식물호르몬(phytohormone)을 생성하며 불용성 인산 가용화능이 있는 세균을 근권에서 분리하여 각각의 생성능을 조사하고 토마토 씨앗에 적용하여 생장촉진 가능성을 조사함으로써 분리 균주의 생물학적 비료로서의 가능성을 제시하고자 하였다. 분리 균주인 Bacillus sp. PS2와 RFO41은 첨가된 두 종류의 500 mg/L 불용성 인산을 약 80% 이상 가용화 시켰으며, 펩톤이 풍부한 생장배지에서 여러 가지 식물호르몬을 생성하였다. 이를 토대로 토마토 씨앗의 생장촉진 실험을 수행한 결과, PS2와 RFO41이 적용된 실험군의 발아한 토마토모종의 뿌리와 줄기의 길이 생장은 대조군에 비하여 각각 26.8과 34.8% 및 45.5와 36.5%가 증가하였다. 이 결과는 분리 균주인 Bacillus sp. PS2와 RFO41의 인산 가용화능과 식물호르몬의 생성능이 토마토 씨앗의 발아와 생장에 직접적인 영향을 주는 요인으로 작용한 결과라고 판단할 수 있으며, 생물학적 비료로서의 가치를 뒷받침하는 것이라고 할 수 있다.
Botrytis cinerea에 의한 포도 잿빛곰팡이병은 특히 하우스 재배시 큰 피해를 주는 병원 진균이다. Pseudomonas속 세균들은 토양 미생물중 가장 잘 연구되어 있고, 토양 내에서 중요한 역할을 담당하고 있다. 근권토양에서 분리한 형광성 Pseudomonas속 세균 83균주 중 P84균주는 실내 항균력 실험결과 다양한 식물병원진균(Phytophthora capsici, Sclerotium spp., Botryosphaeria dothidea, Fusarium spp.)에 대해 항균효과를 나타내었다. 생리적 실험과 유전적 실험결과 P84균주는 P. putida로 동정되었다. 이 세균의 항균력은 항생물질(2,4-diacetylphloroglucinol)의 생산과 관련되어 있는 것으로 사료되며, 이 세균이 포도 잿빛곰팡이병의 생물적 방제에 이용될 수 있는 가능성이 시사되었다.
The selected five plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) strains, WR8-3 (Pseudomonas fluorescens), WR8-6 (P. putida), WR9-9 (P. fluorescens), WR9-11 (Pseudomonas sp.), and WR9-16 (P. putida) isolated in the rhizosphere of watermelon plants were tested on their growth promotion and control effect against gummy stem rot of watermelon. Strains, WR8-3 and WR9-16 significantly increased stem length of watermelon, and there was a little increase in leaf area, fresh weight and root length when strains, WR8-3, WR9-9 and WR9-16 were treated. Generally, seed treatment was better for plant growth promotion than the soil drench, but there was no significant difference. Seed treatment and soil drench of each bacterial strain also significantly reduced the mean lesion area (MLA) by gummy stem rot, but there was no significant difference between the two treatments. At initial inoculum densities of each strain ranging from 10$^6\;to\;10^{15}$ cfu/g seed, approximately the same level of disease resistance was induced. But resistance induction was not induced at the initial inoculum density of 10$^3$ cfu/g seed. Resistance was induced by treating the strains, WR9-9, WR9-11 and WR9-16, on all of four watermelon varieties tested, and there was no significant difference in the decrease of gummy stem rot among varieties. Populations of the strains treated initially at log 9-10 cfu/g seed, followed with a rapid decrease from planting day to 1 week after planting, but the population density was maintained above log 5.0 cfu/g soil until 4 weeks after planting. Generally no or very weak in vitro antagonism was observed at the strains treated excepting WR9-11. Rifampicin-resistant bacteria which had been inoculated were not detected in the stems or leaves, which suggesting that the bacterium and the pathogens remained spatially separated during the experiment. This is the first report of rsistance induction in watermelon to gummy stem rot by PGPR strains.
대표적인 식물병원성 곰팡이 인 Phytophthora infestans와 Fusarium oxysporum의 생장을 저해하는 근권세균들을 토양에서 분리하여 동정하였으며 이 균주들이 분비하는 항진균성 물질인 siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide와 chitinase의 생성능을 조사하였다. 분리균주 중 Bacilus sp. RFO41은 F. oxysporum의 생장을 가장 효율적으로 억제하였으며, siderophore 생성능과 $\beta-1$,3-glucanase의 활성이 가장 우수하였다. 또 다른 분리균주인 Bacilus sp. PS2는 P. infestans의 생장을 가장 많이 억제하였으며, chitinase 활성과 hydrogen cyanide 생성능이 가장 우수하였다. F. oxysporum과 P. infestans에 대한 항진균 효과는 근권세균이 생산하는 siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide와 chitinase의 활성에 따라 차이가 있음을 알 수 있었다.
채소 등 작물의 부패균인 Erwinia carotovora subsp. carotovora의 생육을 억제하는 길항세균을 경작지 표토층으로부터 분리하고 배양조건에 따른 억제력변화를 조사하고, 길항관련 유전자의 소재를 확인하였다. 분리균들중 가장 우수한 억제력을 갖는 S4, S14, S65 균주를 최종 선발하고 Pseudomonas 근연종으로 동정하였다. 523 배지를 사용하여 배양조건에 따른 억제력 변화를 조사한 결과 배지초기 pH를 7-8로 조정하여 $30^{\circ}C$에서 3일간 배양하였을 때 가장 높은 억제력을 보였고, 배지성분중 탄소원으로 mannitol과 sorbitol, 무기염으로 CaCl2를 첨가했을 때 효과적이었으나 질소원에 대한 감수성은 낮았다.
Rhizobacteria are a diverse group of free-living soil bacteria that live in plant rhizosphere and colonized the root system. Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) possessing ACC deaminase (ACCD) can reduce ACC and ethylene in plant tissue and mediated the growth of plants under various stresses including salt stress. ACCD decrease ethylene levels in plant tissue that produce high levels of ethylene in tissue via elevated levels of ACC under salt stress. We selected strains of Pseudomonas sp. possessing ACCD activity for their ability to promote plant growth under salt stress from soil sample collected at Byeonsan, Jeonbuk, South Korea. The Pseudomonas strains possessing ACCD increased the rate of the seedling and growth of chinese cabbage seeds under salt stress. We cloned ACCD gene from P.fluorescens and expressed recombinant protein in Escherichia coli. The active form of recombinant ACCD converted ACC to a-ketobutyrate. The in vivo treatment of recombinant ACCD itself increase the rate of the seedling and growth of Chinese cabbage seeds under salt stress. The polyclonal P.fluorescens anti-ACCD antibody specifically reacted with ACCD originated from Pseudomonas. This indicates that the antibody might act as an important indicator for ACCD driven from Pseudomonas exhibiting plant growth-promoting activity. This study will be useful for identification of newly isolated PGPR containing ACCD and exploioting the ACCD activity from PGPR against various biotic and abiotic stresses.
Background: Ginseng black spot disease resulting from Alternaria panax Whuetz is a common soil-borne disease, with an annual incidence rate higher than 20-30%. In this study, the bacterial strains with good antagonistic effect against A. panax are screened. Methods: A total of 285 bacterial strains isolated from ginseng rhizosphere soils were screened using the Kirby-Bauer disk diffusion method and the Oxford cup plate assay. We analyzed the antifungal spectrum of SZ-22 by confronting incubation. To evaluate the efficacy of biocontrol against ginseng black spot and for growth promotion by SZ-22, we performed pot experiments in a plastic greenhouse. Taxonomic position of SZ-22 was identified using morphology, physiological, and biochemical characteristics, 16S ribosomal DNA, and gyrB sequences. Results: SZ-22 (which was identified as Brevundimonas terrae) showed the strongest inhibition rate against A. panax, which showed 83.70% inhibition, and it also provided broad-spectrum antifungal effects. The inhibition efficacies of the SZ-22 bacterial suspension against ginseng black spot reached 82.47% inhibition, which is significantly higher than that of the 25% suspension concentrate azoxystrobin fungicide treatment (p < 0.05). Moreover, the SZ-22 bacterial suspension also caused ginseng plant growth promotion as well as root enhancement. Conclusion: Although the results of the outdoor pot-culture method were influenced by the pathogen inoculum density, the cropping history of the field site, and the weather conditions, B. terrae SZ-22 controlled ginseng black spot and promoted ginseng growth successfully. This study provides resource for the biocontrol of ginseng black spot.
양파 근권미생물은 양파 뿌리를 균원시료로 하여 약 250여종의 근권미생물을 순수 분리하였고 이들 중에서 길항미생물은 무름병균인 Erwinia carotovora subsp. carotovora와 시들음병균인 Fuarium oxysporium에 각각 서로 대치 배양하여 두 병원균 모두에 가장 강한 길항 효과를 나타내는 YJ-4 균주를 최종 선발하였다. 선발균주 YJ-4는 Bergey's mannual of systematic bacteriology 방법에 따라 조사하여 Bacillus 속으로 판정하였고, 세포벽 지방산을 분석하여 동정하는 Sherlock system에 의해 Bacillus ehimensis와 0.778의 유의성을 확인하였으며, 165 rDNA의 부분 염기서열(609bp)로 Bacillus ehimensis와 98.36%의 높은 유사도를 보여 길항균 YJ-4는 Bacillus ehimensis로 동정하였다. B. ehimensis YJ-4로 명명한길항균은 세균인 무름병균 (Erwinia carotovora subsp. carotovora)과 세균썩음병균 (Pseudomonas sp.)에도 길항력을 나타내었고, 진균인 잘록병균 (Rhizoctonia solani), 잎마름병균 (Stemphylium botryosum), 검은무의병균 (Alternaria porri), 검은점잎마름병균 (Septoria sp.), 잿빛곰팡이병균 (Botrytis cinerea), 흑색썩음균핵병균 (Sclerotium cepivotum), 시들음병균 (Fusarium oxysporium), 푸른곰팡이병균 (Penicillium sp.)등에도 길항 효과를 나타내었다. 특히 시들음병균인 F. oxysporium에 생육억제환의 길이가 24.8mm로 가장 높은 길항력을 나타내었다.
Murugesan, Senthilkumar;Lee, Young-Keun;Kim, Jung Hun
방사선산업학회지
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제3권1호
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pp.39-45
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2009
Three mineral phosphate solubilizing (MPS) bacteria where isolated from rhizosphere soil samples of common bean and weed plants. 16S rDNA analysis indicated that the isolate P2 and P3 are closely related to Pantoea dispersa while isolate P4 is closely related to Pantoea terrae. Isolates P2 and P3 recorded $381.60{\mu}g\;ml^{-1}$ and $356.27{\mu}g\;ml^{-1}$ of tricalcium phosphate (TCP) solubilization respectively on 3 days incubation. Isolate P4 recorded the TCP solubilization of $215.85{\mu}g\;ml^{-1}$ and the pH was dropped to 4.44 on 24 h incubation. Further incubation of P4 sharply decreased the available phosphorous to $28.94{\mu}g\;ml^{-1}$ and pH level was raised to 6.32. Gamma radiation induced mutagenesis was carried out at $LD_{99}$ dose of the wild type strains. The total of 14 mutant clones with enhanced MPS activity and 4 clones with decreased activity were selected based on solubilization index (SI) and phosphate solubilization assay. Mutant P2-M1 recorded the highest P-solubilizing potential among any other wild or mutant clones by releasing $504.21{\mu}g\;ml^{-1}$ of phosphorous i.e. 35% higher than its wild type by the end of day 5. A comparative evaluation of TCP solubilization by wild type isolates of Pantoea and their mutants, led to select three MPS mutant clones such as P2-M1, P3-M2 and P3-M4 with a potential to release >$471.67{\mu}g\;ml^{-1}$ of phosphorous from TCP. These over expressing mutant clones are considered as suitable candidates for biofertilization.
During an investigation of unrecorded prokaryotic species in Republic of Korea, a total of 53 bacterial strains belonging to the class Gammaproteobacteria were isolated from soil, seawater, tidal flats, rhizosphere, salt ponds, beach sand, urine, manure, sediment, and animal intestine (Russian grayling butterfly [Hipparchia autonoe], mouse [Mus musculus], and sea bass [Lateolabrax japonicus]). Strains were identified to species using the 16S rRNA gene sequence, showing high similarity (>98.7%) with the closest bacterial species and forming a robust clade in the neighbor-joining phylogenetic tree. The 53 strains of Gammaproteobacteria in this study have not been report previously in Korea. Therefore, we describe 27 genera of 16 families in 7 orders: 13 strains in the order Alteromonadales, 1 strain in the order Chromatiales, 11 strains in the order Enterobacterales, 7 strains in the order Oceanospirillales, 10 strains in the order Pseudomonadales, 8 strains in the order Vibrionales, and 3 strains in the order Xanthomonadales. Gram reaction, strain ID, isolation source, and morphological and basic biochemical characteristics are described for each species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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