반추동물의 급성 산독증의 예방 및 치료제 개발을 위해 100종의 브라질 식물 추출물을 이용하여 미생물 유래의 $\alpha$-amylase 및 $\alpha$-glucosidase 저해 활성을 평가하였다. 그 결과 Acacia jurema Mart., Anacardium humile A. St.-Hil., Cedrela odorata L., 및 Guazuma ulmifolia Lam 추출물에서 우수한 $\alpha$-amylase 및 $\alpha$-glucosidase 저해 활성을 확인하였으며, Plumeria drastica Mart.에서는 우수한 $\alpha$-amylase 특이적 저해활성을, Eugenia uniflora L.에서는 강력한 $\alpha$-glucosidase 특이적 저해 활성을 확인하였다. 6종의 추출물을 대상으로 $\alpha$-amylase에 대한 $IC_{50}$ 평가 결과, 현지에서 항당뇨제로 사용되는 A. humile A. St.-Hil., 추출물($IC_{50}$: $91.2{\mu}g/ml$)이 가장 강력한 저해를 나타내었으며, 항당뇨제로 이용되고 있는 acarbose ($IC_{50}$:$50.5{\mu}g/mL$)의 저해활성에 필적하였다. A. humile A. St.-Hil., 추출물은 $80^{\circ}C$, 또는 0.01N HCl 조건에서 60분간 처리에 활성의 변화가 나타나지 않았으며, 산 처리시에는 오히려 활성의 증가가 나타났다. 또한 A. humile A. St.-Hil., 추출물은 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않아 반추동물의 급성 산독증 및 인간 당뇨병 치료에도 이용 가능하리라 판단된다.
This study was carried out to evaluate whether antioxidant nutrient suppplementation with $\alpha$-tocopherol, vitamin C, $\beta$-carotene, and selenium reduces the lipid peroxide levels and increases the antioxidative enzyme activities in patients with coronary hart disease. Eighty nine patients participated in a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. The antioxidant group (45 patients) was given daily doses of $\alpha$-tocopherol (400 IU), vitamin C (50 mg), $\beta$-carotene (15 mg), and selenium (50 $\mu\textrm{g}$) and forty four patients received a placebo. Thirty eight subjects (84.4%) of the antioxidant group and thirty nine subjects (88.6%) of the placebo group completed the three-month supplementation. Serum levels of tocopherol, vitamin C and $\beta$-carotene significantly increased in the antioxidant group compared with the baseline (p<0.05). Thiobarbituric acid-reactive substances(TBARS) decreased significantly (0.6 nmol MDA/mL) in the antioxidant group compared with that (0.09 nmol MDA/mL) in the placebo group (p=0.03). However, antioxidant supplementation did not affect the level of oxidized-LDL measured as autoantibodies against oxidized-LDL. The superoxide dimutase activity in red blood cells increased in the antioxidant group compared with the baseline (p<0.05). However, glutathione peroxidase activities did not change after supplementation in both groups, and catalase activity significantly decreased in the placebo group (p<0.05). These results suggest that antioxidant supplementation for 3 months with $\alpha$-tocopherol, vitamin C, $\beta$-carotene and selenium in patients with coronary heat disease may be partially protective against oxidative stress.
In order to search for anti-influenza virus type A agents from Korean medicinal herbs, we selected 100 medicinal herbs, based on a review of the Korean traditional medicine books. Four of 100 Korean medicinal herbs, MM-40, MM-55, MM-63, MM-110, exhibited very strong anti-influenza virus activity. The fractions of four medicinal herbs, which had very strong anti-influenza virus activity, were tested for antiviral activity by means of Haemagglutination inhibition test(HTT), 40% MeOH fraction of MM-40, $H_2O$ fraction of MM-55, 20% fraction of MM-63 3nd $H_2O$ fraction of MM-110 had strong anti-influenza virus activity at the range of $78{\mu}g/ml$ to $156{\mu}g/ml$, 1.56mg/ml to 100mg/ml, 6.25mg/ml to 50mg/ml and $48.7{\mu}g/ml$ to $780{\mu}g/ml$, respectively. These results of HIT indicated that fractions of Korean medicinal herbs might inhibit either attachment of virus to cell surface receptor or penetration of virus into cell during the initial stage of infection. In the cytotoxicity of fractions against red blood cells, 40% MeOH fraction of MM-40, 20% fraction of MM-63 and $H_2O$ fraction of MM-110 showed cytotoxicity at the range of $78{\mu}g/ml$ to 10mg/ml, 50mg/ml to 100mg/ml and $195{\mu}g/ml$ to 100mg/ml, respectively, whereas $H_2O$ fraction of MM-55 did not show cytotoxicity. In order to establish influenza virus adapted animal model, influenza virus type A were passaged 3 and 4 times successively in Balb/c mouse. As a result, we had 4 HA unit titers on the 5 days of 3rd passages and 7 days of 4th passages after infection, respectively.
Streptococcus pneumoniae는 pneumolysin과 같은 병원성 인자를 가지고 있으며, 지역사회에서 전파되는 심각한 병원성균에 포함된다. Pneumolysin (PLY)은 콜레스테롤 의존적으로 세포막에 구멍을 형성하는 세포독소로서 백신의 주요한 표적 항원이다. PLY의 연구를 위하여 Streptococcus pneumoniae D39 균주에서 추출한 genomic DNA를 주형으로 하여 PCR을 시행하였다. 합성된 PLY 유전자 DNA를 pQE-30 vector에 삽입하고, E. coli M15에 형질전환 시킨 후 LB 배지에 IPTG를 첨가하여 PLY 단백질을 생산하였다. 재조합 단백질은 $Ni^{2+}$-agarose column을 사용하여 정제하였다. 또한, EGFP를 PLY C-말단에 부착한 융합단백질도 동일한 방법으로 클로닝하여 재조합 단백질을 생산하였다. 500 ng/ml 농도의 재조합 PLY는 1.0% 적혈구 현탁액을 100% 용혈시켰으며, 240 ng/ml 농도는 50% 용혈을 나타내었다. 그러나 재조합 PLY-EGFP는 용혈 활성이 전혀 나타나지 않았으나 형광현미경으로 관찰하였을 때 적혈구 막에 결합되어 있었다. 즉, EGFP의 PLY C-말단 부착은 PLY의 세포막 결합능은 유지시켰으나 용혈기능은 방해하였다. PLY C-말단은 용혈기능에 아주 중요한 영역이며, 세포막 결합은 PLY의 다른 영역이 보다 중요하게 작용할 것으로 추측된다. 따라서, 육안으로 관찰이 가능한 결합능은 가졌으나 용혈 기능이 결여된 PLY-EGFP를 대조군으로 활용함으로써 두 재조합 단백질은 폐렴 유발에 있어서 PLY 작용 연구에 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
Objective : This experimental study was designed to determine the effects of BPT on obesity in vivo and in vitro. Methods : in vitro, BPTn extracts of various concentration(50, 100, 200 ${\mu}g/m{\ell}$) were added in 3T3-L1 cell. Adipocyte differentiation was measured by Oil Red O staining and Morphological examination. The expression of $C/EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$ receptor was measured by western blot assay and RT-PCR in vivo, Rats were orally administered BPT daily for consecutive four weeks before poloxamer-407 induced hyperlipidemic state. The rats were sacrificed 24 hrs later for poloxamer-407 treated and then serum triglyceride, total cholesterol were measured ; Rats were orally administered BPT daily for consecutive four weeks before triton WR-1339 induced hyperlipidemic state. The rats were sacrificed 40 hrs later for triton WR-1339 treated and then serum triglyceride, total cholesterol were measured ; Rats with obesity were induced by the high fat-diet for six weeks and then serum triglyceride, total cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, HDL-cholesterol, hydroxy radical, superoxide dismuatse activity were measured. Results : In vitro, The 3T3-L1 cells' differentiation was significantly decreased by BPT. The expression of $C/EBP{\alpha}$ and $C/EBP{\beta}$ was decreased by BPT. In vivo, BPT significantly reduced serum triglyceride, total cholesterol contents in poloxamer-407 treated rat. BPT significantly reduced serum triglyceride contents in Triton WR-1339 treated rat. Total cholesterol also reduced but did not show a significant change. BPT significantly reduced body weight gain of rat and adipose tissue mass of rats and serum triglyceride, LDL-cholesterol contents and significantly increased HDL-cholesterol, HTR(HDL-cholesterol/Total-cholesterol) in rats with obesity induced by the high fat-diet. BPT reduced blood lipid peroxide, hydroxy radical and increased superoxide dismuatse(SOD) activity.
Patra, B.N.;Bais, R.K.S.;Sharma, D.;Singh, B.P.;Prasad, R.B.;Bhushan, B.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권4호
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pp.560-563
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2004
The study was undertaken to evaluate the effect of naked neck gene on mortality, cell mediated and humoral immune response in white plumage broiler population. The mortality of homozygous naked neck (Na/Na) broilers (11.71%) was comparatively lower than that of heterozygous naked neck (Na/na) (12.28%) and normally feathered (na/na) (13.59%) broilers. The humoral immune response was measured against (1% v/v) sheep red blood cells (SRBC) for total haemagglutinin (HA) antibody, 2-mercaptoethanol resistance (MER) or (IgG) antibody and 2-mercaptoethanol sensitive (MES) or (IgM) antibody titre on 7 days post-immunization. The titre was expressed as log2 of the highest dilution which shows complete haemagglutination. Total HA titers of Na/Na and Na/na (11.05$\pm$0.53 and 11.09$\pm$0.38) were comparatively higher than that of na/na (10.26$\pm$0.42). The MES antibody titre of Na/Na (8.50$\pm$0.53) and Na/na (7.63$\pm$0.45) broilers were significantly higher as compared to na/na (6.11$\pm$0.32) broilers. The MER titre of na/na genetic group (4.15$\pm$0.42) was significantly higher than Na/Na (2.55$\pm$0.37) and comparatively higher than Na/na (3.45$\pm$0.38) broilers. In vivo cell response to phytohaemagglutinin-P (PHA-P), measured as Foot Index (FI) in mm expressed significantly higher response in Na/na (0.473$\pm$0.05) and Na/Na (0.413$\pm$0.04) broilers as compared to na/na (0.304$\pm$0.03) broilers. The result of present study suggested that white plumage naked neck broilers had better immune response as compared to normally feathered broilers.
The nested polymerase chain reaction (PCR) assay was used to determine the sequences of reverse transcriptase (RT) codons 41, 67, 70, 210, 215 and 219 of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) pol gene. Template DNA was obtained from uncultured peripheral blood mononuclear cells from 27 Korean HIV-1 infected patients treated with ZDV and Korean red ginseng. The second PCRs were done for 2 separated regions (RT codons $13{\sim}98$ and $152{\sim}259$) with $5\;{\mu}l$ of the first PCR productNucleotide sequences were determined by direct sequencing. In the 27 patients, CD4+ cell count decreased from $230{\pm}117/{\mu}l$ to $152{\pm}162/{\mu}l$ for $46{\pm}26$ months (Mo), and actual duration of ZDV intake was $72{\pm}16$ Mo. In the 16 patients who had been treated with ZDV therapy ${\ge}25$ Mo, the incidences of 70R, 215F/Y, and 41L were 61%, 28% and 22%, respectively and those of 67N, 210W and 219Q were 17%. The incidences of 215F/Y were 6.7% for group ${\le}12$ Mo treatment, 22.7% for group with 13 to 24 Mo, and 27.8% for group ${\ge}25$ Mo. There was no mutation in 9 patients. It might be associated with the interruption of ZDV therapy for more than 6 months in 6 patients. This study shows that the detection of mutation could be useful prognostic marker with other clinical and virological data, and very low mutation rate is dectected compared to overseas reports.
Plasmodium falciparum can invade all stages of red blood cells, while Plasmodium vivax can invade only reticulocytes. Although many P. vivax proteins have been discovered, their functions are largely unknown. Among them, P. vivax reticulocyte binding proteins (PvRBP1 and PvRBP2) recognize and bind to reticulocytes. Both proteins possess a C-terminal hydrophobic transmembrane domain, which drives adhesion to reticulocytes. PvRBP1 and PvRBP2 are large (>326 kDa), which hinders identification of the functional domains. In this study, the complete genome information of the P. vivax RBP family was thoroughly analyzed using a prediction server with bioinformatics data to predict B-cell epitope domains. Eleven pvrbp family genes that included 2 pseudogenes and 9 full or partial length genes were selected and used to express recombinant proteins in a wheat germ cell-free system. The expressed proteins were used to evaluate the humoral immune response with vivax malaria patients and healthy individual serum samples by protein microarray. The recombinant fragments of 9 PvRBP proteins were successfully expressed; the soluble proteins ranged in molecular weight from 16 to 34 kDa. Evaluation of the humoral immune response to each recombinant PvRBP protein indicated a high antigenicity, with 38-88% sensitivity and 100% specificity. Of them, N-terminal parts of PvRBP2c (PVX_090325-1) and PvRBP2 like partial A (PVX_090330-1) elicited high antigenicity. In addition, the PvRBP2-like homologue B (PVX_116930) fragment was newly identified as high antigenicity and may be exploited as a potential antigenic candidate among the PvRBP family. The functional activity of the PvRBP family on merozoite invasion remains unknown.
블랙커런트는 장미목 범의귀과의 낙엽관목으로, 즙이 많은 검은 열매와 잎을 주스, 잼, 젤리, 시럽 등으로 가공하여 식용하고 있다. 본 연구에서는 블랙커런트(오스트리아산)의 착즙액과 이의 순차적 유기용매 분획물인 hexane 분획물, ethylacetate (EA) 분획물, butanol 분획물 및 물 잔류물을 조제하여 각각의 성분 분석, 항산화 활성, 혈전 생성과 관련된 항응고 활성 및 혈소판 응집저해 활성을 평가하였다. 그 결과, 착즙액과 폴리페놀 및 플라보노이드 고함유 분획인 EA 분획물에서 강력한 DPPH 음이온, ABTS 양이온, nitrite 소거능과 환원력을 확인하였다. EA 분획의 $RC_{50}$ (활성 radical을 50% 제거하는 데 소요되는 시료의 양)는 각각 136.3, 66.2 및 $115.5{\mu}g/ml$ 값을 나타내어 vitamin C가 나타내는 $RC_{50}$의 각각 1/10, 1/16 및 1/7.7에 해당하는 항산화력을 나타내었다. 또한 착즙액과 이의 EA 분획물, butanol 분획물은 아스피린에 필적하는 강력한 항응고 활성을 나타내었으며, 특히 EA 분획물과 butanol 분획물은 아스피린보다 우수한 혈소판 응집억제활성을 나타내었다. 혈소판 응집을 50% 저해할 수 있는 아스피린 농도는 0.395 mg/ml인 반면, EA 분획 및 butanol 분획은 각각 0.192 및 0.261 mg/ml로 나타났다. 상기의 활성 분획물은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않았다. 이러한 결과는 블랙커런트의 강력한 항산화, 항응고, 혈소판 응집저해 활성을 이용한 신규의 항혈전제 개발 및 이용이 가능함을 제시하고 있다. 본 연구는 블랙커런트의 항혈전 활성에 대한 최초의 보고이다.
수은이 마우스의 세포성 및 체액성 면역반응에 미치는 영향을 밝히고자 실험을 통해 얻은 결과를 다음과 같이 요약하는 바이다. $10^{-2}mM$이상의 농도에서 수은은 시험관내의 마우스 비장세포에 대한 명백한 독성 작용(toxic effect)을 나타냈다. 수은에 의한 마우스 생존을(survival rate)은 0.8mg(per 100g body weight) 이하의 농도에서는 100%생존율을 나타냈으며, 0.9mg 이상의 농도에서는 5일 이내에 100% 치사율을 나타냈다. Subtoxic 농도의 수은 투여에 따른 Arthus 및 DTH반응의 결과는 $Arthus(T_3)$반응에 있어서 수은 투여군과 대조군 사이에 유의한 차이가 나타나지 않았던 반면, $T_{24},\;T_{48}$의 DTH반응은 수은 투여군이 대조군에 비하여 억제되었다. 수은 투여 마우스의 면양적혈구(SRBC)에 대한 항체반응을 측정한 결과 면양적혈구에 대한 총응집소가는 수은 투여 농도에 의존적으로 대조군의 값에 비해 억제되었다. 시험관 내에서 마이토젠에 대한 비장세포의 증식 반응은 수은 농도에 의존적으로 억제되었다. 수은 투여군의 IgE 생산은 농도 증가에 따라 $1.7\sim2.0$배의 수준으로 증가하였으며, $IgG_1$의 경우도 증가의 경향을 보였으나 대조군에 비해 큰 차는 아니었다. 이상의 결과를 살펴볼 때 수은 중독시 출현할 수 있는 면역반응의 변화로서, 초기에는 세포성 면역반응의 감소가 현저할 것으로 사료되나 중독이 진행됨에 따라 Ig농도의 상승을 제외한 체액성 면역반응의 전반적인 감소가 수반될 것으로 예측된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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