The plant shoot meristem maintains a group of stem cells that remain active throughout the plant life. They continuously generate new cells that are then recruited for organ initiation in the peripheral zone. Stem cell proliferation and daughter cell differentiation has to be integrated with overall growth and development of the diverse functional domains within the shoot apex. Several studies have revealed extensive communication between these domains. The signaling mechanisms employed comprise diffusible peptides, directional transport of plant hormones, but also complex interactions between transcription factors, that together establish a panoply of regulatory inputs that fine-tune stem cell behavior in the shoot meristem.
The delta sleep-inducing peptides (DSIP, Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) is an important regulatory hormone, controlling hypothalamus and pituitary functions. In the current study, an expression system was designed for the rapid and economic expression oi recombinant DSIP for biophysical studies. Artificially synthesized oligonucleotides encoding DSIP were cloned into a pGEX-KG vector and expressed in E. coli (BL21). The recombinant GST-DSIP was then readily purified using a GST affinity column. To obtain intact DSIP from the GST-DSIP, thrombin cleavage and a CNBr reaction were successively carried out. The DSIP in the CNBr reaction mixture was subjected to RP-HPLC purification to yield 1.2 mg DSIP from a 1 liter culture of E. coli. Identification of the DSIP was peformed using MALDI-MS and an amino acid composition analysis.
Microglia are emerging as critical regulators of innate immune responses in AD and other neurodegenerative disorders, highlighting the importance of understanding their molecular and cellular mechanisms. We attempted to determine the role of crosstalk signaling between $IFN-{\gamma}$ and $TGF-{\beta}$ in $A{\beta}$ clearance by microglia cells. We used in vitro and in vivo mouse models that recapitulated acute and chronic aspects of microglial responses to $A{\beta}$ peptides. We showed that crosstalk signaling between $TGF-{\beta}$ and Smad2 was an important mediator of neuro-inflammation. These findings suggest that microglial $TGF-{\beta}$ activity enhances the pathological progression to AD. As $TGF-{\beta}$ displays broad regulatory effects on beneficial microglial functions, the activation of inflammatory crosstalk signaling between $TGF-{\beta}$ and Smad2 may be a promising strategy to restore microglial functions, halt the progression of $A{\beta}$-driven pathology, and prevent AD development.
Maintaining internal homeostasis and regulating innate behaviors are essential for animal survival. In various animal species, a highly conserved neuroendocrine system integrates sensory inputs and regulates physiological responses to environmental and internal changes. Diuretic hormones 44 and 31, which are homologs of mammalian corticotropin-releasing factor (CRF) and calcitonin gene-related peptide (CGRP), respectively, control body fluid secretion in Drosophila. These neuropeptides and their receptors have multiple physiological roles, including the regulation of body-fluid secretion, sleep:wake cycle, internal nutrient-sensing, and CO2-dependent response. This review discusses the physiological and behavioral roles of DH44 and DH31 signaling pathways, consisting of neuroendocrine cells that secrete DH44 or DH31 peptides and their receptor-expressing organs. Further research is needed to understand the regulatory mechanisms of the behavioral processes mediated by these neuroendocrine systems.
스트레스와 면역기능 간의 관계는 중추신경계, 신경내분비계 및 면역계 간의 의사소통 즉 상호작용에 의해 이루어지고 있다. 중추신경계와 면역계가 상호작용하는 주요 경로는 임파조직의 신경계 wiring system과 신경내분비계다. 면역계는 neuropeptide를 생성하고 이것은 면역반응을 조절한다. 정신사회적 인자와 면역기능 간의 중개자로는 뇌하수체에서 방출되는 peptide, hormone 및 자율신경계 물질이 있다. 시상하부는 내분비계, 신경계 및 면역계를 통합하는 역활을 한다. 특히 시상하부의 paraventricular nucleus가 이 일에 중추적인 역할을 담당한다. 한편 내분비계는 면역계에 의해서 휘이드백을 받는다. 뇌하수체가 면역계를 조절하는 주요 경로로는 시상하부-뇌하수체-부신-흉선축, 시상하부-뇌하수체-성선-흉선축, 송과선-시상하부-뇌하수체축 등이 시사되고 있다. 스트레스와 면역계 간에는 양 방향의 경로가 있는 것으로 가정된다. 즉 스트레스가 면역계에 영향을 미칠 뿐만 아니라 면역계가 정신사회적 기능에 영향을 미칠 수 있다. 따라서 스트레스와 면역기능 간의 관계를 규명하기 위해서는 면역계, 내분비계, 자율신경계 및 뇌활동을 동시에 측정, 비교하여 이들을 통합할 필요가 있다.
The WD40-repeat proteins serve as a platform coordinating partner proteins and are involved in a range of regulatory cellular functions. A WD40-repeat protein (CsWD1) of Clonorchis sinensis previously cloned is expressed stage-specifically in the tegumental syncytium of C. sinensis metacercariae. In the present study, interact-ing proteins with the CsWD1 protein was purified by immunoprecipitation and 2 dimension gel electrophoresis from the C. sinensis metacercaria soluble extract, and tryptic peptides were analyzed by LC/ESI-MS. Putative partner proteins were annotated to be actin-2, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, and hypothetical and unmanned proteins. The CsWD1 protein was predicted to contain 3 conserved actin-interacting residues on its functional surface. With these results, the CsWD1 protein is suggested to be an actin-interacting protein of C. sinensis.
Muthuramalingam, Karthika;Kim, Jun Ho;Jeon, You Jin;Rho, Sum;Kim, Young Mee;Cho, Moonjae
Journal of Applied Biological Chemistry
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제60권4호
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pp.373-381
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2017
Hippocampus abdominalis, the big belly sea horse, is widely known for its medicinal value in Chinese folk medicine. In this study, extract obtained by proteolytic degradation of this species was investigated for its effects on skeletal muscle development, both in vitro and in vivo. Muscle cell lines ($C_2C_{12}$ and $L_6$) treated with the bioactive peptide did not have any detrimental effects on the cell viability, which was above 80%. Optical microscopy analysis on the morphology of the sea horse extract (SHE)-treated cells showed enhanced differentiating ability with myotube formation. Moreover, cells incubated with the hydrolysate displayed decreased proliferation rate, as recorded by the electric cell substrate impedance sensing system, thereby supporting enhanced differentiation. For a period of 12 weeks, mice models were fed with SHE and simultaneously subjected to treadmill exercise, which increased the expression of Myogenin, a key myogenic regulatory factor. In addition, there was an increase in the expression of AMPK- and Cytochrome C, both of which are important in mitochondrial biogenesis. Thus, the SHE from Hippocampus abdominalis can be a promising candidate as protein supplement aiding muscle development.
The complete nucleotide sequence of the Bacillus circulans F-2 RSDA gene, coding for raw starch digesting a-amylase (RSDA), has been determined. The RSDA structure gene consists of an open reading frame of 2508 bp. Six bp upstream of the translational start codon of the RSDA is a typical gram-positive Shine-Dalgarno sequence and the RSDA encodes a preprotein of 836 amino acids with an Mr of 96, 727. The gene was expressed from its own regulatory region in E. coli and two putative consensus promoter sequences were identified upstream of a ribosome binding site and an ATG start codon. Confirmation of the nucleotide sequence was obtained and the signal peptide cleavage site was identified by comparing the predicted amino acid sequence with that derived by N-terminal analysis of the purified RSDA. The deduced N-terminal region of the RSDA conforms to the general pattern for the signal peptides of secreted prokaryotic proteins. The complete amino acid sequence was deduced and homology with other enzymes was compared. The results suggested that the Thr-Ser-rich hinge region and the non-catalytic domain are necessary for efficient adsorption onto raw substrates, and the catalytic domain (60 kDa) is necessary for the hydrolysis of substrates, as suggested in previous studies (8, 9).
Rizwana B.Syed Nabi;Eunyoung Oh;Sungup Kim;Kwang-Soo Cho;Myoung Hee Lee
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2022년도 추계학술대회
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pp.231-231
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2022
The GASA protein (Gibberellic acid-stimulated Arabidopsis) are family of small cysteine-rich peptides found in plants. These GASA gene family mainly involved in biotic/abiotic stress responses and plant development. Despite being present in a wide plant species, their action and functions still remain unclear. In this study, using the in-silico analysis method we identified 41 GASA genes in peanuts (Arachis hypogaea L.). Based on the phylogenetic analysis 41 GASA genes are classified in the four major clusters and subclades. Mainly, clusters IV and III comprise the majority of GASA genes 15 and 11 genes respectively, followed by cluster I and cluster II with 9 and 6 genes respectively. Additionally, based on in-silico analysis we predicted the post-transcriptional and post-translational changes of GASA proteins under abiotic stresses such as drought and salt stress would aid our understanding of the regulatory mechanisms. Hence, a further study is planned to evaluate the expression of these GASA genes under stress in different plant tissues to elucidate the possible functional role of GASA genes in peanut plants. These findings might offer insightful data for peanut advancement.
Biosynthesis and secretion of anterior pituitary hormones are under the control of specific hypothalamic stimulatory and inhibitory factors. Among them, Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) is the major stimulator of pituitary somatotrophs activating GH gene expression and secretion. Human GHRH is a polypeptide of 44 amino acids initially isolated from pancreatic tumors, and the gene for the hypothalamic form of GHRH is organized into 5 exons spanning over 10 kilobases (kb) on genomic DNA and encodes a messenger RNA of 700-750 nucleotides. Several neuropeptides classically associated with the hypothalamus have been found in the extrahypothalamic regions, suggesting the existence of novel sources, targets and functions. GHRH-like immunoreactivity has been found in several peripheral sites, including placenta, testis, and ovary, indicating that GHRH may also have regulatory roles in peripheral reproductive organs. Furthermore, higher molecular weight forms of the GHRH transcripts were identified from these organs (1.75 kb in testis; 1.75 and >3 kb in ovary). These tissue-specific expression of GHRH gene suggest the existence of unique regulatory mechanism of GHRH expression and function in these organs. In fact, placenta-specific and testis-specific promoters for GHRH transcripts which are located in about 10 kb upstream region of hypothalamic promoter were reported. The use of unique promoters in extrahypothalamic sites could be refered in a different control of GHRH gene and different functions of the translated products in these tissues. Somatotrophs and lactotrophs have been thought to be derived from a common bipotential progenitor, the somatolactotrophs, which give origins to either phenotypes. Although the precise mechanism responsible for the lactotroph differentiation in the anterior pituitary gland has not been yet clalified, there are several candidators for the generation of lactotrophs. In human, the presence of GHRH peptides with different size from authentic hypothalamic form in the normal anterior pituitary and several types of adenoma were demonstrated. Recently our group found the existence of immunoreactive GHRH and its transcript from the normal rat anterior pituitary (gonadotroph> somatotroph> lactotroph), and the GHRH treatment evoked the increased proliferation rate of anterior pituitary cells in vitro. The transgenic mouse models clearly shown that GHRH or NGF overexpression by anterior pituitary cells induced development of pituitary hyperplasia and adenomas particularly GH-oma and prolactinoma. Taken together, we hypothesize that the pituitary GHRH could serve not only as a modulator of hormone secretion but as a paracrine or autocrine regulator of anterior pituitary cell proliferation and differentiation. Interestingly enough, the expression of Pit-1 homeobox gene (the POU class transcription factor) was confined to somatotrophs, lactotrophs and somatolactotrophs in which GHRH receptors are expressed commonly. Concerning the mechanism of somatolactotroph and lactotroph differentiation in the anterior pituitary, we have focused following two possibilities; (1) changes in the relative levels or interactions of both hypothalamic and intrapituitary factors such as dopamine, VIP, somatostatin, NGF and GHRH; (2) alterations of GHRH-GHRH receptor signaling and Pit-1 activity may be the cause of lactotroph differentiation or pituitary hyperplasia and adenoma formation. Extensive further studies will be necessary to solve these complicated questions.
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