Vitellogenin (VTG) induction in response estradiol-17${\beta}$ ($E_2$) were electrophoretically examined in primary hepatocyte cultures in rainbow trout. The hepatocytes were maintained as monolayers on positively charged dishes for up to 7 days. The viability of hepatocytes on Day 7 in cultures decreased about 20.7% and 23.6% with and without $E_2$, respecitively. The amount of DNA per dish also decreased to 13.7% and 14.0% with and without $E_2$, respectively. There were no differences in viability and DNA content between the control and $E_2$-treated culture. Moreover, the rate of VTG to total protein concentrations reached the maxium level at the addition of $10^{-6}$ M E2, to the incubation medium. However, the higher concentration of $10^{-5}$ M $E_2$ rater depressed the level.
Infection with salmonid alphavirus (SAV) is a serious disease that mainly affects rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and Atlantic salmon (Salmo salar L.) reared in seawater or freshwater. SAV is prevalent in European countries including Norway that exports rainbow trout and Atlantic salmon to Korea. Consequently, SAV was listed as a disease notifiable to the OIE and many salmonid-producing countries either designate SAV as their notifiable disease or do research on the development of diagnosis and epidemiology to reduce the possibility of SAV infection. Unlike other salmonid-producing countries, SAV is not listed as a notifiable disease in Korea, thereby arousing concern that SAV will get into the country through the importation of live salmonids. Under the circumstance, Korea needs to have a legal basis to take much stricter follow-up measures, including listing SAV as a notifiable disease, establishing surveillance system based on OIE standards to declare Korea free from SAV, killing infected fish and conducting fallow system against affected farms.
The effects of estrogen and androgens on Vg gene expression were examined in primary hepatocyte culture and livers of the immature male trout. Specific primers of Vg cDNA were designed with already reported Vg gene nucleotide sequences. PCR product was sequenced and verified with Vg cDNA of rainbow trout. Total RNA was extracted from the cultured hepatocytes and livers of steroid-treated rainbow trout and then it was analyzed by reverse transcriptase- polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis. The Vg mRNA and Vg protein synthesis were increased in rainbow trout in vivo and in vitro with E$_2$ and methyltestosterone (MT) There were dose and time-related effects of E$_2$ and MT on vitellogesis. Androgens such as progesterone androsterone and testosterone also stimulated Vg mRNA expression in vitro. The results show that androgens as well as E$_2$ can induce expression of Vg mRNA in trout in vivo and in vitro.
Roh, HyeongJin;Kim, Bo Seong;Kim, Ahran;Kim, Nameun;Lee, Mu Kun;Park, Chan-Il;Kim, Do-Hyung
Journal of fish pathology
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v.33
no.1
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pp.23-34
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2020
In recent years, global warming is causing dramatic environmental changes and deterioration, such as hypoxia, leading to reduced survival rate and growth performance of farmed aquatic animals. Hence, understanding systemic immuno-physiological changes in fish under environmental stress might be important to maximize aquaculture production. In this study, we investigated physiological changes in rainbow trout exposed to hypoxic stress by monitoring changes in blood chemistry, leukocyte population, and expression levels of related cytokine genes. Hematological and serological factors were evaluated in blood obtained from rainbow trout sampled at a dissolved level of 4.6 mg O2 L-1 and 2.1 mg O2 L-1. Blood and head kidney tissue obtained at each sampling time point were used to determine erythrocyte size, leukocyte population, and cytokine gene expression. The level of LDH and GPT in fish under progressive hypoxia were significantly increased in plasma. Likewise, the (Granulocyte + Macrophage)/lymphocyte ratio (%) of fish exposed to hypoxia was significantly lower than that in fish in the control group. Such changes might be due to the rapid movement of lymphocytes in fish exposed to acute hypoxia. In this study, significant up-regulation in expression levels of IL-1β and IL-6 gene appeared to be involved in the redistribution of leukocytes in rainbow trout. This is the first study to demonstrate the involvement of cytokines in leukocyte trafficking in fish exposed to hypoxia. It will help us understand systemic physiological changes and mechanisms involved in teleost under hypoxic stress.
Background: The effects of the dietary administration of two heat-inactivated whole bacteria from the Vibrionaceae family, singly or combined, on innate immune response of the rainbow trout were studied. The two bacteria (Pdp11 and 51M6), which were obtained from the skin of rainbow trout, showed in vitro characteristics that suggested they could be considered as potential fish probiotics. Methods: The fish were fed four different diets: control (non-supplemented), or diets supplemented with heat-inactivated bacteria at $10^8$ cfu/g Pdp11, $10^8$ cfu/g 51M6 or with $0.5{\times}10^8$ cfu/g Pdp11 plus $0.5{\times}10^8$ cfu/g 51M6 for 4 weeks. Six fish were sampled at weeks 1, 2, 3 and 4, and then the main humoral (natural haemolytic complement activity and serum peroxidase content) and cellular innate immune responses (leucocyte peroxidase content, phagocytosis, respiratory burst and cytotoxicity) were evaluated. Results: The serum peroxidase content and the natural haemolytic complement activity increased with time, reaching the highest values in the third and fourth weeks of feeding, respectively. The phagocytic ability of specimens fed the mixture of the two inactivated bacteria was significantly higher than in the controls after 2 and 3 weeks of treatment. The same activity increased significantly in rainbow trout fed the Pdp11 diet for 2 weeks or the 51M6 diet for 3 weeks. Respiratory burst activity was unaffected by all the experimental diets at all times assayed. Cytotoxic activity had significantly increased after 3 weeks in fish fed the 51M6 diet. Conclusion: Our results demonstrated the usefulness of incorporating inactivated probiotic bacteria into fish diets.
A study is reported which investigated the additive nature of digestible energy (DE) from dietary nutrients and to estimate the relative energy values of different energy-yielding nutrients in practical trout diets. A growth study was conducted over 12 weeks with 6 diets. Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) were fed diets once a day ad libitum. Digestible energy values determined and calculated had direct relationship indicating additive nature of such values for feed ingredients. Overall growth performance was best in a diet containing 33% digestible protein (DP) with a DP/DE ratio of 18.6. A reduction in digestible protein level with the same DP/DE rat io led to a significant decrease in growth and feed efficiency. The increase of 7% of lipid with concomitant decrease in protein resulted in the relative gain of 130% in growth and nutrient retention, suggesting that 1 g of lipid is equal to about 1.3 g of proteins in terms of net energetic value. Replacement of 10% of dietary lipid by carbohydrates led to a slight decrease in energy retention efficiency but to a great increase in lipid retention efficiency (130%) showing that dietary carbohydrates led to increased lipogenesis.
The objective of this investigation was to examine oxygen consumption (OC) and operculum movement number (OMN) of rainbow trout Oncorhynchus mykiss as a function of changes in water temperature (WT). The WT of the rearing facility was increased from $4^{\circ}C$ to $28^{\circ}C$ stepwise at $1^{\circ}C$ day at each WT (5, 10, 15, 17, 20, 23, 26, and $28^{\circ}C$) then OC and OMN were measured. The OC of the fish increased linearly with WT: O=25.0240 WT+17.5400 in the range of $4{\sim}23^{\circ}C$ However, at 26 and $28^{\circ}C$ the OC declined to around the level at $10^{\circ}C$. The OMN also increased linearly with temperature: OMN=4.4847 WT+59.2150 in the range of $4{\sim}23^{\circ}C$ but at 26 and $28^{\circ}C$ the OMN of the fish dropped slightly. The OC and OMN of the fish showed peak at $23^{\circ}C$ with the lowest values at $4^{\circ}C$. In the range of $4{\sim}23^{\circ}C$, the relationship between OC and OMN of the fish was expressed as a linear equation: OC=0.0923 OMN-308.2100. The OC of fish transferred from $15^{\circ}C$ to certain temperatures without acclimation showed a lower OC at 5 and $10^{\circ}C$ but above $15^{\circ}C$ the OC increased/decreased with temperature. The trout died in temperatures above $28^{\circ}C$ even when acclimated step by step with a $1^{\circ}C$ day increase in WT. In this experiment, a negative physiological changs occurred in the experimental fish at $23^{\circ}C$ suggesting that the optimal physiological temperature range of rainbow trout is $10{\sim}20^{\circ}C$.
This study was carried out to investigate the morphological changes of gonadotropes in pituitary gland and spermatogenic cells in testis, obtained from 150 of 3-year-old immature and mature male rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) during the reproductive cycles from March to February in the following year. In the maturation cycle of the pituitary gonadotropes of cultured rainbow trout, three periods can be distinguished i.e. a period of resting(March-August), a period of full spermatogenesis (September-November), and a period of breeding (December-February). The ultrastructures of the gonadotropes largely parallel the cyclical changes in the tests. The seminiferous tubules contain all spermatogenetic stages and sperm cells in a period of early maturation. At first, the size of the nucleus and cytoplasm decrease gradually at every stages from spermatogonia to spermatids. In the secondary spermatocytes, the small mitochondria are located over the outer cytoplam. In spermatids, the cytoplasmic masses move toward the posterior part of the nucleus. In spermatids, the two large mitochondria are located over the cytoplasm. In spermatids, the cytoplasmic masses move towark the posterior part of the nucleus. In spermatids, the two large mitochondria are located over the cytoplasm and begin to elongate. In spermatozoa, the surface of the nucleus devreases in volume. Examination by TEM shows that the nuclear envelope and plasma membrane are slightlywrinkled and closely adhered to the nucleus of spermatozoa. Two oval mitochondria are quite separated and the flagellum is inserted into the base of the spermatozoa head.The axoneme in this fish has the typical pattern such as nine peripheral doublets and a central doublet(9+2). there are remarkable individual differences in the size and morphology of spermatozoa head as observed by transmission and scanning electron microscopy.
This study was conducted to increase the efficiency of farming practice in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, by sex reversal and chromosome-set manipulation techniques. To obtain phenotypic males, hormonal sex reversal was carried out using an exogenous hormone treatment method. 5 mg of 17 alpha-methyltestosterone per kg diet was supplied for 82 days after first feeding at $10^{\circ}C$ and $13^{\circ}C$. More than 93% of the male population was produced by this method and growth of hormone-treated fish at $13^{\circ}C$ was faster than that of untreated bi-sexual groups. Induced diploid gynogenesis was carried out using artificial insemination of UV-irradiated sperm into haploid eggs. Based on the appearance of the rate of haploid syndrome and survival of embryo, a UV ray dose of at least $3,600\;erg/cm^2$ was required to inactivate rainbow trout sperm genetically. Haploid embryos were restored to diploid by blocking the extrusion of the second polar body using heat shock treatment at $28^{\circ}C$ for 20 min, 10 min post insemination. Gynogenetic diploid sex ratios were confirmed after maturation of the fish erythrocyte measurements and chromosome counts.
KANG Seok-Joong;CHOI Byeong-Dae;CHOI, Yeung-Joon;YOUM Mal-Gu;LEE Kang-Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.5
/
pp.445-453
/
1994
Rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, were cultured with different levels of carotenoids in odor to investigate the feeding effect of ascidian tunic extracts on the liver fatty acid compositions of them. Dominant monoenoic fatty acids of the ascidian tunic extracts were 16:1n-7($5.9\%$), 18:1n-9($21.9\%$), and 18:1n-7($3.5\%$) and polyenoic fatty acids of them were linoleic(18:2n-6, $14.2\%$), eicosapentaenoic(20:5n-3, $3.5\%$), and docosahexaenoic acid(22:6n-3, $8.3\%$). The compositions of fatty acid in the liver lipids were affected by the tunic extract levels during the feeding. The percentage of monoenoic acids in extract diets was decreased, and that of n-3PUFA was increased during feeding 2 weeks. But the n-3PUFA contents were decreased in 4 weeks. The 20:4n-6 content in rainbow trout fed extract diet was higher than that in the control and pink diet groups. The rainbow trout fed with ascidian tunic extracts showed an increase of essential fatty acids in the fish tissue, compared to the control or pink diet feeding groups.
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