자매종 R.nigromaculate(참개구리)와 R. plancyi(금개구리)간의 생식적 격리기작을 구명하기 위하여 전라남도 광주시에서 발견된 자연집중 1개체를 포함한 두 종의 형태, 유전적 변이 및 번식시기 등을 조사한 분석한 결과는 다음과 같다. 두 종은 형태,유전,mating call 및 번식시기 등에 뚜렷한 차이가 있었고, 약 350만년 전에 남방계인 R. plancyi에서 R.nigromaculate가 분화되었을 것으로 추정되었다. 잡종 1개체는 전기영동 결과 일대잡종으로 확인되었으며 포란한 정상 난소를 갖고 있는 점으로 미루어 보아 생식이 간으하다고 여기지며, 따라서 postmating isolating mechanism은 불완전하게 생성되었다고 추측된다.
To detect viral agents and isolate porcine circovirus 2 (PCV2), 60 samples of lung and lymph node were collected from 5 to 12 week-old pigs that had showed clinical signs of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Polymerase chain reactions (PCRs) were conducted to identify the viral pathogens including PCV1, PCV2, porcine parvovirus (PPV) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) that have been considered to be the causal agents of PMWS. Among 60 samples, PCV 2 was detected from 57 samples but no PCV 1 was detected. PRRSV and/or PPV were also detected from 27 (47.4%) samples and 1 (1.8%) sample of these 57 PCV 2-positive samples, respectively. Tissue homogenates were inoculated onto PCV-free PK-15 cell monolayers. Seven isolates were confirmed as PCV 2 by multiplex PCR, indirect immunofluorescence assay, and transmissible electron microscopy. These date suggest that PRRSV is a major cofactors causing PMWS in pigs that were infected with PCV2 in Korea.
유사산 태아의 폐, 청색증을 나타내는 자돈으로부터 돼지생식기 및 호흡기증후군(PRRS)의 원인체로 추정되는 바이러스주(KPRRSV) 들을 분리하였다. 분리된 바이러스주는 돼지콜레라, 돼지오제스키병, 돼지뇌심근염바이러스에 대한 형광항체반응에서는 음성이었으며 기니픽혈구에 대한 혈구응집 능력을 나타내지 않았다. 그리고 포유 마우스의 뇌내 접종시 이상을 나타내지 않았으나 돼지생식기 및 호흡기증후군에 대한 형광항체검사시 양성반응을 나타내었다. 분리된 바이러스는 돼지폐포탐식세포(porcine alveola macrophages)에서 세포변성효과(cytopathic effect)를 나타내었으며 세포변성효과를 나타내었던 바이러스주중 일주(KPRRSV-1)를 돼지폐포탐식세포에서 7대 연속 계대하여 돼지에 접종한 후 혈청을 분리하여 미국 및 유럽지역에서 분리된 돼지유행성 유사산 및 호흡기증후군의 바이러스를 탐식세포에 감염시켜 효소면역방법 (immunoperoxidase monolayer assay)으로 분석한 결과 분리된 바이러스는 미국형 돼지호흡기 및 유사산증후군에 가까운 항원형으로서 판명되었다.
Kalopanax pictus is a long-lived woody species mostly distributed in East Asia. K. pictus has been regarded as medically and ecologically important species in Korea. Thornless castor aralia variant, local name 'Cheongsong' is an endemic to Cheongsong province in Korea. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) was used to investigate the genetic variation and structure of Korean populations of two species. A high level of genetic variation was found in six K. pictus populations. Twelve primers revealed 49 loci, of which 29 were polymorphic (59.2%). Nei's gene diversity for K.pictus and K. pictus variant were 0.119 and 0.098, respectively. Mean of genetic diversity in K. pictus was higher than average values for species with similar life history traits. The asexual and sexual reproduction, perennial habitat, and longevity are proposed as possible factors contributing to high genetic diversity. An indirect estimate of the number of migrants per generation (Nm=0.857) indicated that gene flow was not extensive among Korean populations of K.pictus. It is suggested that the isolation of geographical distance and reproductive isolation between K.pictus and K.pictus variant populations may have played roles in shaping the population structure of this species.
Inter simple sequence repeat (ISSR) markers were performed in order to analyse the phylogenetic relationships of eight Hypericum electum populations in Korea. The six primers were produced 37 reproducible ISSR bands. Analysis of ISSR from individual plants of Korean H. erectum resulted in 22 polymorphic bands with 59.5%. Across populations, the mean number of alleles per locus was 1.348 and Shannon's information index was 0.203.Population Mt. Gyeryong had the highest expected genetic diversity (0.175) among all populations. When species were grouped by eight populations, within group diversity was 0.140 (Hs), while among group diversity was 0.472 (G$_{ST}$) on a per locus basis. The estimated gene flow (Nm) for H. erectum was very low (0.561). It is suggested that reproductive isolation by the isolation of geographical distance among H. electum populations and genetic drift may have played roles in shaping the population structure of this species. In phonetic tree, all populations were well separated from each other. Thus, ISSR markers are very effective in classifying natural population levels of genus Hypericum in Korea.
We tried to develop detection system of porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) by in situ hybridization(ISH) in the piglets experimentally infected with KPRRS-2, the Korean isolate(12 piglets) or Mn-1b, the American isolate(4 piglets), and in the natural infection suspected 6 piglets. Twelve 30-days-old piglets(two pigs per each inoculated group) were inoculated by nasal instillation of KPRRS-2 virus(total dose $10^{4.5}TCID_{50}$), Six piglets(one pig per each group) were induced contact infection with inoculated piglets, during the experiment, and two piglets were used as control. Inoculated or contacted piglets were euthanized at 1, 3, 5, 7, 14 and 21 days postinoculation(DPI). The respiratory signs such as coughing and nasal discharge were observed on day 3 DPI, and ear cyanosis were on day 5 DPI, including contacted piglets. Through the necropsy, purple discolorization of dorsal part of lung, and hypertrophy of local lymph nodes were observed. The histopathological lesions of lung were interstitial pneumonia characterized by type 2 pneumocyte hyperplasia. We prepared the probe for ISH by RNA isolation from KPRRS-2, RT-PCR, and biotin labeling. We performed the ISH within only 1~2 hours using $Microprobe^{TM}$ capillary action system. As the results, the strong red specific positive signals, means PRRSV distribution, was mainly observed in the cytoplasm of alveolar macrophages. And also signals were detected in some type 2 pneumocytes and bronchiolar epithelium of lung, myocardium, liver, kidney, tonsil, spleen, gastrointestinal mucosa, testis and lymph nodes.
Kim, Min-Jeong;Ahn, Kwang-Sung;Kim, Young-June;Shim, Ho-Sup
Reproductive and Developmental Biology
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제33권3호
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pp.133-137
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2009
Pluripotent embryonic stem (ES) cells isolated from inner cell mass (ICM) of blastocyst-stage embryos are capable of differentiating into various cell lineages and demonstrate germ-line transmission in experimentally produced chimeras. These cells have a great potential as tools for transgenic animal production, screening of newly-developed drugs, and cell therapy. Miniature pigs, selectively bred pigs for small size, offer several advantages over large breed pigs in biomedical research including human disease model and xenotransplantation. In the present study, factors affecting primary culture of somatic cell nuclear transfer blastocysts from miniature pigs for isolation of ES cells were investigated. Formation of primary colonies occurred only on STO cells in human ES medium. In contrast, no ICM outgrowth was observed on mouse embryonic fibroblasts (MEF) in porcine ES medium. Plating intact blastocysts and isolated ICM resulted in comparable attachment on feeder layer and primary colony formation. After subculture of ES-like colonies, two putative ES cell lines were isolated. Colonies of putative ES cells morphologically resembled murine ES cells. These cells were maintained in culture up to three passages, but lost by spontaneous differentiation. The present study demonstrates factors involved in the early stage of nuclear transfer ES cell isolation in miniature pigs. However, long-term maintenance and characterization of nuclear transfer ES cells in miniature pigs are remained to be done in further studies.
In the present study, we have examined the crossability of four species in the A. jaluense complex to provide additional information on their delimitation and levels of differentiation. Crosses between diploid A. chiisanense and the tetraploid species including A. jaluense s. str., A. triphyllum, and A. pseudoproliferum yielded no fruit- or seed-set, indicating that the former species is reproductively completely isolated from the latter three species. In interspecific crosses between the tetraploid species, combinations involving A. jaluense s. str. resulted in much reduced fruit- and seed-set, indicating that A. jaluense s. str. is more or less reproductively isolated from the other tetraploid species. However, crossing data revealed the absence of reproductive isolation between A. triphyllum and A. pseudoproliferum These results strongly support the relationships that have been previously suggested for the A. jaluense complex on the basis of morphology, chromosome number, and flavonoid chemistry.
The mating systems of natural populations of Potentilla freyniana in Korea were determined using allozyme analysis. The result suggests that P. freyniana is outcrossing as well as employing vegetative reproduction by stolon (self-fertilization rate, s < 0.5). The values of the inbreeding coefficient of eight populations in Korea varied from 0.244 to 0.331, with an average value of 0.274. For eight natural populations, multi-locus estimates of outcrossing (tm) was 0.603 across 13 polymorphic loci, with individual population values ranging from 0.530 to 0.652. The relatively low outcrossing rates of some populations could be attributed to extensive vegetative reproduction by stolon and the isolation of flowering mature plants. Although P. freyniana usually propagated by asexually-produced ramets, I could not rule out the possibility that sexual reproduction occurred at a low rate because each ramet may produce terminal flowers. Although heterozygote excess was observed in some natural populations, most populations exhibited varying degrees of inbreeding and a heterozygote deficit.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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