Development of root galls of clubroot disease on Chinese cabbage seedlings was first observed 17days after inoculation of Plasmodiophora brassicae at $25^{\circ}C$ 4-11days earlier than at 5, 20, 3$0^{\circ}C$ and 35$^{\circ}C$. Subsequent enlargement of root galls was also fastest at $25^{\circ}C$ and 2$0^{\circ}C$ but delayed at 15$^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$ or above. Chinese cabbage seedlings with root gall formation showed reduction in number of leaves above ground fresh weight and amount of root hairs but increase in root weight, Root galls development was highest at soil moisture level of 80% of maximum soil moisture capacity than at 60% and 100%. Optimum soil pH for root gall development was pH 6 although root galls were formed at a range of pH 5 to 8. Period of light illumination also affected root gall development with the greatest gall development at 12hr/12hr in light/dark period and the least at 8hr/16hr. Site of root gall formation and gall shape did not differ greatly among treatments of temperature soil moisture pH and light experiments.
Effect of inoculum concentration inoculation method and plant age on development of clubroot disease of Chinese cabbage seedling were examined in growth chambers. Root galls were developed at the concentration of 105 resting spore or above per ml of incoulum and as the inoculum concentration became higher rate of development of root galls was faster. In the plants with root gall development fresh weight of above ground parts was reduced to 30-44% of that of healthy plants but root weight increased by 4-10 times. Growth of diseased plants was greatly reduced as compared to healthy plants. Planting in the diseased soil as a inoculation method was most effective for disease development showing uniform infections but time of initial root gall development was delayed by root soaking inoculation. Some plants inoculated by soil drenching method did not develop root galls. However root gall enlargement after its initial formation did not differ greatly among inoculation methods. Nine-day-old seedlings showed poor development of root gall but 16-days-old seedlings was found to be most adequate for inoculation for gall development.
This study was carried out to obtain the information for growth characteristics of crown gall tumor and hairy root transformed by Agrobacterium spp,. on the media with phytohormones, casein hydrolysate and activated charoal. Crown gall tumors and hairly roots were formed respectively on potato tuber discs infected by tumerfaciens A ch 5 and A.rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. PCR analysis of Rol C and Vir C gene fragments confirmed that crown gall root was prompted on the medium containing 2,4-D 2mg/l with casein hydrolysate lg/l. The survival ration of crown gall tumor callus derived from potato increased on medium containing the activated charcoal 0.5∼0.2mg/l because of the prevention, on the other hand, hairly roots were necrosis on the same medium. Callus derived from hairly root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2.4-d 2mg/L and casein hydrolysate lg/l.
This study was carried out to obtain the information for growth characteristics of crown gall tumor and hairy root transformed by Agrobacterium spp,. on the media with phytohormones, casein hydrolysate and activated charoal. Crown gall tumors and hairly roots were formed respectively on potato tuber discs infected by tumerfaciens A ch 5 and A.rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. PCR analysis of Rol C and Vir C gene fragments confirmed that crown gall root was prompted on the medium containing 2,4-D 2mg/l with casein hydrolysate lg/l. The survival ration of crown gall tumor callus derived from potato increased on medium containing the activated charcoal 0.5∼0.2mg/l because of the prevention, on the other hand, hairly roots were necrosis on the same medium. Callus derived from hairly root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2.4-d 2mg/L and casein hydrolysate lg/l.
Effects of temperature, soil moisture level, flooding, and soil microflora on decay of root galls in club root disease of Chinese cabbage were examined in the laboratory. Number of days required for complete decay of root galls was 3 days at $32^{\circ}C$ or higher, 12 days at $16{\sim}20^{\circ}C$ and 28 days at $8^{\circ}C$. As soil moisture content goes up, root gall decay became faster resulting 3 days for complete decay under saturated moisture condition at high temperature of $32^{\circ}C$, and 8 days under the same moisture level at $24^{\circ}C$. Soil moisture effect was relatively low at $24^{\circ}C$ compared to $32^{\circ}C$. Stimulation of decay by soil flooding was not observed at $32^{\circ}C$ but became apparent at $12^{\circ}C$. Influence of soil microflora on root gall decay was negligiable. Based on these results, temperature appears to be the most important factor affecting root gall decay in soil. Root gall decay is thought to be affected more easily by other environmental factors under low temperature conditions. Maturity of resting spores of Plasmodioprora brassicae in root galls tended to increase as time prolongs during root gall decay. Density of the resting spores was lower in fresh root galls where their maturity was also low as compared to completely decayed root galls. Number of resting spores in completely decayed root gall was $6.5{\times}10^{6}/g$ tissue and its maturity was over 95%.
Oriental melon, Cucumis melo L. cv. Geumssaragieuncheon, grafted on Shintozoa (Cucurbit maxima ${\times}$ Cu. moschata) was planted in a greenhouse infested with Meloidogyne arenaria and root galls were examined five months after planting. A gram of root gall was volumed at ca. 10 cm3 and contained in an average of 363 females (170 developing and 193 matured females), 2,120 secondstage juveniles (J2), and 13,074 eggs. In addition, there was 56 J2 per $cm^3$ soil around the infested plant. An oriental melon had an average of 134.6 g of root gall (70% of total root weight) per 0.72 $m^2$ area. In a conservative estimation, an oriental melon plant could accommodate ca. 1.2 ${\times}$$10^7$ eggs and J2 per 0.72 $m^2$. The eggs contained in root tissues could be an important inoculum source to the next crop and the fate of these eggs are well worth further investigation.
The present study was conducted to obtain some basic information on the shoot formation from crown gall callus and the characteristics of teratoma shoot derived from crown gall induced by inoculation of Agrobacterium tumefaciens C58. Crown gall callus could be continuously cultured on the phyohormone free basic medium. The growth of crown gall callus was inhibited when BA were added to the cultural media. Shoot formation from crown gall callus fail to be initiated except teratoma shoot which induced on the phytohormone free medium after several subculture on rare occasions. Teratoma shoot could not form root and grow as normal shoot. Addition of BA to cultural media was not effective for shoot elongation, reduction in multiple shoot formation, but IBA was somewhat effective for shoot elongation of teratoma shoot, never for root formation.
Effects of infection time of the clubroot pathogen, Plasmodiophora brassicae, on yield loss of Spring-sown Chinese cabbage plants were examined in field experiments. Yield loss of Chinese cabbage plants increased as the infection time becomes early. Plants infected at 20 days after transplanting or earlier were completely killed before harvest, and those infected at 30 days after transplanting were healthy in appearance but their head weights were reduced to 59% with poor commodity value. The plants infected 40 days after transplanting were not affected in yield. Development of root hairs in diseased plants was greatly reduced as the infection progressed, and root length was reduced to 1/2 to 1/3 of that of healthy plants. root galls were first developed 20 days after inoculation and rapidly enlarged to reach the peak in size 20 days from initial development, and decayed thereafter. Development and decay of root galls tended to be faster at later season as air temperature became high, regardless of the infection time. Diseased plants started to wilt approximately 10 days after root gall development. Root galls began to decay 10 days after initial plant wilting, and then were completely rotten within following 10 days. Based on the results, root gall development stages on spring-sown Chinese cabbage plants could be grouped into 20 days of root gall enlargement period, and 10 days of root gall decay period, followed by survival period in soil.
In 1997 surveys 82 out of 180 crucifer fields were infected with clubroot disease in a range of 1-100% of diseased plants and among crucifier crops Chinese cabbage was the most severe, In cropping systems Chinese cabbage-monocropping of Chinese cabbage-radish were found to be most common in major Chinese cabbage production areas. Welsh onion squash or paddy rice were also planted between cropping of Chinese cabbage. Paddy fields converted to upland were lowered in incidence of clubroot disease and fields with loam to silty loam soil were more severe in disease than those with sandy soil. Soil pH and organic contents were nor related to clubroot disease severity. Soil fauua such as total fungi bacteria actinomyces Pseudomonads and Bascillus were not correlated with severity of the disease. Root rall development on Chinese cabbage seedlings was initifially observed under a microscope 13 days after inoculation with Plasmodiophora brassicae but 18 days by naked eyes after inoculation. Root galls were formed mostly around collar roots and gradually spread to main root lateral roots and secondary root branches. Root galls started to enlarge greatly in size and weight from 23 days after inoculation. Chinese cabbage plants at mid-growth stage with root gall development were reduced to 1/2 of that of healthy plants in number of leaves 1/4-1/5 in above ground fresh weight 1/6 in root length but increased to 3 times in diameter of collar root. Diseased plants had little root hairs. Diseased Chinese cabbage plants at harvest were reduced by 9,1-11.8% in head weight compared to healthy plants a positive correlation was observed between root and head weight but those relationships were rot found in the diseased plants.
This study was conducted to obtain basic information about the transformation of ginseng tissue, identification of opine compound and protein, and saponin production from ginseng callus transformed with Ti-plasmic of AW$.$obacterium tumefaiens C58. Ginseng crown gall callus induced by pTiC58 could be continuously cultured on the Phytohormone-free medium. The transformation was reconfirmed by the detection and identification of opine compound, from the gall callus. The transformed ginseng callus contained higher amounts of protein than normal callus and the protein pattern of transformed callus was quite different from that of normal callus. The xylose which is not detected in the normal callus and ginseng root was identified in gall callus. The saponin contents of gall callus of ginseng were three times higher than that of normal callus, and ginsenoside composition of the transformed callus was similar to that of the cultivated ginseng root, but quite different from that of normal callus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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