병학회지
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• 제26권2호
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• pp.65-75
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• 2013

실험실에서 온도 별로 스쿠티카충을 배양한 데이터(Table 1)를 사용 스쿠티카충 개체군의 변화율(1.2)과 성장 방정식(1.3)을 in vitro 조건에서 구했다. 이 모델에서는 스쿠티카충의 증가모델 식은 로지스틱 증가함수로 두 가지 온도에서의 스쿠티카충의 증가율 매개변수를 구하였고, 기생충으로 인한 숙주인 넙치에 치명적일 수 있는 기생충의 임계밀도를 구하였다. 또 다른 데이터는 같은 온도에서 스쿠티카충 수를 다양하게 넙치의 복강에 주사하는 그룹과 동일한 스쿠티카충 수를 복강에 주사한 후 온도를 다르게 한 두 그룹의 스쿠티카충의 감염으로 폐사한 실험데이터(Table 2)에 근거하여 넙치의 감염에서 폐사가 되는 시스템 식(1.5)을 세웠다. 정리에서는 감염된 넙치와 폐사된 넙치의 미분방정식계는 감염넙치와 폐사 넙치와의 평형점을 찾고 그 평형점에 대한 안정성과 불안정성을 설명하였다. 각 온도에서의 매개변수를 사용하면 방정식 (1.6)은 시간에 대해 넙치의 누적 폐사량을 알 수 있는 방정식이다. 이 논문에서는 다양한 초기값 $P_0$값에 따른 넙치의 폐사를 중심으로 보았으므로 온도와 $P_0$가 동시에 넙치폐사에 어떠한 관계를 갖는 연구를 하기에는 제약을 갖고 있다. 이 연구의 제한점에서 언급했듯 실험을 여러 번 시행한 것이 아니기 때문에 단지 근사적인 값으로 이해를 해야 한다. 또한 넙치의 면역력을 알 수 있다면 기생충으로부터 저항력을 연구하는데 오차를 좀 더 줄인 근사치를 구할 수 있을 것을 기대할 수 있을 것이다.

• 한국어병학회지
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• 제30권2호
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• pp.107-114
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• 2017

본 연구에서는 넙치 (Paralichthys olivaceus)에게 감염 및 높은 폐사율을 일으켜 해산어류양식에서 심각한 문제가 되고 있는 스쿠티카충 (Miamiensis avidus) 구제를 위한 과산화수소의 유효성을 평가하였다. In vitro시험 결과, 과산화수소 50 mg/l로 1시간 동안 노출시키면 완벽하게 스쿠티카충 (M. avidus)을 효과적으로 살상하였다. In vivo시험은 $2{\times}10^3M.\; avidus/ml$로 이틀간 침지감염을 유도한 넙치와 제주지역에서 자연적으로 스쿠티카충에 감염된 넙치를 대상으로 과산화수소의 효능을 평가하였다. 제주지역 양식장 및 실험실적 시험군에서 과산화수소 100-200 mg/l로 1시간 동안 약욕시 대조군에 비해 현저히 누적폐사가 감소하였다 (p<0.05). 이때 넙치 조직에서 충밀도 측정 결과 약욕 후 3일 동안 대조군에 비해 감소가 나타났다. 따라서 수산용 과산화수소는 스쿠티카충의 초기 구제 효과가 유효한 것으로 확인하였다.

• 한국어병학회지
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• 제23권3호
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• pp.303-311
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• 2010

이전의 연구에서 참가리비(Patinopecten yessoensis) 인공종묘생산 중 수질관리를 위해 주기적으로 실시하는 환수(전량환수)가 scuticociliates 감염을 촉진 할수 있다는 가능성을 제기하였다. 본 연구에서는 수질과 scuticociliates 감염을 고려한 최적 환수 횟수를 결정하고자 하였으며, 유생성장, 생존, scuticociliates 발생을 1차 기준으로 하였으며, 부가하여 중간 육성장으로 이동하여 성장 및 기형 발생율을 2차기준으로 조사하였다. 5일 간격의 환수(3T)가 가장 좋은 결과를 보였다. 잦은 환수(5T)는 수질 개선에도 불구하고 성장 둔화가 확인되었으며, 이것은 scuticociliates의 감염과 연관이 있는 것으로 보였다. 9일간격의 환수(1T) 역시 성장둔화를 보였으며, 5T 실험구와 더불어 중간육성이후 성장 둔화(통계적 유의성 없음)와 비정상 발생을 유발하였다. 본 연구결과 최적 환수간격은 5-7일 사이로 나타났다.

• 한국어병학회지
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• 제21권1호
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• pp.1-11
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• 2008

We report the existence of new type of phosphatidylcholine-hydrolyzing phospholipase D (PLD), which has been characterized and partially purified in the scuticociliate, Uronema marinum. The enzyme from partial purification showed that it was existed in membrane fraction and was a neutral PLD, which catalyzed both transphosphatidylation and hydrolysis reaction. The activity of partially purified membrane-bound PLD was also found to be optimal at pH 7.0-7.5 for 2 hours at 37℃ and depended strictly on the presence of Ca2+ (2.5 mM) and Mg2+ (1.6 mM). Immunoblot analysis indicated that the enzyme was distinct from hPLD1 (human PLD1) and hPLD2 (human PLD2) because it was not recognized by a polyclonal antibody raised to the 12 terminal amino acid of these enzymes. We also found that the membrane-bound PLD is a PIP2-dependent PLD and that GTP-binding proteins are not implicated in the regulation of this enzyme: This enzyme activity is markedly stimulated by phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) but not by the small G-protein Arf and GTPrS. In addition, this enzyme was capable of hydrolyzing phosphatidylcholine (PC) but not phosphatidylethanolamine (PE), implying that PC was a preferred substrate.