Leaf dise explants of Solanum tuberosum cultivar. Desiree and Atlantic, were infected with a Agrobacterium MP90 strain containing chimeric gene construct, consisting of antibiotic and low temperature regulated gene (H28) for transformation. regenerated multiple shoots were selected on a medium containing kanamycin and carbenieillin after exposure to Agrobacterium. Both PCR analysis of NPT Ⅱ, H28 genes and northern blot analysis indicated that the genes coding for the enzyme were successfully integrated into the potato genome and could be expressed in potato plants.
The shoot tip and young leaf of Rhodiola sachalinensis were cultured to invest the plant growth regulator condition for callus induction, shoot and root regeneration. When the shoot tip was sterilized in 2.0% of NaOCl for 20min., the contamination rate was the lowest. And the survival rate of the culture material was good in carbenicillin 500mg/L treatment group. Callus was obtained from shoot tip and young leaf segments. NAA 0.1-1.0mg/L and 2,4-D 0.1-0.5mg/L alone treatment were shown to have a good response on callus induction from shoot tip culture. In the case of young leaf culture, NAA and 2,4-D 0.1-0.5mg/L alone treatment were good in callus induction. In culturing shoot tip NAA 0.5mg/L and BA 0.5mg/L, NAA1.0mg/L and BA 0.lmg/L combination treatment was good in shoot regeneration. The regenerated shoots were rooted on MS medium supplemented with NAA and BA combination treatment. Especially, NAA 1.0mg/L and BA 0.1mg/L combination treatment was effective for root regeneration.
Cotyledonary petioles of Brassica napus cocultivated with Agrobacterium vectors for 72 h were transferred to MS medium with 0.5 mg/L NAA, 2.0 mg/L BA, 30 mg/L kanamycin, 100 mg/L cefotaxime, 30 g/L sucrose, 3 mg/L $\textrm{AgNO}_{3}$ and 2 g/L Gelrite. The cotyledonary petioles with green shoots were selected at a frequency of 17.5% in a selection medium and then rooted. Southern blot analysis confirmed the rolC and NPT IIgenes were incorporated into the regenerated plants. The stable inheritance of rolC gene was confirmed in progeny test of transgenic plants.
The effect of plant growth regulators and gelling agents for plant regeneration from leaf segment of Chrysanthemum zawadskii ssp. coreanum was investigated. NAA was more effective than BA for plant regeneration. MS medium supplemented with NAA 1 mg/L was the most effective in plant regeneration. The effect of agar and gelite as gelling agent was compared. Agar(0.8%) was more effective than gelite(0.2%) in plant regeneration. Regenerated shoots was successfully increased by shoot grafting in MS medium supplemented with NAA 0.1 mg/L in vitro, and hardened by shoot grafting in artificial soil mix(Peatmoss : Perlite = 1 : 1).
Bae, Dae-Ho;Park, Whoa-Shig;Hwang, Sung-Jin;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.17
no.3
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pp.192-197
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2009
Camptotheca acuminata, a native of South China is a well known natural source of monoterpene-indole alkaloid camptothecin(CPT), one of the most promising anti-tumoural compounds. This study was conducted to optimize plant growth regulators and culture conditions on plantlets regeneration through organogenesis from callus of Camptotheca acuminta. Callus were induced from various explants of in vitro germinated plantlets of C. acuminta using WPM medium containing 0.2 ㎎/L 2,4-D. Hypocotyl segments were exhibited higher embryogenic callus than the other explants. Shoot buds formation from embryogenic callus was affected by plant growth regulators, pre-treated dark condition and liquid culture. Organogenesis was optimal in WPM liquid medium containing 0.5 ㎎/L BA. The dark pre-treatment for 2 weeks before the solid culture was effective for organogenesis. The regenerated shoots were rooted in WPM medium with 0.2 ㎎/L NAA and successfully acclimated in green-house conditions.
Ginger is an important monocotyledonous plant belonging to the family Zingiberaceae. The objective of this study was to investigate the regeneration potential of ginger using leaf base explants. Auxins such as 2, 4-D and NAA in combination with BA were used for initiation of callus. Different combinations of both ammonium ($NH^{4+}$) and nitrate ($NO^{3-}$) were also studied for efficient callus production. High frequency of white friable calli was observed on modified Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2.0 mg/L 2, 4-D, 0.5 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. The highest shoot induction (92.33%), shootlets number ($7.33{\pm}0.33$) and length ($88.33{\pm}4.40$) mm were achieved on MS media containing 0.5 mg/L BA. Regenerated shoots were transferred to in vitro rooting media containing 1.0 mg/L IBA. Afterwards, plantlets with well-developed root and shoot system were subjected to a twostep hardening process. 71% of plantlets survived after secondary hardening without any abnormal morphology.
Kim, Mi Young;Cho, Kang Hee;Chun, Jae An;Park, Seo Jun;Kim, Se Hee;Lee, Han Chan
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.401-408
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2017
Herein, we report the meristem-tip culture from dormant buds of grape 'Kyoho' single-infected with Grapevine fleck virus (GFkV), which is phloem-limited and transmitted by graft inoculation. We produced GFkV-free shoots without thermo- or chemotherapy using meristem-tip explants approximately 0.3 mm (73 explants) and 0.8 mm long (five explants) including shoot apical meristem, 2-5 leaf primordia, and 1-4 uncommitted primordia from dormant buds of the infected woody cuttings (stored at $4^{\circ}C$). Explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3% sucrose, 3.0 mg/L benzyladenine (BA) and 0.1 mg/L indole-3-butyric acid (IBA). After 16 weeks of culture, shoot (10-mm long) regeneration frequency achieved from 0.3-mm explants was 4.1% and that obtained from 0.8-mm explants was 40.0%. Virus-free efficiency (expressed as the percentage of RT-PCR negative shoots regenerated) from 0.3- and 0.8-mm explants was 100% and 50%, respectively. Following in vitro multiplication, RT-PCR assays revealed identical results to assays of the first regenerated shoots. Our new methodological approach could be applied for eliminating other viruses in grapevines, as well as for producing virus-free plants in many other deciduous tree species, including fruit trees.
Kim, Youn Hee;Lee, Gee Young;Kim, Hye Hyeong;Lee, Jae Hong;Jung, Jae Hong;Lee, Sang Deok
Journal of Plant Biotechnology
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v.46
no.1
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pp.22-31
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2019
The objective of this study was to investigate the suitable parts for callus induction and optimal concentrations of growth regulators contained in the medium affecting shooting and rooting Echeveria laui and Echeveria elegans for in vitro mass production. To determine the suitable plant parts for callus induction, the leaves were divided into upper, medium and bottom parts and cultured on MS medium at different concentrations with $0{\sim}2mgL^{-1}\;NAA$ and $0{\sim}4 mgL^{-1}BA$. The upper and middle parts of leaves both showed 100% callus formation rate with $NAA\;1\;mgL^{-1}$ and $BA\;1\;mgL^{-1}$ treatment in E. laui. The middle parts of leaves showed 83.3% callus formation rate at $NAA\;2\;mgL^{-1}$ and BA 4 mgL-1 treatment in E. elegans. The shoot induction rate from callus was highest at $NAA\;0.1\;mgL^{-1}$ and $BA\;3\;mgL^{-1}$ treatment in E. laui and $NAA\;0.3\;mgL^{-1}$ in E. elegans. In addition, the number of shoots formation was 10.4 shoots high in $NAA\;1\;mgL^{-1}$ and $BA\;1\;mgL^{-1}$ treatment in E. laui and 12.0 shoots in most effective $NAA\;1\;mgL^{-1}$ and $BA\;0.1\;mgL^{-1}$ treatment in E. elegans. In the case of acclimatization of regenerated plant, growth characteristics did not show any significant difference (35 ~ 55%) shading with respect to the different ratio of substrate mixture, and it was determined that would be appropriate considered plant height and appearance preference of E. laui and E. elegans. It was established that the optimization of culture condition was responsible for the mass propagation in vitro cultures of E. laui and E. elegans.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.28
no.3
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pp.171-176
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2008
Efficient plant regeneration system of birdsfoot trefoil (Lotus corniculatus L.) was development. The factors affecting the somatic embryo formation, its proliferation and regeneration capacity of leaf and stem explants of Empire cultivar was investigated. The highest number of somatic embryos was obtained on B5 medium supplemented with 1 mg/L NAA and 1 mg/L BA. Depending on different explants, highest frequency of embryogenic callus and regeneration were observed in Empire with leaf explants. The response from stem explants was slower and callus induction was less than that from leaf explants. Regenerated shoots formed complete plantlets in on 1/2 MS medium supplemented with 1 mg/L IBA. Regenerated plants were morphologically uniform with normal shape and growth pattern.
In order to investigate the effects of developmental stage of embryos and plant growth regulators on mass production of Zantedeschia spp. Southern Light, immature zygotic embryos of Zantedeschia spp. Southern Light were cultured on Murashige and Skoog(1962) basal media or containing 2,4-D, NAA and BA. Globular embryos did not grow on any of the 2,4-D, NAA and BA combinations. The most suitable stage of immature zygotic embryo culture on the induction callus and multiple shoot was at early cotyledonary embryo stage, and at this stage of embryos were germinated up to 87.5%. The whitish watery callus and yellowish compact nodular callus produced on all 2,4-D, NAA and BA media. The best combination for inducing embryogenic callus was 0.5 mgL NAA and 1.0 mg/L BA. Whitish watery calli have been subcultured for more than 8 months and have retained their producing ability, Plant regeneration was only obtained by direct shoot development and yellowish compact nodular calli. Abundant plantlets were regenerated from cotyledonary stage of embryo culture on MS medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. Supplementation of the media with 10% coconut water showed as the best concentration for plant differentiation from direct developed of shoots. The number of regenerated plants from one embryo could be seperated 25-35s plantlets. All yellowish compact callus-derived plantlets were transferred to pots containing a mixture of vermiculite, perlite and sand(1:1;1 v/v) and 100% of divided plantlets were phenotypically normal.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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