Conditions for the release and regeneration of protoplasts form Rhizopus oryzae and intergeneric protoplast fusion between Rhizopus oryzae and Aspergillus oryzae were studied. High yields of protoplast fusion between Rhizopus oryzae and Aspergillus oxyzae were studied. High yield of protoplasts from young germilings of R. oryzae were obtained by using lytic enzymes containing chitosanase (3 mg/ml), chitinase (3 mg/ml) and Novozym 234 (5 mg/ml). 0.5M glucose was used as the osmotic stabilizer and optimum pH of buffer was determined to be pH 7.5-8.0. Under these conditions, protoplasts were formed after about 3-4 hrs incubation. Approximately, 1.0%-4.9% of these protoplasts were formed after about 3-4 hrs incubation. Approximately, 1.0%-4.9% of these protoplasts regenerated on solid medium with a soft agar overlay. We have also carried out protoplasts fusion between R. oryzae and A. oryzae and have succeeded in obtaining three types of intergeneric fusants. In these experiments, 35% PEG-4000 and 10 mM CaCl$_{2}$ were used as fsogenic agents, and auxotrophic properties were used as a genetic marker to select fusants. Complementation frequency be protoplasts fusion of A. oxyzae and R. oryzae was 4.4% * 10$^{-5}$ . The fusant strains of the first type were prototrophs showing an Aspergillus type morphology with dark-yellow sporulation, those of the second type were also Apergillus type morphology but showed no sporulation. And the strains of the third type stopped growing when fusion products grown on regeneration minimal medium were transferred to fresh minimal medium. The formation of fusion products was observed by fluorescent vital stains for complementary labelling of protoplats from R. oryzae and A. oryzae. Rhodamine 6G and fluorescein diacetate wer useful complementary vital stains of Rhizopus and Aspergillus protoplasts for visualization of requency and type (dicell, multicell) of fusion.
쌀 전분의 사상균별 누룩에 따른 발효적성을 확인을 위해 7종의 곰팡이로 누룩을 제조하여 당화력, 액화력, 단백질 분해력을 비교하고, 누룩별 약주의 품질특성을 측정한 결과는 다음과 같다. 균주별 당화력은 R. oryzae KCCM 11272으로 제조한 누룩이 3,647.72 SP/g으로 가장 높았다. 시판 누룩과 본 연구에서 제조한 누룩의 당화력은 A. kawachii KCCM 32819와 A. niger KCCM 32005로 제조한 누룩 외 시판 누룩의 당화력 보다 높았다. ${\alpha}$-amylase 활성은 R. japonicus KCCM 11604로 제조한 누룩이 가장 높았고, M. rouxii KCCM 60148로 제조한 누룩의 액화력 또한 높았다. 단백질 분해력은 R. japonicus KCCM 11604로 제조한 누룩이 가장 높았다. 결과적으로 곰팡이 균주별 누룩의 당화력, 액화력 및 단백질 분해력의 효소활성은 Rhizopus 속이 Aspergillus 속 및 Mucor 속 보다 높았다. 누룩별 약주의 pH는 시판누룩으로 담금한 약주가 4.14로 가장 높았고 R. japonicus KCCM 11604 균주로 제조한 누룩으로 담금한 약주가 시판 누룩과 유의적 차이를 보이지 않았다. 총산함량은 R. oryzae KCCM 11273 균주로 제조한 누룩으로 담금한 약주가 가장 높은 함량을 보였다. Ethanol 함량을 측정한 결과 R. oryzae KCCM 11272 누룩으로 제조한 약주가 15.28%로 가장 높았고, 다음으로 R. japonicus KCCM 11604 누룩으로 제조한 약주가 15.10%이었다. 균주 속별 ethanol 생성능은 Rhizopus 속의 균주가 Aspergillus 속과 Mucor 속 보다 높았다. 관능평가 종합 기호도는 R. japonicus KCCM 11604 누룩으로 담금한 약주가 5.7로 높은 기호도를 보였다. 누룩별 효소활성 측정 결과 Rhizopus 속의 균주가 높은 활성을 보였고, 누룩별로 담금한 약주의 품질 특성 결과도 Rhizopus 속으로 제조한 누룩의 약주가 품질이 우수한 결과를 보여 쌀 전분의 발효에 적합한 곰팡이는 Rhizopus 속이라 판단되며, 그 중 R. japonicus KCCM 11604 균주로 누룩을 제조해 쌀약주를 담금할 경우 발효적성이 우수할 것으로 판단된다.
Soft rot in apple caused by Rhizopus oryzae was found for the first time in Korea. A detailed description of the specimen is given along with its internal transcribed spacer rDNA sequence. The fungus was identified as Rhizopus oryzae based on the mycological characteristics, molecular data, and pathogenicity testing.
Soft rot on banana fruit caused by Rhizopus oryzae was identified for the first time in Korea. Colonies were white to light brown and formed numerous sporangiospores. Optimum temperature for mycelial growth was $30^{\circ}C$. Sporangia were globose and $30{\sim}200{\mu}m$. Sporangiophores were usually straight, $8{\sim}20{\mu}m$, and rhizoids usually in groups of 3~5. Columella were globose to sub-globose and $90{\sim}110{\mu}m$. Sporangiospores were sub-globose or oval and $4{\sim}10{\mu}m$. Based on its mycological characteristics, molecular analysis, and pathogenicity to host plants, this fungus was identified as Rhizopus oryzae Went & Prisen Geerligs. This is the first report of soft rot on banana caused by Rhizopus oryzae in Korea.
Rhizopus oryzae is reported for the first time on Cucumis melo L. var. makuwa Makino. A detailed description of this Korean specimen is given, along with its rDNA internal transcribed spacer sequence. On the basis of mycological characteristics and molecular data, the fungus was identified as R. oryzae Went & Prinsen Geerligs.
전통 메주의 산업화를 위해서는 먼저 제조공정이 확립되어야 하며 이를 위해서는 적합한 종균이 개발되어야 한다. 재래식 메주로부터 Rhizopus stolonifer, Rhizopus oryzae 및 Absidia corymbifera를 분리하여 균주 유래 protease의 특성을 조사하여 장류산업에 있어 기초자료로 이용하고자 한다. 세 균주를 각각 배양한 밀기울 배지에서의 protease 최적 생산조건은 모두 3$0^{\circ}C$, 4일간이었으며 초기 pH에 의한 영향은 없었다. 3$0^{\circ}C$에서 4일간 각 균주를 배양하고 증류수로 조효소액을 추출하여 효소작용을 위한 최적 pH와 온도를 조사한 결과, 각각 pH 6.0, 5$0^{\circ}C$였고 pH 4.0~7.0의 범위인 약산성 영역과 4$0^{\circ}C$이하에서 안정하였다. 된장의 염도 범위를 고려해서 16% 이내의 영도에 의한 영향을 조사한 결과, 염농도는 효소활성에 거의 영향을 미치지 않았다. Rhizopus stolonifer, Rhizopus oryzae 및 Absidia corymbifera로부터 유래된 각 효소액의 Hammastein casein 기질에 대한 결합력과 가수분해속도를 비교한 결과 $K_{m}$ 은 각각 3.3$\times$$10^{-4}$ , 0.75$\times$$10^{-4}$ , 1.3$\times$$10^{-4}$ 로 상호간에 큰 차이가 없었으며, $V_{max}$도 17.2$\mu\textrm{g}$/min, 9.4 $\mu\textrm{g}$/min, 7.8 $\mu\textrm{g}$/min으로 유사하였다.
The purpose of this study was to examine the aptitude of wheat flour-Nuluks, for Takju brewing, which were made with Aspergillus oryzae, Rhizopus japonicus or Aspergillus usamii mut. Shirousamii, and to know the way of effective use the Aspergillus oryzae-Nuluk showed high saccharogenic activity, and Rhizopus japonicus-Nuluk high proteolytic activity. When these two Nuluks were combined, the activities of saccharogenic amylase and protease were more balanced. The Takju mash of Aspergillus oryzae-Nuluk was high in acidity and in amino acidity, and that of Rhizopus japonicus-Nuluk high in the content of free sugar, but, that of Aspergillus usamii mut. Shirousamii-Nuluk was low in amino acidity, free sugar and ethanol content. The Takju of Rhizopus japonicus-Nuluk was high in the content of suspended solid and slow in its sedimenting rate, but that of Aspergillus usamii mut. Shirousamii-Nuluk was not. The Takju which was made with combined use of Aspergillus oryzae-Nuluk and Rhizopus japonicus-Nuluk was more balanced in the composition of flavoring ingredients, and was slow in sedimenting rate of suspended solid. Moreover, it gained good result in sunsory evaluation test.
As a taxonomical study of Rhizopus spp., 30 strains of Rhizopus spp. were isolated from 55 specimens of "Meju" which were collected through all over South-Korea. Results of the experiments with the 30 strains of Rhizopus spp. are as follows; 1. One strain of them was classified in to Rhizopus nigricans group. 2. Eleven strains of them were classified in to Rhizopus chinencis group. 3. Three strains of them were classified in to Rhizopus oryzae sub-group. 4. Fifteen strains of them were classified in to Rhizopus oryzae Japanicus sub-group. All these strains of Rhizopus spp. have not been reported yet, so far in South-Korea.uth-Korea.
방사선 중합체로 고정화한 Rhizopus oryzae의 유산생성 방사선 공중합 고분자로 Rhizopus oryzae를 흡착 고정화하였다. 이 고정화 균체는 고정화하지 않은 생균체보다 반응시간도 짧았으며 제품수율도 아주 높았다. 즉 글루코스를 주 탄소원으로 한 경우 고정화 하지 않은 균체 배양은 반응후 96시간에 탄소원을 거의 소비하고 유산생성 수율이 약60%에 다다랐으나 고정화 균체는 반응후 48시간 안에 수율이 약 88%이상으로 되었다. 또 중합체 중 모노머의 비율이 5-10%의 것이 고정화에 좋은 결과를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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