• 제목/요약/키워드: random amplified polymorphic DNA pattern

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Isozyme Polymorphism 및 Random Amplified Polymorphic DNA(RAPD) Pattern에 의한 표고 버섯 품종간 비교 (Differentiation of Lentinus edodes Isolates in Korea by Isozyme Polymorphisms and Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Analysis)

  • 박원목;고한규;박노조;홍기성;김규현
    • 한국균학회지
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    • 제25권3호통권82호
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    • pp.176-190
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    • 1997
  • Isozyme PAGE에 의한 isozyme polymorphism 및 random amplified polymorphic DNA(RAPD) pattern의 비교를 통하여 한국에서 수집된 63개의 표고 버섯(Lentinus edodes)품종의 유연관계를 조사하여 보았다. NTSYS PC program을 통하여 비교에 사용되어진 3가지 isozyme 즉 esterase, peroxidase, acid phophatase 등은 각각 10, 7, 3개의 isozyme polymorphism type으로 나뉘어질 수 있었고, 이러한 3개의 isozyme type들은 group-average method를 이용하여 최종적으로 6개의 집단으로 구분되어질 수 있었다. 또한 RAPD를 통한 표고 품종간 유연관계 비교는 사용되어진 총 20개의 random primer 들중 3개의 primer(OPA 03, OPA 18, OPA 19)가 품종간 polymorphism을 보였고 사용되어진 전체 random primer의 PCR product들의 집단 분석을 통해 최종적으로 5개의 집단으로 구분할 수 있었다. 사용되어진 두 가지 방법 즉, isozyme polymorphism및 RAPD pattern에 의해 구분되어진 63개 표고 버섯 품종의 subgroup level에서의 절대적인 유사성은 관찰할 수 없었다. Yii-Mattila(1996) 등에 의하면 품종간 비교시 isozyme analyses에서와는 달리 RAPD analyses에서는 많은 수의 strain-specific band들이 얻어질 수 있고 이것이 두 방법간의 유사성을 관찰하지 못하게 하는 원인이라고 보고하였다.

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Listeria spp.의 RAPD typing을 위한 Primer의 분리력 비교 (Primers for typing Listeria spp. using Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) ANalysis)

  • 임형근;홍종해;박경진;최원상
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권2호
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    • pp.67-72
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    • 2003
  • RAPD 분석은 한 개의 primer를 이용하여 임의의 DNA 조각을 증폭하는 것이다. 이때 만들어지는 여러 형태의 DNA pattern을 이용하여 리스테리아 모노사이토제네스를 분류할 수 있다. 리스테리아균들을 효과적으로 RAPD typing 할 수 있는 primer들을 엄선하기 위하여 리스테리아 표준균주 13종을 대상으로 총 31가지 primer들의 RAPD 분리력을 비교하여 보았다. 결과는 재현성이 높았으며 이중 6가지 primer(primer 6, HLWL74, UBC155, UBC127, Lis5, Lis11)가 discrimination index, band의 숫자, band scoring의 난이도 등을 고려해 볼 때 나머지 primer 들에 비해 우수한 분리력을 보였다. 이들 primer들은 장차 리스테리아의 RAPD typing에 이용될 수 있을 것으로 보이며, 현재는 이들을 이용하여 돈육공장의 오염원 규명을 위한 연구를 수행 중이다.

RAPD marker를 이용한 참돔 집단의 유전적 특성 분석

  • 장요순;노충환;홍경표;명정구;김종만
    • 한국양식학회:학술대회논문집
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    • 한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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    • pp.34-34
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    • 2003
  • 한국산 선발계통 및 일본산 양식계통과 이들 두 계통간 잡종 참돔 집단의 유전적 특성을 분석하기 위하여, RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) marker를 탐색하였다. 10개의 염기로 이루어진 200개의 random primer 분석을 통하여 polymorphic pattern을 나타내는 23개의 random primer를 선발하였으며, 각 primer의 재현성을 확인하였다. 이들 중 OPA-11 primer는 크기가 각각 600 bp, 650 bp 및 750 bp 인 3개의 DNA 단편에 의하여 4개의 genotype을 나타냈으며, 각 genotype의 빈도는 집단간차이를 보였고, 한국산 선발계통 집단에서는 4개의 genotype이 모두 발견되는 반면, 일본산 양식계통 및 일본산 양식계통을 포함한 교배집단에서는 특정 genotype만 발견되었다. OPA-11 primer 유래의 polymorphic DNA 단편을 cloning하고 염기서열을 결정하였으며, SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) primer를 제작하고 분석하였다. 본 연구는 참돔집단의 유전적 특성 파악 및 집단 구별에 RAPD marker를 활용하였으며, 참돔 육종시 형질 및 기능관련 DNA marker 탐색에 적용하기 위하여, 이후의 연구에서는 SCAR과 RFLP 분석에 RAPD marker를 이용하여 100% 정확도를 갖는 RFLP maker를 찾고, MAS (Marker-Assisted Selection)에 적용하고자 한다.

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Molecular Typing of Pseudomonas aeruginosa by Randomly Amplified Polymorphic DNA

  • Byoung-Seon Yang
    • 대한의생명과학회지
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    • 제9권4호
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    • pp.183-187
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    • 2003
  • Pseudomonas aerugionsa is a commonly isolated nosocomial pathogen. DNA fingerprinting of P. aerugionsa is examined by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD). In this study, P. aeruginosa were isolated from environmental and clinical specimens and the molecular typing of the microorganisms was investigated by RAPD. Thirty strains of P. aeruginosa were selected from the strains isolated formerly and submitted for type identification to the University Hospital. 15 strains of P. aeruginosa were received from Chungnam University Hospital and 14 strains from Gyeongsang University Hospital. DNA of P. aeruginosa was extracted by Qiagen genomic DNA kit. PCR mixtures were set up and incubated, Reactions mixtures were made to be optimal for P. aeruginosa. RAPD typing analysis was carried out by the multivariate statistical program (MVSP) V3.0. RAPD type I was the most common pattern and included 23 strains. Most of strains from Gyeongsang University Hospital belonged to RAPD type lb and 15 strains from Chungnam University Hospital to RAPD type I or II. RAPD typing of P. aeruginosa isolated from the environmental and clinical specimens was very simple and reproducible.

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RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA) 검정을 이용한 한국 표고균주의 계통분류 (Classification of Korean Lentinula edodos Strains by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Markers)

  • 이태수;박원철;강호덕;김세권;변병호;이창근;이원규;민두식
    • 한국균학회지
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    • 제25권3호통권82호
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    • pp.219-225
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    • 1997
  • 한국의 7가지 대표적인 표고품종에 대하여 RAPD(Random Amplified Polymorpic DNA) 검정을 실시하여 품종간의 구분이 가능한 지를 시도하였다. 표고 품종간의 계통분류에 적합한 RAPD marker를 생성시키기 위하여 OPA-01에서 OPA-20까지 20개의 primer를 사용한 결과, 9가지의 primer는 품종식별에 유용한 RAPD pattern을 보였으나, 나머지 11가지의 primer는 품종 식별에 사용하기 어려운 것으로 나타났다. 9가지 primer중 7개 품종을 모두 구분할 수 있는 단일 primer는 없었지만, 9가지중 2개의 조합을 취하면 어떤 경우도 7개의 표고 품종을 구분지울 수 있음으로써 RAPD 검정법이 표고 계통의 분류에 매우 정밀한 방법임을 알 수 있다.

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넙치와 조기의 원산지 판별을 위한 random amplified polymorphic DNA 패턴 연구 (Random Amplified Polymorphic DNA Analysis for Origin Identification of Olive Flounder (Paralichthys olivaceus) and Redlip Croaker (Pseudosciaena polyactis))

  • 강덕진;이석근;진덕희;최석정
    • 생명과학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.88-94
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    • 2006
  • 본 연구에서 넙치와 조기의 원산지를 판별하기 위한 도구로 RAPD PCR 방법의 가능성을 확인하였다. 넙치는 한국의 주문진 자연산, 통영 양식산, 거제 양식산 그리고 북한 자연산을 실험에 사용하였다. 조기는 한국산과 중국산을 사용하였다. 넙치의 RAPD 패턴에서는 뚜렷하고 일관성이 있는 진단용 띠들을 쉽게 찾을 수 있었다. 조기의 경우에는 유전적인 이질성으로 인하여 각 개체의 RAPD 패턴에서는 일관성이 있는 진단용 띠를 찾기 어려웠지만 각 원산지별로 얻은 RAPD 패턴에서는 가능성이 있는 진단용 띠들을 찾을 수 있었다.

Random Amplified Polymorphic DNA Analysis for Typing Extended-Spectrum-β-Lactamase of Klebsiella pneumoniae

  • Yang, Byoung-Seon
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제37권3호
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    • pp.149-154
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    • 2005
  • 대학병원의 임상검체에서 extended-spectrum-${\beta}$-lactamase (ESBL)생성 Klebsiella pneumoniae 51균주를 분리하였다. ESBL생성 K. pneumoniae 51균주는 광범위한 항생제에 내성을 보였고 대부분의 균주는 amikacin, gentamycin과 ciprofloxacin항생제에 내성을 나타내었다. 대학병원에서 분리한 51균주를 randomly amplified polymorphic DNA (RAPD)로 분석한 결과 충남대학병원 21균주와 충북대학병원에서 분리한 10균주는 Ia 와 Ib에 속하였고 경상대학 병원에서 분리한 20균주는 IIa, IIb에 속하였다. ESBL 생성 K. pneumoniae 51균주는 RAPD 분석으로 4가지의 유전형으로 구분 할 수 있었고 유전적으로 다양하였다. 이상의 결과로 RAPD 분석은 유전형분석에 빠르고 단순하고 경제적인 방법임을 알 수 있었다.

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RAPD 표지인자를 이용한 흑오미자의 자웅동주 및 자웅이주 식물의 동정 (Identification of Monoecious and Dioecious Plants of. Schisandra nigra Using the RAPD Markers)

  • 이효연;한효심;이갑연;한상섭;정재성
    • 식물조직배양학회지
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    • 제25권5호
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    • pp.309-313
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    • 1998
  • 본 연구는 국내의 경우 제주도의 일부지역에서만 자생하는 흑오미자(Schisandra nigra)를 RAPD법을 이용하여 자웅동주 및 자웅이주 식물의 특이적 Marker를 탐색하고저 실시 하였다. 10-mer로 구성된 80종류의 random primer를 사용하여 흑오미자를 분석한 결과 기존의 재배되고 있는 오미자(Schisandra chinensis) 또는 남오미자(Kadsura japonica)와는 다른 band pattern을 보여 주었다. 흑오미자의 자웅동주. 암그루, 숫그루의 3품종을 상기와 동일하게 80개의 primer를 사용하여 RAPD를 분석한 결과, 5종류의 random primer(OPA-17, OPA-19, OPB-3, OPB-9, OPB-16)에 대해서는 각 품종에 대한 특이적인 band가 검출되었다. 숫그루, 암그루 식물과는 다르게 자웅동주 식물은 3개체(1호 2호, 3호)간에도 서로 다른 band pattern을 보이는 특징을 갖고있다. 숫그루 특이적인 band pattern은 OPB-3 primer을 이용할 경우 750bp에서 검출되었고, 암그루는 OPA-19 primer에서 950bp, 1690bp와 OPB-3 primer의 경우 700bp에서 자웅동주 및 숫그루에서 나타나지 않는 band가 검출되었다. 이러한 결과는 흑오미자의 숫그루 및 암그루에서 나타난 특이적인 band가 유묘시기에 암ㆍ수 개체를 조기에 구별하는 genetic marker로 사용할 수 있으리라 기대된다.

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Characterization of Fusarium oxysporum f. sp. fragariae Based on Vegetative Compatibility Group, Random Amplified Polymorphic DNA and Pathogenicity

  • Nagarajan Gopal;Kang Sung-Woo;Nam Myeong-Hyeon;Song Jeong-Young;Yoo Sung-Joon;Kim Hong-Gi
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제22권3호
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    • pp.222-229
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    • 2006
  • Twenty-two isolates of Fusarium oxysporum f. sp. fragariae were obtained from diseased strawberry plants and their characteristics were investigated by vegetative compatibility group (VCG), random amplified polymorphic DNA (RAPD), and pathogenicity. Three major VCGs (A, B, and C) and one incompatible group were identified by nitrate reductase complementation test. The virulence pattern of the 22 isolates was studied in relation to four cultivars including Dochiodome, Red-pearl, Maehyang and Akihime. RAPD markers were used to determine genetic relationship, and created three major clusters among the 22 isolates of F. oxysporum f. sp. fragariae. Isolates belong to VCG-C were strongly pathogenic, and relatively high correlation was existed among VCG and RAPD, and virulence. In addition, VCG and RAPD pattern between pathogenic and non-pathogenic isolates were distinctly different.

Isolation of a Variant Strain of Pleurotus eryngii and the Development of Specific DNA Markers to Identify the Variant Strain

  • Lee, Hyun-Jun;Kim, Sang-Woo;Ryu, Jae-San;Lee, Chang-Yun;Ro, Hyeon-Su
    • Mycobiology
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    • 제42권1호
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    • pp.46-51
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    • 2014
  • A degenerated strain of Pleurotus eryngii KNR2312 was isolated from a commercial farm. Random amplified polymorphic DNA analysis performed on the genomic DNA of the normal and degenerated strains of this species revealed differences in the DNA banding pattern. A unique DNA fragment (1.7 kbp), which appeared only in the degenerated strain, was isolated and sequenced. Comparing this sequence with the KNR2312 genomic sequence showed that the sequence of the degenerated strain comprised three DNA regions that originated from nine distinct scaffolds of the genomic sequence, suggesting that chromosome-level changes had occurred in the degenerated strain. Using the unique sequence, three sets of PCR primers were designed that targeted the full length, the 5' half, and the 3' half of the DNA. The primer sets P2-1 and P2-2 yielded 1.76 and 0.97 kbp PCR products, respectively, only in the case of the degenerated strain, whereas P2-3 generated a 0.8 kbp product in both the normal and the degenerated strains because its target region was intact in the normal strain as well. In the case of the P2-1 and P2-2 sets, the priming regions of the forward and reverse primers were located at distinct genomic scaffolds in the normal strain. These two primer sets specifically detected the degenerate strain of KNR2312 isolated from various mushrooms including 10 different strains of P. eryngii, four strains of P. ostreatus, and 11 other wild mushrooms.