Plant regeneration depending on explant type was inves-tigated with cotyledon, hypocotyl, and leaf explants of garland chrysanthemum (Chrysanthemum coronarium L.) cultured on MS basal medium supplemented with various concentrations of SAP and NAA combination. Among the three different types of explants, hypocotyl explants grown on MS medium containing $1.0{\mu}M\;NAA,\;1.0{\mu}M\;BA\;and\;6{\mu}M\;AgNO_3$ produced the highest adventitious shoots (4.67 per explant). Hypocotyl explants not only produced more vigorous shoots, which regenerated aster than the cotyledon and leaf explants. An efficient root formation was observed in MS medium containing $3\%$sucrose. The concentration of NAA did not show significant effects on root formation. Results from this experiment suggested that hypocotyl explants were efficient for the regeneration of garland chrysanthemum.
Adventitious multiple shoots were developed from leaf, petiole and internode explants of Geophila reniformis D. Don. on MS medium supplemented with various concentrations of $N^6$-benzylaminopurine (BAP) or Kinetin (KIN) alone or in combination with indole-3-acetic acid (IAA). Leaf showed maximum organogenetic potential, followed by petiole and internode. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 22.22 $\mu{M}$ BAP and 4.57 $\mu{M}$ IAA induced maximum shoot buds from leaf explants. Internodal segments showed low potential of direct organogenesis. The regenerated shoots rooted the best in presence of 10.75 - 13.44 $\mu{M}$$\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA) along with 2.22 $\mu{M}$ BAP, and were successfully established in the field with a survival rate of 89.11%.
Sweet potato has low regeneration capacity, which is a serious obstacle for the fruitful production of transgenic plants. Simple and rapid regeneration method from storage root explants of purple sweet potato (Ipomoea batatas L.) was investigated. The embryogenic callus was observed from 4 cultivars and its highest rate was induced at 1 μM 2,4-D after 5 weeks of culture. Result revealed that a low concentration of 2,4-D and low light intensity was important factors for embryogenic callus formation. After subculture on medium with 5 μM ABA for 4 days, subsequently, occurred the regeneration of shoots within 4 weeks when these embryogenic callus was transferred onto the MS hormone free medium. Regenerated shoots were developed into platelets, and grown normal plants in the greenhouse. We developed a simple and quickly protocol to regenerate plantlets in storage root explants of purple sweet potato. This regeneration system will facilitate tissue culture and gene transfer research of purple sweet potato.
The highest degree of callus formation was obtained from the shoot tips of Dianthus superbus when cultured on the MS medium supplemented with 2.0 mg/L NAA and 0.5 mg/L BAP. Embryogenic calluses were obtained from the seperated friable calluses on MS medium containing 2.0 mg/L 2,4-D after 7-8 wk of culture. For plant regeneration, embryogenic calluses were selected and cultured on te proliferation medium. After 3 wk, somatic embryos appeared on MSK medium (0.5 mg/L NAA, 2.0 mg/L kinetin) and N6 medium (2.0 mg/L kinetin, 0.1 mg/LNAA, 0.1 mg/L 2,4-D and 2.0 g/L casein hydrolysate). When these somatic embryos were kept under continuous illumination, shoots were successfully regenerated on the both media. The shoots were rooted on MS medium supplemented with 2.0 mg/L NAA.
Effective micropropagation was achieved by axillary bud culture from stool shoots of 15-year-old Betula platyphylla var. japonica. Shoot development and proliferation from the explants were successful on WPM supplemented with 0.5 or 1.0mg/l BAP. All the regenerated shoots rooted when transfered to GD medium containing 0.2mg/l IBA. After transplaning to soil more than 95% of the plantlets survived and showed normal growth. The results demonstrate that masspropagation of selected mature trees is feasible using tissue culture technique.
A protocol has been developed for rapid large scale clonal propagation of an aromatic endangered medicinal plant, Hemidesmus indicus R. Br. with the elimination of the problems such as premature leaf fall and callus formation during caulogenesis and rhizogenesis. Multiple shoots were induced from shoot tip and nodal explants on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1 mg/L Benzylaminopurine (BAP) and 0.5 mg/L Napthaleneaceticacid (NAA). Addition of 15 mg/L adenine sulphate to the above medium checked leaf abscission completely, reduced the time required for caulogenesis and restored morphogenetic potential after several subcultures. The in vitro grown propagules were rooted in 1/2 MS medium supplemented with 2 mg/L Indolebutyric acid (IBA) +1 mg/L NAA and sucrose 0.7% (w/v). Addition of charcoal at 100 mg/L to the rooting medium quickened root initiation with a complete check on callus formation. The effect of sucrose concentration on both caulogenesis and rhizogenesis was also studied. The resultant plantlets were acclimatized and grown in fields where ninety eight percent of the rooted shoots survived and grew normally. The estimation of the secondary metabolite content in the shoots of the regenerated plant and the mother plant indicated that the concentration of the three secondary metabolites lupeol, vanillin and rutin was similar.
The effects of plant growth regulators on callus formation and organogenesis in shoot tip explant of Belancanda chinensis were examined. Shoot tip explants cultured in full salt strength of MT(Murashige and Tucker) medium containing 2,4-D 1.0 or 2.0mg/l were vigorously formed callus. Full salt strength of MT medium and 1/2 MT medium supplemented with zeatin 1.0mg/l were more effective than that with combination treatments of 2,4-D on the formation of shoots from calli. When shoots regenerated from shoot tips were transplanted into 1/2 MT medium added with 1.0mg/l, 41% of shoots formed roots.
This study describes culture conditions for a plant regeneration system via a combined pathway of somatic embryogenesis and organogenesis in root explant cultures of the commercial rose cultivar 'Charming'. Root explants formed white calluses at a frequency of 30% after 6 weeks of culture on Schenk and Hildebrandt (SH) medium supplemented with $11mg\;1^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. After 6 weeks of transfer to SH medium without growth regulators, initial white calluses gave rise to globular somatic embryos at a frequency of 2.8%, which were subsequently dedifferentiated to embryonic tissues. Somatic embryos or embryonic tissues initially derived from root explants did not undergo development beyond cotyledonary stage. To produce adventitious shoots, embryonic tissues were sliced and cultured on SH medium with $0.5mg\;1^{-1}$ 6-benzyladenine. After 4 weeks of culture, 28% of embryonic tissue explants formed adventitious shoots. Regenerated shoots were rooted on half strength SH medium with $0.1mg\;1^{-1}$${\alpha}-naphthalaneacetic$ acid and subsequently grown to maturity. Root-derived embryonic tissues were proliferated by subculture, while retaining the capacity for shoot production for a few years.
Plants regenerated from in vitro cultures carry chromosomal variations, especially in long-term culture. Reducing the duration of plant tissue culture is one of the ways to reduce genetic and epigenetic changes. In this study, we reduced the duration of long-term culture and repeat subculture using small bulblets derived from bulb scales in two lily cultivars. The adventitious bulblets derived from bulb-scale tissue were cultured on three different media containing Murashige and Skoog (MS) basal medium supplemented with 1 g/L Charcoal, MS medium containing 0.3 mg/L IAA and 0.4 mg/L BA hormone with or without Charcoal, respectively. About seven weeks later, the number of newly propagated multiple shoots in the two media, A and B media, showed little differentiation. Compared to both media, the number of propagated multiple shoots increased 5-fold in MS medium containing 0.3 mg/L IAA and 0.4 mg/L BA hormone without Charcoal (C medium). The number of propagated multiple shoots ranged from 5 to 6 and 4 to 6 with an average of 5 in TropicalPink and GreenStar cultivars, respectively. The flow cytometric measurements indicated no variation in the ploidy level between control and in vitro propagated plants.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2022.09a
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pp.62-62
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2022
Freesia has been an important worldwide cut flower because of its fragrance, long vase life and the wide color range of the flower. The conventional propagation methods by seeds and corms have many disadvantages such as shorter inflorescences with fewer numbers of florets, a reduction in cut flower quality and the accumulation of plant viruses in corms by successive cultivation. Therefore, the conventional propagation systems in Freesia needs to be replaced with tissue cultures to overcome the disadvantages. This study explored an efficient multiplication protocol using the combination of plant growth regulators (PGRs) for developed cultivar 'Sunny Gold'. The combination between 6-benzylaminopurin (BA) and α-naphthalene acetic acid (NAA) did not produce new shoots but developed enlarged roots. BA only treatments and the combination between BA and kinetin treatments were effective on shoot multiplication. The highest average number of shoots was 5.3 in the presence of 3 mg/L BA and 0.5 mg/L kinetin. To produce corms and cormlets, proliferated shoots were subcultured on 1/2 Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 90 g/L sucrose, 1 g/L charcoal and 7 g/L plant agar and placed at 4℃ in the dark for 6 months. The small size of corms and comlets were produced. The average number of regenerated comlets was 2.75 per shoot. The results showed that shoot multiplication is more efficient than cormlet regeneration for in vitro freesia proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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