Mandibular first molars of the rats were undertaken to observe the radiosensitivity of amelogenesis. Twenty four Sprague-Dawley rats received 396cGy radiation with the MK Cell irradiator using Cs-137, and twenty four rats served as control. They were devided into two groups; Group 1 which received radiation at the 14th day after gestation and group 2 which received radiation at the 19th day after gestation. Light Microscopy and Transmitted Electron Microscopy investigation was undertaken in the group 1 at the 15th, 18th, 20th, 22nd(2 days after birth), and 25th day(5 days after birth) after gestation, and in the group 2 at the 21th(birth day), 22nd(2 days after birth), and 25th(5 days after birth) day after gestation. The following histopathologic findings were obtained. 1. Compared with control group, experimental group showed a delayed formation of enamel and dentin due to slow rate of differentiation of undifferentiated mesenchymal cells. 2. In the experimental groups, the arrangement of the inner enamel epithelium was irregular and there were many vacuoles in the cytoplasm. There were dilated rER and mitochondria, increase of the intercellular space, and loss of the cellular polarity. 3. In the group 1, early enamel without Tomes' process, and early organic matrix was observed at the 25th day after gestation. 4. In the group 2, histopathologic changes were similar to those of the group 1, but the degree of changes was more severe than that of the group 1.
Chae, Yong Kwon;Shin, Seo Young;Kang, Sang Wook;Choi, Sung Chul;Nam, Ok Hyung
Journal of Periodontal and Implant Science
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제52권2호
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pp.127-140
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2022
Purpose: In dental avulsion, delayed replantation usually has an uncertain prognosis. After tooth replantation, complex inflammatory responses promote a return to periodontal tissue homeostasis. Various types of cytokines are produced in the inflammatory microenvironment, and these cytokines determine the periodontal tissue response. This study aimed to identify the gene expression profiles of replanted teeth and evaluate the functional differences between immediate and delayed replantation. Methods: Maxillary molars from Sprague-Dawley rats were extracted, exposed to a dry environment, and then replanted. The animals were divided into 2 groups according to the extra-oral time: immediate replantation (dry for 5 minutes) and delayed replantation (dry for 60 minutes). Either 3 or 7 days after replantation, the animals were sacrificed. Periodontal soft tissues were harvested for mRNA sequencing. Hallmark gene set enrichment analysis was performed to predict the function of gene-gene interactions. The normalized enrichment score (NES) was calculated to determine functional differences. Results: The hallmark gene sets enriched in delayed replantation at 3 days were oxidative phosphorylation (NES=2.82, Q<0.001) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) signaling via the nuclear factor kappa light chain enhancer of activated B cells (NF-κB) pathway (NES=1.52, Q=0.034). At 7 days after delayed replantation, TNF-α signaling via the NF-κB pathway (NES=-1.82, Q=0.002), angiogenesis (NES=-1.66, Q=0.01), and the transforming growth factor-beta signaling pathway (NES=-1.46, Q=0.051) were negatively highlighted. Conclusions: Differentially expressed gene profiles were significantly different between immediate and delayed replantation. TNF-α signaling via the NF-κB pathway was marked during the healing process. However, the enrichment score of this pathway changed in a time-dependent manner between immediate and delayed replantation.
Purpose: Although it is generally accepted that patients with controlled diabetes have similar rates of success for dental implants as healthy individuals, the use of dental implants in diabetic patients is controversial. In addition, the impact of diabetes on the healing of bone associated with immediately place dental implants is not completely understood. The purpose of this study was to measure bone response to implants radiologically in uncontrolled and insulin-controlled diabetic rats. Materials and Methods: Twenty rats were divided into control, insulin-treated and diabetic groups. The rats received streptozotocin (60 mg/kg) to induce diabetes; animals in the insulin-treated group also received three units of subcutaneous slow-release insulin. Two titanium implants ($1.2{\times}3$ mm) were placed in the extraction socket of the maxillary first molars of the animals and were harvested at 3 days, 1, 2 and 4 weeks. The bone density was measured by digital radiography using gray-level analysis (histogram) in the regions of interest (ROI) at four points: two mesial and two distal to both sides of the implant. Results: The results showed that the osseointegration of the implants was impaired in the diabetic rats compared to the control and the insulin-treated rats. The radiographic evidence demonstrated marked destruction of bone around the implants in the diabetic group. Both the control and the insulin-treated groups had a significantly higher bone density on radiograph than the diabetic group from the 1 week of the experiment (P<0.05 for each comparison). Conclusion: The present study revealed that the immediate placement of titanium implants in the maxilla of diabetic rat lead to delay in the maturation of bone adjacent to implants. It is expected that the reduced predictability of success of immediate implantation in patient with the uncontrolled diabetes.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제38권4호
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pp.204-211
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2012
Objectives: Dental implants installation in patients with diabetes remains controversial as altered bone healing around implants has been reported. And little is known about the biological factors involved in bone healing around implants. The present study aimed to investigate the biological markers around immediately placed implants in rats with controlled and uncontrolled diabetes. Materials and Methods: Twenty rats (40 sites) were divided into the control, insulin-treated and diabetic groups. The rats received streptozotocin (60 mg/kg) to induce diabetes; animals in the insulin-treated group also received three units of subcutaneous slow-release insulin. Two threaded titanium alloy implant ($1.2{\times}3mm$) were placed in the extraction socket of the both maxillary first molars and allowed for healing. Bone blocks including implant were harvested at 3 days, 1, 2 and 4 weeks. The levels of bone morphogenetic protein (BMP)-4, transforming growth factor (TGF)-${\beta}1$, osteocalcin (OC) and osteonectin (ON) were measured in the peri-implant osseous samples by RT-PCR. Results: The BMP-4 level increased immediately in all groups by day 3, then decreased abruptly in the control and the insulin-treated groups. However, by week 4, all groups showed mostly the same amount of BMP-4 expression. The level of TGF-${\beta}1$ also instantly increased by day 3 in the insulin-treated group. This level elevated again reaching the same values as the control group by week 4, but was not as high as the diabetic group. In addition, the expression of OC and ON in the control and insulin-treated groups was higher than that of the diabetic group at 2 weeks and 4 weeks, indicating active bone formation in these groups. Conclusion: The immediate placement of titanium implants in the maxilla of diabetic rat led to an unwanted bone healing response. Conclusively, the results of this study suggest that immediate implant insertion in patients with poorly controlled diabetes might be contraindicated.
본 연구는 Er:YAG laser에 의한 치수의 초기 조직반응과 calcitonin gene-related peptide (CGRP) 함유 신경섬유의 발현을 비교 평가하고자 시행하였다. Er:YAG laser와 conventional bur를 이용하여 상악 제1대구치의 교합면에 와동을 형성하였다. 와동형성 후 48시간 후에 조직을 처리하여 hematoxylin-eosin 염색과 CGRP 면역조직화학을 시행한 후 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Conventional bur를 이용하여 삭제한 경우, 상아질 바닥면은 균열이 없는 평면의 균일한 모양을 보였으며, Er:YAG laser의 경우에는 상아질의 면은 bur에 비해서 파동형의 불규칙적인 형태와 바닥면에서 상아세관의 주행방향을 따라 미세한 균열을 보였다. 2. Er:YAG laser에 의해 손상 받은 치수에서는 혈관확장과 노출된 치수의 손상부위를 따라 bur에서 손상 받은 치수보다 더 많은 염증세포의 침윤과 상아모세포층의 파괴를 보였다. 3. 노출손상 후에 치수신경 말단에서 CGRP 발현은 bur와 laser군 모두에서 손상을 받지 않은 정상 치수에 비해서 증가된 양상을 보였으며, 그 증가된 정도는 laser의 경우에서 더 강하였다. 위의 결과들을 종합하면, Er:YAG laser가 치수손상을 최소화하여 적용되면 치아우식 제거와 와동형성과 같은 여러 수복치료 시 유용하게 사용될 수 있으리라 사료된다.
난소 절제술을 시행한 백서에서 에스트로겐 호르몬의 결핍으로 인한 상아-치수 복합체의 변화를 관찰하였다. 30 마리의 암놈 Sprague-Dawley rats을 두 군으로 나누어 1 군은 Sham-surgery를 시행하였고, 2 군은 양측 난소 절제술을 시행하였다. 백서는 12주 뒤에 모두 희생시켜, 하악 치아와 인접한 치주조직을 포함하여 절제하였고, $10\%$ 중성 포르말린 용액에 고정하였다. 두 군의 차이점을 비교하기 위하여 방사선 사진을 촬영하고, osteonectin을 이용한 면역 화학 염색법을 시행하였다. 조직 형태학적 차이점을 측정하기 위하여 영상 분석 프로그램을 사용하였고, 분석 방법으로는 Paired t-test를 사용하였다 (p < 0.05). Osteonectin을 이용한 면역 화학 염색 결과, 두 군간에는 유의성 있는 차이점이 존재하였다. 난소 절제술을 시행한 백서군에서는 전상아질층의 두께가 현저히 증가하였고, Sham-surgery 군에서는 전상아질 층과 치수 조직에서 osteonectin이 좀 더 특이적으로 염색되어 나타났다. 이러한 결과로 결론지어보면, 백서에서 인위적으로 난소 절제술을 시행하였을 때 광화되지 않은 전상아질층의 두께가 증가하고, 치수 조직과 전상아질층내의 osteonectin 함량이 감소되며, 결국 에스트로겐 결핍은 조상아 세포의 기전을 변화시킨다고 할 수 있다.
The purpose of this study was to investigate effects of osteoporosis on extraction wound healing in the calcium deficient rat. In order to carry out this study, ten-week old Wistar strain rats weighing about 300 gms were selected. When the rats reached thirteen-week old, rats' mandibular first molars were removed. The rats were then divided into three groups: Group l(rats given a normal diet both before and after tooth extraction), Group 2(rats given a low calcium diet for three weeks before tooth extraction and a normal diet after tooth extraction), and Group 3(rats given a low calcium diet for three weeks before and after tooth extraction). The healing of extraction wounds, as assessed by microradiography, autoradiography, and histopathologic examination, were compared among these three groups. The obtained results were as follows : I. In Group 1, newly formed bone and active uptake of 45Ca around extraction wound were noted on the 3rd and the 7th day. On the 14th and the 21st day, the extraction wounds of this group showed the bone trabecular formation and active 4Ca uptake in the extraction wound and alveolar crest. The more prominent bone trabeculae with a less uptake of /sup 45/Ca were noted on the 42nd day. 2. In Group 2, newly formed bone and thinning of alveolar bone trabeculae with more extensive uptake of /sup 45/Ca than that in Group 1 were noted on the 3rd and the 7th day. On the 14th day, bone trabeculae were less thicker than that in Group 1. The prominent bone trabeculae in the extraction wounds and alveolar crest were noted on the 21st and the 42nd days. 3. In Group 3, newly formed bone was noted on the 3rd and the 7th day. Alveolar bone trabeculae and uptake of /sup 45/Ca were similar to that in Group 2. On the 14th and 21st day, bone trabeculae were less thicker than that in Group 2 and Group 3. The osteoporotic change with active uptake of /sup 45/Ca was markedly noted on the 42nd day.
당뇨병 흰쥐를 대상으로 치조골의 교체(turnover)와 치아 이동 중 치조골의 흡수와 형성의 활성을 비교 관찰하기 위하여 8주령의 웅성 Sprague-Dawley계 흰쥐를 정상대조군(N), 당뇨군(D), 정상-치아이동군(N-tm), 당뇨-치아이동군(D-tm)으로 나누고, 각 실험군은 치아이동 실험 1일, 3일, 7일, 14일의 소군으로 나누었다. 당뇨병은 치아이동 실험 18일전에 스트렙토조토신(50mg/체중 kg)을 꼬리정맥에 단 회 주사하여 유발하였다. 치아이동은 상악 제1대구치를 초기 교정력 40그램으로 근심 이동시켰다. 상악 제1대구치 주위 치조골을 대상으로 골형성 징후표지로서 치조골 alkaline phosphatase(ALP)와 osteocalcin(OC)을, 골흡수 징후표지로서 acid phosphatase (ACP)와 tartrate-resistant acid phophatase(TRAP)을 정량 분석하였으며, D군과 N군에서는 이들의 혈중 농도를 정량 분석하였다. 1. D군의 혈청 TRAP농도와 혈청 OC농도는 모든 실험 경과군에서 N군보다 감소하였고(p<0.05), 당뇨기간이 길어질수록 더 많이 감소한 것으로 나타났다. 또한 치조골 흡수 징후표지는 감소하는 경향이었으며 골형성 징후표지도 실험기간이 경과함에 따라 더 많이 감소하는 것으로 나타났다. 2. N-tm군의 치조골 ACP농토와 TRAP농도는 N군과 비교하여 1일과 3일군에서 가장 높았으며(p<0.01), 그 이후 감소경향을 나타냈고, 치조골 OC함량은 3일, 7일 14일군에서 N 군보다 높았다(p<0.001). 그러나 D-tm군에서 치조골 ACP와 TRAP농도는 정상 N군에 비하여 1일에는 낮으나 7일, 14일 경과군에서 가장 높았고(p<0.001), 실험 경과에 따라 계속 증가 하였으며(p<0.001), 치조골 ALP와 OC 함량은 3일 경과 후부터 증가하지만 정상 N군과 유의차가 없었다. 3. 당뇨-치아이동군의 치아이동량은 정상-치아이동군보다 많은 것으로 나타났다. 이러한 실험 결과는 당뇨병의 전신 골격과 치조골은 골 흡수 활성이 억제되어 있으며 골형성 활성은 당뇨 지속시간이 길어질수록 더 많이 억제되는 느린 골교체를 하며, 교정력에 의한 치조골 흡수활성이 처음 높아지는 시기는 정상치아이동시보다 늦고 더 오랬 동안 지속되며 치조골 형성활성은 낮고, 치아 이동량은 증가하며 이동중 치아동요도가 증가함을 시사한다.
본 연구의 목적은 흰쥐 상악 대구치를 발거 한 후 급속 냉동보존을 통해 치아를 보관하였을 때 in vivo MTT 검색법을 이용하여 치주인대세포의 활성도를 측정하고자 하였다. 실험 방법은 74마리 4주령의 암컷 Sprague-Dawley계의 흰쥐를 사용하여 각군당 10마리의 쥐에서 상악 좌우 제1, 2 대구치를 발거하여 모두 40개의 치아를 사용하였다. 대조군은 즉시 발치군이며 냉동군은 F medium에 5% Dimethylsulfoxide (DMSO) 6% Hydroxyethyl starch (HES)를 포함한 군(1군), 10% DMSO를 포함한 군(2군) 그리고 $Viaspan^(R)$에 5% DMSO 6% HES(3군), 10% DMSO를 포함한 군 (4군)으로 나누어 1주일간 액체질소에 냉동한 뒤 해동하였다. 냉장군은 F medium (5군)와 $Viaspan^(R)$ (6군)에 넣어 1주간 $4^{\circ}C$ 냉장고에서 보관하였다. 냉동 및 냉장보존한 후에는 in vivo MTT검색법을 시행하였다. 개개 치아의 치근면 단위면적으로 표준화하기 위해 치근을 1% eosin Y 용액에 12시간 담근 후 1% acid alcohol로 용해시켜 530 nm에서 측정한 흡광도 값을 in vivo MTT 측정값으로 나누었다. 통계 분석을 위해 Two way ANOVA와 Duncan's Multiple Range Test를 95% 신뢰 구간에서 시행하였다. 그리고 각 군당 2개의 치아를 같은 방법으로 처리한 후 $10{\mu}m$ 두께로 냉동 절단하여 광학 현미경과 편광 현미경하에서 관찰하였다. 1, 2군은 3, 4군보다. 높은 흡광도를 나타내었으며 6군은 5군보다. 높은 흡광도를 나타내었다(p<0.05). 광학 현미경 관찰에서 MTT 결정은 파란색을, 편광현미경에서는 밝은 오렌지색을 나타내었고 전체적으로 in vivo MTT검색법의 결과와 같은 양상을 나타내었다. 본 연구의 결과 5%, 10% DMSO를 사용한 F medium 배지로 냉동보존한 경우가 $Viaspan^(R)$을 배지로 냉동하였을 때나 냉장보존 하였을 때보다 통계적으로 유의차 있게 높은 세포 활성도를 나타내었다(p<0.05).
본 연구의 목적은 MTT 검색법을 이용하여 흰쥐 상악 대구치를 발거한 후 실온의 건조 상태에서의 시간 변화에 따른 쥐 치아 치근면의 치주인대 세포 활성도를 측정함과 동시에 냉동 절단법을 이용한 조직학적인 관찰 결과를 토대로 하여 MTT 검색법이 유용한지를 검증하고자 하였다. 생후 4주된 암컷 Sprague-Dawley계 흰쥐 80마리를 이용하여 ${\beta}$-APN 전처치 후 상악 제 1 & 2대구치를 모두 발거하였다. 이들 치아를 즉시 혹은 10, 20, 40, 60분 동안 실온에서 건조시킨 후 치아 자체를 MTT용액에 저장한 다음 흡광도 측정을 이용한 정량적 분석과 동시에 냉동 절단법을 이용하여 조직을 관찰하였다. MTT 검색에 의한 흡광도 값에 있어 즉시 처치군과 10분 건조군 사이에는 통계학적인 유의차가 없었다 (p > 0.05). 그러나, 즉시 처치군 및 10분 건조군은 20분과 40분 및 60분 건조군과 비교시 통계학적인 유의차를 보였다 (p <0.05). 또한, 20분 건조군도 40분 및 60분 건조군과의 군간 비교에서 각각 통계학적인 유의차를 보였다 (p<0.05). 그러나, 40분 건조군과 60분 건조군 사이에는 통계학적인 유의차를 보이지 않았다. 조직학적 관찰에서 시간경과에 따라 crystal의 모양과 분포 및 수에서 확연히 구별되는 특징적인 양상을 보여주었다. 즉시 및 10분 건조 군에서는 가시모양의 crystal이 전치주인대 부위 조직과 치수 내에 밀도 높게 골고루 폭넓게 퍼져 있었으나 20분 이상 건조 군에서부터는 치주인대와 치수 부위 조직 모두에서 crystal 결정체 수가 급격히 감소하는 양상을 보였다. 이번 실험의 결과를 종합적으로 분석해보면 MTT 흡광도 측정값과 냉동 절단법을 이용한 시편의 MTT 염색 관찰 소견 결과를 서로 비교했을 때 상당히 밀접한 상관 관계가 있음을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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