Leaf discs and apical meristems were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with cytokinin and auxin at different concentrations. Callus production was observed in all tested media after six days of incubation. Callus produced in the presence of high concentration of NAA (2.0mg/1) was fragile in texture and yellow in colour. Highest callus formation was observed from leaf discs in the medium supplemented with 1.0mg/1 NAA and 0.5 mg/l BAP in dark at $25{\pm}1{\circ}C$. Percentage of callus formation was 95% and mean callus fresh weight was 654.88 43.53 mg. Shoots were induced from the callus after 4 weeks in 1/2MS medium supplemented with BAP and kinetin both at 0.5mg/1. When elongated shoots were separated and transferred into multiplication medium (MS+0.5mg/1 BAP+0.5mg/1 kinetin) multiplication rate was 6.4 after 6 weeks. Higher concentrations of BAP caused callus production at the base. Direct shoot induction was observed from apical meristems in MS medium in the presence of 0.175 mg/1 IAA + 2.25mg/1 BAP and 0.175 mg/1 IAA + 3.0 mg/1 BAP in 16 hour day at $25{\pm}1{\circ}C$. Explants (apical meristems) elongated to form a single shoot forming a callus at the base. Adventitious buds were sprouted out from the base. Percentage explants which producing shoots was 28.57 and 65.5 respectively. Multiple shoot induction was also observed in the same media. Highest multiple shoot production was observed in the presence of 0.175 mg/l IAA and 3.0mg/l BAP, Mean number of shoots per explant was 5.36 and the mean shoot length was $16.66{\pm}4.15$mm. Shoots (20 30m length) were tested for root induction. Excised shoots were transferred into rooting media, which contains different concentrations of NAA and IAA. Best rooting performance was observed in 1/2MS medium supplemented with 0.1mg/1 NAA after 10 days of incubation in 16 hr photoperiod at $25{\pm}1{\circ}C$. Mean number of roots per shoot was 6 and the mean root length was 252mm. Rooted plantlets were transferred into sterile coir dust:sand (1:4) mixture and maintained in a humid chamber for two weeks, They were gradually exposed to the natural environment. After three weeks they were transferred to pots containing coir dust:sand (1:2) mixture for further development where the 90% survival was observed.
본 실험은 Dendrobium nobile계 신품종인 'Candy'와 'Fizz', 'Princess'를 대상으로 줄기 삽목번식법을 확립하고자 수행하였다. 매질실험에서 삽목 60일 후 측아발생률은 'Fizz'가 perlite+vermiculite 혼용구에서 83.3%로 가장 높았고, 발근률은 'Candy'와 'Fizz'에서는 발근이 되지 않았으나 'Prince'의 경우 삽목 60일 후 perlite+vermiculite 혼용구에서 10%의 발근률을 나타냈다. 오옥신 종류 및 농도별 실험에서 측아발생률은 'Candy'를 제외하고는 삽목 60일 이후부터 높은 증가율을 나타내었으나 'Fizz'는 IBA 200ppm 처리의 86.7%를 제외하고는 대조구와 처리간에 차이가 없었다. 착엽수는 대조구에 비해 'Candy'와 'Fizz'의 경우 IBA 200ppm에서 높은 발생률을 나타냈다. 발근률은 'Prince'에서는 IBA 200과 NAA 50ppm에서 대조구보다 2배의 높은 발근률을 나타냈다. BA와 kinetin의 농도별 실험에서 'Candy'는 삽목 60일 후 BA 50ppm에서 20%의 측아발생률을 나타냈다. 'Fizz' 품종은 전체적으로 측아발생률이 30일 이후부터 증가하여 60일 이후에는 대조구의 77%에 비해 BA 200ppm에서 100%이었다. 그러나 kinetin의 경우 농도에 관계없이 대조구에 비해 낮게 나타났다. 착엽수도 Fizz와 Prince에서 측아발생률과 유사한 경향으로서 BA 200ppm에서 효과가 뚜렷하였으나 모든 품종에서 발근에는 영향을 미치지 못했다.
Park, Dong-Jin;Kang, Young-Min;Jung, Ha-Na;Min, Ji-Yun;Kim, Yong-Duck;Karigar, Chandrakant S.;Choi, Myung-Suk
한국산림과학회지
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제95권2호
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pp.155-159
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2006
An efficient method for in vitro propagation of the medicinal plant Hovenia duleis, was established. Plantlets for micropropagation of H. dulcis were obtained from in vitro germinated seeds. The effectiveness of various levels of cytokinins (BAP, Kinetin and TDZ) on multiple shoot formation from stem nodes was tested. BAP (1.0 mg/L) treatment induced highest number of multiple shoots. The growth pattern of plantlet on various culture media was undertaken. The shoot elongation was optimal on 2MS basal medium without growth regulators. The in vitro rooting ability of H. dulcis shoots was examined with two-auxins IAA and IBA. The IAA (1.0 mg/L) treatments induced earliest rooting with maximum number of roots and root growth. Rooted shoots were transferred directly to small pots with artificial soil and such established plant exhibited a normal growth pattern similar to wild plantlet.
The effect of boron and aluminum on the development of adventitious roots was studied in sunflower cuttings. Three-day-old seedlings were de-rooted and grown in nutrient solutions with or without boron and supplemented with different concentrations (from 50 to 700 ${\mu}$M) of aluminum. The number and length of the adventitious roots and proline content in adventitious roots in response to insufficient boron and aluminum stress were determined periodically. The micronutrient boron caused the development of numerous roots in the lower parts of the hypocotyl. A dose-response of boron-induced rooting yielded an optimum concentration of 0.1 mM boron. In the absence of boron, in the majority of the adventitious roots, a significant inhibition was observed with or without aluminum, indicating that the most apparent symptom of boron deficiency is the cessation of root growth. Increasing concentrations of aluminum caused progressive inhibition of growth and rooting of the hypocotyls, and a parallel increase in proline levels of adventitious roots. Supplemental boron ameliorated the inhibitory effect of aluminum, suggesting that aluminum could inhibit root growth by inducing boron deficiency. Ascorbate added to medium in the absence of boron improved root growth and induced a significant decrease in proline levels. These findings suggest that adventitious root growth inhibition resulting from either boron deficiency or aluminum toxicity may be a result of impaired ascorbate metabolism.
심장질환 및 암치료에 약제로 사용되어지는 D. purpurea의 잎 절편으로부터 신초의 재분화와 증식을 시도하였다. MS 배지에 $2\;mg/l$ BA와 $0.1\;mg/l IAA를 조합하여 처리하였을 때 잎절편으로부터 부정아가 형성되었다. 유기된 부정아로부터 신초의 증식은 식물생장조절물질이 첨가된 $B_5$ 배지에서 배양 5주 후 약 21개의 신초가 분화되었으며, 신초의 길이 신장과 생육은 WPM 배지와 MS 배지에서 가장 양호한 것으로 나타났다. 한편 기내 증식된 신초로 부터의 발근은 $1\;mg/l$ IBA를 첨가된 MS 배지에서 신초당 21.5개가 형성 되었다.
Park, Woo-Jin;Kang, Young-Min;Min, Ji-Yun;Park, Dong-Jin;Kim, Yong-Duck;Karigar, C.S.;Choi, Myung-Suk
한국약용작물학회지
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제12권5호
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pp.384-390
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2004
An in vtro nucellar polyembryo propagation method was established with mature seed of the Citrus junos Sieb. 7-8 nucellar polyembryos per seed were induced on MS basal medium without plant growth regulators. The polyembryos developed to complete plantlets on teatment with IBA. These shoots grew further in MS medium without plant growth regulators. Rooting of shoots occurred on MS medium supplemented with IBA. These plantlets were successfully transplanted to small plastic pot containing soil mixture. Somatic embryos were induced from nucellar polyembryo and maturation occurred spontaneously from proliferating cultures on MS medium without growth regulators. Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) marker analysis of in vitro and in vivo grown junos orange showed identical polymorphism indicative of their genetic stability. The RAPD polymorphism produced revealed same banding pattern in each regenerant. Hence, propagaton of junos orange by nucellalr polyembryos was efficient and produced in genetically stable plants under in vitro conditions.
A protocol has been developed for rapid large scale clonal propagation of an aromatic endangered medicinal plant, Hemidesmus indicus R. Br. with the elimination of the problems such as premature leaf fall and callus formation during caulogenesis and rhizogenesis. Multiple shoots were induced from shoot tip and nodal explants on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1 mg/L Benzylaminopurine (BAP) and 0.5 mg/L Napthaleneaceticacid (NAA). Addition of 15 mg/L adenine sulphate to the above medium checked leaf abscission completely, reduced the time required for caulogenesis and restored morphogenetic potential after several subcultures. The in vitro grown propagules were rooted in 1/2 MS medium supplemented with 2 mg/L Indolebutyric acid (IBA) +1 mg/L NAA and sucrose 0.7% (w/v). Addition of charcoal at 100 mg/L to the rooting medium quickened root initiation with a complete check on callus formation. The effect of sucrose concentration on both caulogenesis and rhizogenesis was also studied. The resultant plantlets were acclimatized and grown in fields where ninety eight percent of the rooted shoots survived and grew normally. The estimation of the secondary metabolite content in the shoots of the regenerated plant and the mother plant indicated that the concentration of the three secondary metabolites lupeol, vanillin and rutin was similar.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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