인동초를 이용하여 표고균사체를 접종, 배양하여 얻어진 인동초균사체 추출액의 간암세포, 유방암세포, 자궁경부암세포 그리고 고형암의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 3가지 암세포의 형태변화 및 증식 억제에 미치는 영향에서 간암세포와 유방암세포에서 암세포에 대한 특이적 형태변화가 관찰되었고, 특히 간암세포에서 인동초균사체 추출물이 인동초추출물보다 효과적인 것으로 나타났다. 인동초균사체를 간암세포에 3mg/mL로 처리했을 때 $85.60{\pm}4.66%$의 암세포 증식억제율을 나타내어 인동초를 처리한 것보다 암세포 증식 억제율이 61.10% 높았다. 유방암세포에서는 인동초 및 인동초균사체를 처리한 것 모두 높은 암세포 증식억제율을 보였으며, 두 군간의 차이는 미미한 것으로 나타났다. 자궁경부암세포에서는 인동초 및 인동초균사체를 처리한 것 모두 암세포 증식억제율이 미미한 것으로 나타났다. 고형암 억제효과에서는 대조군에 비해 인동초균사체 추출물에서 고형암이 61% 억제되었으며, 인동초균사체가 인동초추출물보다 고형암 억제효과가 30% 더 높은 것으로 나타났다. 히스타민 유리 억제효과를 측정한 결과 compound 48/80처리군에 비해 인동초추출물은 9.07%, 인동초균사체 추출물은 43.05%의 히스타민 분비 억제효과가 있는 것으로 나타났다.
본 연구는 천일염, 구운 소금, 1회 구운 죽염과 9회 구운 죽염으로 만든 된장에서 항암효과를 평가하기 위하여 수행되었다. MTT 분석에서 천일염된장(S-D), 구운 소금된장(R-D), 1회 구운 죽염 된장(B1-D) 및 9회 구운죽염 된장(B9-D)을 0.05%와 0.1%를 첨가하였을 때 인체위암세포인 AGS의 증식에 대하여 상당한 저해효과(64-87%)를 나타내었다. Sarcoma-180 세포를 주사한 Balb/c 마우스 가운데 4종류의 된장을 투여한 쥐의 체중, 간장, 비장, 간장과 심장의 무게는 된장을 투여하지 않은 군보다 무거웠다. 또한 4가지 종류의 된장은 쥐의 종양 형성을 크게 저해하였으며, 특히 R-D와 B1-D는 1.0mg/kg 투여함으로써 97%의 종양세포의 성장억제를 나타내었다. 자연살해세포의 활성은 4종류의 된장을 투여한 쥐에서 상당히 높았으며 R-D를 투여한 쥐에서는 88.2%의 강한 활성을 나타내었다. 4종류의 된장을 투여한 쥐에서 glutathione S-transferase(GST)는 된장을 투여하지 않은 쥐보다 높았으며, 특히 GST 활성은 B1-D를 투여한 군에서 가장 높게 나타났다. 이러한 결과들은 여러 가지 종류의 소금이 된장의 항암활성에 미치는 영향에 차이가 있는 것으로 사료된다.
Eighty of Sarcoma 180 bearing mice, averaging 30 gm of body weight, were divided into eight groups of animals receiving Saline as the control, Corynebacterium parvum, Tubercin-3 and Cyclophosphamide alone and Cyclophosphamide combined with C. parvum, with Tubercin-3 and with both C. parvum and Tubercin-3 and Tubercin-3 combined with C. parvum respectively. Treatment was initiated 4.8 hours after tumor implantation and repeated three times once a day. Doses were suspended or dissolved in 0.2 ml of Saline: 1.4 mg of C. parvum: 0.5 micrograms of Tubercin-3; and 2.7 mg of Cyclophosphamide either in alone or in combination. All the agents given were administered subcutaneously but Cyclophosphamide was given intraperitoneally. The observation on the general conditions of animal took place twice a day following the treatment until the time of death after tumor implantation was determined. Average survival days in each group were as follows: In Control, Saline (11.2 days), C. parvum (14.8 days), Tubercin-3 (16.7 days), Cyclophosphamide(18.7 days). In combination therapy, Cyclophosphamide with C. parvum(22.8 days) with Tubercin-3 (26.9 days). Cyclophosphamide with both C. parvum an Tubercin-3, however, was somewhat longer than in Cyclophosphamide alone but shorter than in combined with either one of C. parvum or Tubercin-3. Finally, in combination with immunotherapeutic agents, Tubercin-3 and C. parvum each other it (8.2 days) was shorter even than Control. Life span of host is, in generally, inversely related to the number of malignant cells and conclusively, the therapeutic potentiation was reflected to be extended survival in combined treatment of a chemotherapeutic Cyclophosphamide with either one of immunotherapeutics, Tubercin-3 or C. parvum. Tubercin-3 and C. parvum in combination, however, appeared to be antagonistic each other.
We have recently reported that red ginseng acidic polysaccharide (RGAP), isolated from Korean red ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer), showed immunomodulatory antitumor activities, mainly mediated by nitric oxide (NO) production by macrophage. In this study, we examined the effect of RGAP on anticancer activity using lung carcinoma 3LL, sarcoma 180 and adenocarcinoma JC tumor cells transplanted into mice as well as antimetastatic activity using B16-F10 melanoma. When RGAP (300 mg/kg) were treated to mice implanted with one of the three kinds of tumor cells, the tumor weight significantly decreased compared with control mice. Tumor inhibition ratios of RGAP (300 mg/kg) in mice transplanted with lung carcinoma 3LL, sarcoma 180 and adenocarcinoma JC cells were 26.8%, 29.3% and 31.6%, respectively. Hundred mg/kg of RGAP did not cause a significant decrease in tumor weight compared with control group. When RGAP was administered i.p. with the dose of 100 and 300 mg/kg in B16-F10 melanoma-bearing mice, lung metastasis were reduced significantly in mice. Corrected phagocytic index was also remarkably increased by RGAP. These results suggest that stimulation of phagocytic activity of macrophages may be a mechanism for in vivo anticancer and antimetastasis activities of RGAP.
본 연구에서는 단 삼(Salvia miltiorrhiza)의 추출물이 인체 결장암세포인 HT-29, 간암세포인 HepG2 및 직장 암세포인 HRT-18의 증식에 미치는 영향을 in vitro에서 확인하였다. 암세포의 배양액에서 단삼의 수용성 추출물과 에탄올 추출물의 암세포 증식억제효과는 농도에 비례하여 에탄올 추출물에서 더 효과적이었다. 이를 토대로 단삼의 에탄올 추출물의 급성독성, 수명연장 및 고형암형 성억제를 살펴보기 위해 in vivo 실험을 하였다. 급성독성실험결과 대조군의 15일 째의 평균체중은 32.3 g 이었고 실험군은 31.6 g으로 정상적인 상태를 유지하였으며, 흰쥐의 육종암세포인 sarcoma-180를 접종한 mouse의 수명연장실험결과 대조군에 비해 61%의 수 명연장 효과가 있음을 관찰하였다. 고형암억제 실험 결과에서도 대조군에 비해 에찬올 추출 물 처리군이 35%의 고형암 형성억제능을 나타내었다. 따라서 단삼의 에탄올 추출물 중에는 in vitro와 in vivo 실험을 통해 항암활성을 갖는 성분이 존재하며, 이성분은 유효한 항암제 로 개발될 수 있으리라 사료된다.
신령버섯은 담자균문, 주름버섯목, 주름버섯과에 속하는 식용버섯으로 혈당, 혈압강하효과와 콜레스테롤 저하, 항종양, 암예방 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 신령버섯의 자실체로부터 메탄올, 중성염용액 및 열수 등을 이용하여 조다당류를 추출하고 성분을 분석한 결과 ${\beta}$-glucan은 21.54~32.31%, 단백질은 0.16~9.34%로 구성되어 있는 것이 밝혀졌고 신령버섯 추출 조다당류를 Sarcoma 180, HT-29, NIH3T3 및 RAW 264.7 등의 암세포 및 정상세포에 대한 독성을 조사한 결과 10~2000 ${\mu}g/ml$의 조다당류 농도에서 각각의 세포는 세포독성을 나타내지 않았다. Sarcoma 180으로 접종된 ICR 생쥐에 신령버섯의 자실체에서 추출한 각각의 조다당류를 투여한 실험군은 대조군에 비해 수명이 각각 18.8~50.6% 연장되었다. 비장세포의 증식능과 B 임파구의 활성화에 미치는 alkaline phosphatase의 활성을 조사한 결과 비장 세포 증식능은 대조군에 대해 1.1~1.2배의 증식능을 보였고 B 임파구의 활성은 대조군에 대해 1.2~1.6배 증가하였다. 또한 버섯추출 조다당류를 투여한 실험군이 대조군에 비하여 대식세포에서 1.3~4.3배의 많은 nitric oxide를 발생시켰다. 비장세포에 여러 농도의 조다당류를 처리한 후 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-2 및 IL-6 등의 사이토카인 분비량을 측정한 결과 생성된 사이토카인의 양은 대조군에 비해 2.2배 높게 나타났다. 중성염용액추출 조다당류를 50 mg/kg body weight의 농도로 투여한 실험군 생쥐의 총 복강 세포 수는 대조군에 비하여 4배 증가하였고, 열수추출 조다당류를 50 mg/kg body weight의 농도로 투여한 실험군 생쥐의 백혈구 수는 대조군에 비하여 각각 2.7배 증가하였다. 혈액생화학적 검사를 시행한 결과, 대조군과 유사한 경향을 나타냈다. 따라서 신령버섯의 자실체에서 추출한 조다당류는 생쥐의 면역을 증강시키는 것은 물론 Sarcoma 180에 대한 항암효과를 나타내는 것으로 밝혀졌다.
Objective : The purpose of this study was to investigate effects of Taklihwajung-Tang on the proliferation of cancer cells land immunocytes focusing around combined effects of anticarcinogen. Materials and Method : We used Taklihwajung-Tang extract(THT) with freeze-dried, 8wks-old male balb/c mice and cancer cell lines(L1210, S-180) for this study. The proliferation of cells was tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MIT assay). Results and Conclusion : The results of this study were obtained as follow ; 1. THT was significantly showed cytotoxicity on the L1210 cell lines and S-180 cell lines. 2. THT was significantly increased in the proliferation of thymocytes and splenocytes in vitro. 3. In combined effects of THT and vincristine(0.005mg/kg), THT was significantly inhibited proliferation of S-180 cell lines compared with positive control group. 4. In combined effects of THT and vincristine(0.005mg/kg), THT was significantly decreased in the weight of sarcoma compared with positive control group. 5. In combined effects of THT and vincristine, THT was significantly inhibited the hematological side reaction compared with positive control group. The present author thought that THT had action of anti-cancer and immune-activity, and in combined effects of vincristine, THT had recoverable effects on damage by anticarcinogen.
본 연구는 유기용매로 추출한 마늘의 항암성 성분을 in vitro에서 흰생쥐의 백혈병성 임퐈모 세포인 L$_{1210}$과 P${388} 및 인체 직장암 세포인 HRT-18과 인체 결장암 세포인 HCT-48과 HT-29 또한 invivo에서 흰쥐 복수 육종암세포인 sarcoma-180세포를 대상으로 선별 시험한 것이다. S-180을 제외한 각 암세포는 in vitro에서 마늘추출물을 농도별로 첨가한 배양액에서 배양시험하였다. 암세포의 증식억제효과는 마늘의 석유에텔추출물이 알코올추출물보다 높았다. 마늘의 지용성 성분은 in vitro에서 흰생쥐의 백혈병성 임퐈모 세포, 인체 직장암 및 결장암 세포에 대해 항암효과물을 나타내었다. 각 암세포의 증식률은 첨가한 마늘추출물의 농도가 증가할수록 감소한 영향을 보였다. Petroleum ether/ethyl ether/acetic acid(90:10:1, v/v/v)의 전개용매로 사용한 TCL에서 분리한 유효한 활성성분의 Rf치는 0.18이었고, 정제하지 않은 마늘추출물보다 L$_{1210}$세포에 대해 2.3배 높은 활성을 나타냈다. S-180 암세포로 유발한 흰생쥐에 마늘 추출물을 투여한 군이 투여하지 않은 군보다 생존 기간이 1.5내지 2배 가량 연장효과를 보였다. S-180 암세포를 함유하고 있는 흰 생쥐에 마늘추출물(3ug/head)을 복강내 주사하고 3시간 후에 관찰한 결과 S-180 암세포의 뚜렷한 형태변화를 관찰하였다.
삼색도장버섯으로부터 중성염용액, 열수, 및 메탄올 추출물을 분리하였다. 세포독성 실험 결과, 열수 추출물은 $0{\sim}2,000\;{\mu}g/ml$의 농도에서 암세포에 대한 세포독성이 없었으나, 중성염용액 추출물과 메탄올 추출물에서는 약간의 독성을 나타내었다. Sarcoma 180 복수암에 대한 항암 효과는 중성염용액 추출물을 투여한 실험군에서 77.4%의 높은 생명 연장 효과를 나타내었다. 삼색도장버섯의 중성염용액 추출물과 열수 추출물은 대조군에 비해 비장세포를 $1.7{\sim}2.4$배 증가시켰고, B 임파구의 alkaline phosphatase 활성을 $2.2{\sim}8.7$배 증가시킴으로써 비장세포의 증식능과 B 임파구의 면역 활성 효과를 증가시켰다. 대식세포주 RAW 264.7에 $50;{\mu}g/ml$의 농도로 중성염용액 추출물을 처리하였을 경우, 양성 대조군이 $79\;{\mu}M$의 nitric oxide(NO)를 발생시킨 것에 비해 다소 높은 $90\;{\mu}M$의 NO를 발생되었다. 또한 중성염용액 추출물을 50 mg/kg body weight의 농도로 마우스 복강에 투여하였을 시 대조군에 비하여 복강세포수가 10배 증가하였으며 혈액 내 백혈수 또한 2배 증가를 나타내었다. 따라서 삼색도장버섯의 중성염추출물은 항암 효과와 숙주의 면역을 활성화시키는 것으로 사료된다.
Objective : This Study was to investigate effects of Takliikgi-tang on the anti-cancer and proliferation of immunocytes, nitric oxide (NO) production of peritoneal macrophages. Methods : We used Takliikgi-tang extract (TLT) with freeze-dried, 8weeks-old male mice and cancer cell lines (L1210, Sarcoma-180) for this Study. The cytotoxicity and proliferation of cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay (MTT assay). Results : 1. TLT was significantly showed cytotoxicity on the L1210, 5-180 cell lines. 2. TLT was significantly increased proliferation of thymocytes in vitro. 3. TLT was significantly increased proliferation of thymocytes and splenocytes in normal mice. 4. TLT was significantly increased NO production from peritoneal macrophages in normal mice. 5. TLT was significantly decreased proliferation of L1210 cells in L1210 cells transplanted mice. 6. TLT was significantly increased proliferation of thymocytes and splenocytes by all-dosage in L1210 cells transplanted mice. 7. TLT was significantly increased NO production from peritoneal macrophages in L1210 cells transplanted mice. Conclusions : The present author thought that TLT had action of anti-cancer by becoming immunocytes activity (NO production, proliferation of thymocytes).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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