A new leaf spot disease was observed on leaves of Rheum palmatum (Chinese rhubarb) in Northwest China (Gansu Province) starting in 2005. A Septoria-like fungus was isolated and completion of Koch's postulates confirmed that the fungus was the casual agent of the leaf spot disease. Morphology and molecular methods were combined to identify the pathogen. The fungus produced conidiomata pycnidia and the conidia were 2~5 septate, $61.2{\sim}134.1{\mu}m$ in length and $3.53{\sim}5.3{\mu}m$ in width, which is much larger than the known Spetoria species that infects Polygonaceae species. Phylogenic analysis of the internal transcribed spacer region confirmed that this Septoria-like fungus is within the Septoria genus but distinct from known Septoria species. Together, these morphological and phylogenetic data support that the R. palmatum infecting Septoria strain is a newly-described plant pathogenic species.
Fungal strain CGF was isolated from the soil of ChungNam Province, South Korea. Based on the 28S rDNA sequence analysis and the sequence of the internal transcribed spacer (ITS) region of ribosomal DNA, together with morphological and cultural characteristics, this strain was identified as Aspergillus sclerotiorum and renamed Aspergillus sclerotiorum CGF. This is the first strain of Aspergillus sclerotiorum identified in Korea. When the antifungal activity of A. sclerotiorum CGF was evaluated, among the phytopathogenic fungi, mycelial growth of only Phytophthora species was inhibited. Oermination of P. capsid zoospore was also inhibited. The bioactive compound of A. sclerotiorum CGF was highly thermo- and pH-stable.
The reexamination of the fungal genus Botryosphaeria on 12 plant species of 10 families was carried out based on molecular phylogenetic analyses using the regions of translation elongation factor 1-α, β-tubulin, DNA-directed RNA polymerase II subunit, and internal transcribed spacer region of rDNA and morphological characteristics. Japanese isolates were divided into five clades and include Botryosphaeria dothidea, B. qingyuanensis, B. sinensis, and Botryosphaeria spp. Two species, B. qingyuanensis and B. sinensis have been newly added to the Japanese mycoflora, but their host plants are not specified. Botryosphaeria tenuispora isolated from Leucothoe fontanesiana and insect galls on fruits of Aucuba japonica has been proposed as a new species.
Phytophthora species, classified under Oomycota, cause significant damage to various crops and trees. The present study introduced Phytophthora species, P. nagaii and P. tentaculata, new to Korea, which pose notable risks to their respective host plants. Our research provided a comprehensive description of these species taking into account their cultural features, morphological characteristics, and molecular phylogenetic analysis using the internal transcribed spacer rDNA region and cytochrome c oxidase subunit mtDNA genes (cox1 and cox2) sequences. In addition, this study first evaluated the sensitivity of P. nagaii and P. tentaculata to five anti-oomycete fungicides, finding both species most responsive to picarbutrazox and P. tentaculata resistant to fluazinam. The data can guide targeted treatment strategies and offer insights into effective control methods. The findings expand our understanding of the diversity, distribution, and management of Phytophthora species in Korea.
Park, Sook-Young;Jang, Seol-Hwa;Oh, Soon-Ok;Kim, Jung A;Hur, Jae-Seoun
Mycobiology
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제42권4호
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pp.311-316
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2014
Lichen studies, including biodiversity, phylogenetic relationships, and conservation concerns require definitive species identification, however many lichens can be challenging to identify at the species level. Molecular techniques have shown efficacy in discriminating among lichen taxa, however, obtaining genomic DNA from herbarium and fresh lichen thalli by conventional methods has been difficult, because lichens contain high proteins, polysaccharides, and other complex compounds in their cell walls. Here we report a rapid, easy, and inexpensive protocol for extracting PCR-quality DNA from various lichen species. This method involves the following two steps: first, cell breakage using a beadbeater; and second, extraction, isolation, and precipitation of genomic DNA. The procedure requires approximately 10 mg of lichen thalli and can be completed within 20 min. The obtained DNAs were of sufficient quality and quantity to amplify the internal transcribed spacer region from the fungal and algal lichen components, as well as to sequence the amplified products. In addition, 26 different lichen taxa were tested, resulting in successful PCR products. The results of this study validated the experimental protocols, and clearly demonstrated the efficacy and value of our KCl extraction method applied in the fungal and algal samples.
Kim, Jin-Hee;Kim, Dong-Yeo;Park, Hyeok;Cho, Jae Hee;Eom, Ahn-Heum
한국균학회지
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제45권1호
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pp.63-67
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2017
Through a survey of symbiotic endophytic fungi, we isolated an endophyte fungal strain from the roots of Glycyrrhiza uralensis in Korea. The isolated fungal strain was identified using its morphological characteristics and through phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer, the large subunit rDNA region, and the translation elongation factor region. The strain was identified as Neocosmospora rubicola. This species has not been previously reported in Korea. In this study, we report its isolation from the roots of Glycyrrhiza uralensis in Korea, followed by the characterization and identification of the strain.
로젯사철란(G. rosulacea Y. Lee)은 애기사철란과 유사하나 로젯트형의 잎, 짧은 땅속줄기와 서식지 등의 특징에 의해 한국산 사철란속(Goodyera R. Br.) 내의 신종으로 기재된 바 있다. 로젯사철란의 분류군의 실체와 근연종간의 유연관계를 파악하기 위하여 군외군을 포함한 24개의 사철난속 식물을 대상으로 핵 리보좀(ribosomal)의 DNA internal transcribed spacer와 엽록체 DNA의 trnL 구간의 염기서열을 분석하였다. 분류군의 실체와 근연종간의 유연관계는 정렬된 염기서열을 바탕으로 최대절약분석(Maximum parsimony analysis)와 근연결합법(Neibour Joining method)에 의한 계통수 및 고유 표지유전자 여부로 추정하였다. 분석 결과 로젯사철란은 다수의 고유한 표지유전자를 가지며, ITS와 trnL 계통수에서 모두 단계통군을 형성하였다. 로젯사철란과 한국산 사철란속 내 각 분류군간의 유전적 거리(pairwise distance)는 ITS에서 3.49-6.68, trnL에서 5.05-9.53으로서 독립된 종으로 간주하기에 무리가 없었다. 따라서 분자적 결과는 로젯사철란을 사철란속내 독립된 종으로 처리하는 것을 지지하였다. 계통수에서 로젯사철란은 형태적으로 유사한 애기사철란(G. repens)과 동일한 분계조를 형성하였고, 유전적 거리도 조사한 분류군들 중 가장 낮은 값을 나타냈으므로 가장 가까운 근연분류군임을 나타내었다.
Zoysia 속 잔디는 학교운동장 및 공원, 골프장, 스포츠경기장과 같이 다양한 장소에 식재되고 있는 중요한 잔디이다. 해안가에서 자생하는 Zoysia 속 들잔디와 갯잔디는 외부 형태적 특성이 유사하여 외부 형태적 분류 뿐 만 아니라 분자생물학적 분류도 필요하다. 본 연구에서는 nrDNA-ITS(Internal Transcribed Spacer)의 DNA 바코드 분석을 통해서 자생하는 들잔디와 갯잔디의 분자생물학적 신속한 분류체계를 확립하고자 하였다. 이를 위해 난지형 잔디인 Zoysia 속 들잔디(Z. japonica) 및 갯잔디(Z. sinica)와 한지형 대표 잔디인 크리핑 벤트그라스(A. stolonifera) 및 켄터키 블루그라스(P. pratensis)의 nrDNA-ITS 염기서열을 확보하였다. 확보된 들잔디및 갯잔디, 크리핑 벤트그라스, 켄터키 블루그라스의 ITS 염기서열 전체 구간은 각 686bp와 687bp, 683bp, 681bp으로 확인되었으며, nrDNA-ITS 내부 염기서열구간 분석 결과, ITS1의 크기는 248-249bp, ITS2는 270̵-274bp, 5.8S rDNA는 163-164bp의 차이로, 각 4종의 잔디가 ITS 염기서열을 이용하여 식별되었다. 특히, 들잔디와 갯잔디 nrDNA-ITS 염기서열은 19 염기(2.8%) 차이를 나타냈으며, ITS1과 ITS2의 G + C 함량은 55.4-63.3% 임을 확인하였다. 이러한 들잔디와 갯잔디의 ITS 염기서열 차이를 바탕으로 CAPS 마커로 전환하여 대조구 및 수집된 자생 Zoysia 속 잔디 영양체 62개체를 분석한 결과, 외부형태학적 분류법으로 들잔디 개체, 갯잔디 개체로 동정되었지만, ITSCAPS 마커를 이용한 분자생물학적 분류법으로 들잔디 36개체와 갯잔디 22개체 뿐만 아니라 들잔디와 갯잔디간의 자연교배종 4개체도 식별하였다. 이상의 결과에서 들잔디와 갯잔디는 ITS 염기서열 및 ITS 기반 CAPS를 통하여 식별할 수 있을 것으로 판단된다.
남부 지방의 밀양 근교에 자생하고 있는 야생 동충하초 균주(Cordyceps sp., Paecilomyces sp., Beauveria sp., Aranthomyces sp., Isaria sp., Himenostilbe sp.)를 채집 분리하여 rDNA 및 internal transcribed spacer (ITS) 부위의 염기서열을 비교하였다. ITS 영역에 특정적인 프라이머인 ITS1과 ITS4를 이용하여 PCR을 수행하여 증폭하였다. 다양한 균주에서 같은 크기의 PCR 생산물을 얻을 수 있었고, 이들의 서열분석을 위하여 pGEM-T easy 벡터에 클로닝하였으며, ITS1, 5.8S, ITS2 영역 부위의 염기서열들을 BLAST 수행하여 유연관계를 분석하였다. 밀양 근교에서 분리한 32개의 균주 중에 Cordyceps militaris는 서열이 등록된 유전정보 AY49191, EU825999, AY491992와 100% 일치하였으며, 몇 개의 종은 보고된 서열과 모두 일치하지는 않았다. 예를 들어 strain P17은 울주군 가지산에서 분리한 P. tenuipes로서 밀양시 조천읍 가지산에서 분리한 P. tenuipes와는 서열상에서 다른 부분들이 있었다. 결론적으로 밀양 근교의 균주들을 분리하는데 ITS영역분석이 분류와 검정에 효율적이고, 본 연구를 통하여 동충하초의 생태학적인 유전자원들을 확보할 수 있었다.
Hilal S. AlShamakhi;Abdullah M. Al-Sadi;Lyn G. Cook
Mycobiology
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제51권5호
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pp.281-287
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2023
The symbiotic association between fungus-gardening termites Macrotermes and its fungal symbiont has a moderate degree of specificity-although the symbiotic fungi (Termitomyces) form a monophyletic clade, there is not a one-to-one association between termite species and their fungus-garden associates. Here, we aim to determine the origin and phylogenetic relationships of Termitomyces in Oman. We used sequences of the internal transcribed spacer region (ITS) and the nuclear large subunit ribosomal RNA (LSU rRNA, 25S) gene and analyzed these with sequences of Termitomyces from other geographic areas. We find no evidence for more than a single colonization of Oman by Termitomyces. Unexpectedly, we find Termitomyces in Oman is most closely related to the symbiont of M. subhyalinus in West Africa rather than to those of geographically closer populations in East Africa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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