As a part of the integrated disease system in greenhouse, an antifungal fungus(AF1) was isolated from greenhouse soil. It exhibited strong inhibitory activites against Pythium ultimum, Phytophtora capsici, Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, and Fusarium oxysporum based on dual culture on 1/5 strength of potato dextrose agar between antagonistic fungus and several plant pathogens. The antagonistic fungus was identified as Chaetomium cochliodes, based on morphological characteristics; the body of the perithecium bears straight or slightly wavy, unbranched hairs, whilst the apex bears a group of spirally coiled hairs. To investigate antagonistic principles, antifungal compound was extracted and fractionated by different solvent systems. An antifungal compound was isolated as pure crystal from is culture filtrate using organic solvent extraction and column chromatography, followed by preparative thin layer chromatography. The chemical structure of the purified antifungal compound was identified as chaetoglobosin A based on the data obtained form $^1H-NMR$, $^{13}C-NMR$, DEPT 90, 135, $^1H-^1H$ COSY, $^1H-^{13}C$ COSY and EI/MS. $ED_{50}$ values of the chaetoglobosin A against P. ultimum, P. capsici, R. solani, B. cinerea and F. oxysporum were 1.98, 4.01, 4.16, 2.67 and 35.14 ppm, respectively.
Park, Gwee-Kyo;Lim, Jong-Hui;Kim, Sang-Dal;Shim, Sang-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권3호
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pp.326-330
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2012
Antifungal metabolites were isolated from a culture of Pseudomonas aurantiaca IB5-10. Chemical structures of the metabolites were elucidated as phenazine-1-carboxylic acid (PCA; 1), 2-hydroxyphenazine (2-OH-PHZ; 2), and cyclo-(L-Pro-L-Val; 3), respectively, based on spectroscopic methods. Among them, 3 was isolated for the first time from this strain. The antifungal activities of 1-3 were evaluated against a variety of plant pathogens. To the best of our knowledge, the antifungal activities of 3 against plant fungal pathogens have been evaluated for the first time in this work. PCA (1) showed the most potent antifungal activities against Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani AG-1(IA), and Pythium ultimum with MICs (${\mu}g/ml$) of less than 1.0, 1.3, and 2.0, respectively. On the other hand, 2-OH-PHZ (2) showed potent antifungal activity against R. solani AG-1(IA) with the MIC (${\mu}g/ml$) of 2.0, whereas it showed moderate antifungal activity against P. ultimum with the MIC (${\mu}g/ml$) of 50.0. In addition, 3 showed antifungal activity against only R. solani AG-1(IA).
Long-term repeated culturing of biocontrol agents on a certain medium often results in reduced biocontrol efficacy and altered physiology. Effect of culturing media on biocontrol ability and physiological state of Burkholderia gladioli strain B543 was investigated. Over 20 times repeated cultivation of B. giadioli strain B543 on Kings B medium or nutrient agar medium showed improved biological control of cucumber damping-off caused by Pythium ultimum, while one time cultivation on KB or NA did not. The repeated cultivation also induced the physiological changes of the biocontrol agent such as antifungal activity and the production of protease and siderophore. Our result indicates that adaptation to proper culturing medium can alter biocontrol ability and must consider in optimizing the use of biocontrol agents.
Fifty isolates of myxobacteria were isolated from soils from several areas in Korea during 1996-1997 and bioactivity against plant pathogenic fungi of these isolates was examined. A myxobacterial isolate KR025 showed good antifungal activities against Pyricularia oryzae, Cryphonectria parasitica, Colletotrichum lagenarium, and C. gloeosporioides but did not against Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum and Pythium ultimum. The bacterium was identified as Myxococcus fulvus based on morphological and physiological characteristics. Antifungal substances were extracted from culture broth and bacterial cell of Myxococcus fulvus KR025 by ethyl acetate. Antifungal substance of Myxothiazole (100 ${\mu}{\textrm}{m}$/ml) produced by Myxococcus fulvus KR 025 controlled 97.0% rice blast, tomato late blight, wheat leaf rust, and barley powdery mildew and showed 45.0 and 82.6% disease control of rice sheath blight and cucumber gray model, respectively.
Cepacidine A was previously isolated as a novel antifungal antibiotic from the culture broth of Pseudomonas cepacia AF2001. It exhibits a potent in vitro antifungal activity against various plant pathogenic fungi, such as Plasmopora veticola on grapes, Septoria nodorum and Fusarium culmorum on wheat, as well as Colletotrichum lagenarium on cucumbers. Accordingly, this study was conducted to evaluate the potential crop protection activity of strain P. cepacia AF2001. The strain was tested in semi-greenhouse biocontrol assays, and showed an excellent biological activity against Pythium ultimum in cotton and cucumbers; however, only a minor activity against Rhizoctonia aolani in cotton was observed. Furthermore, the nematodes Haemonchus contortus and Trichostrongylus only exhibited a moderated activity in the in vitro larval development assay with no activity in the in vivo animal model.
One hundred and thirty bacterial isolates with high chitinolytic activity on chitin agar media were isolated and identified. Most of the isolates were Aeromonas hydrophila (110 isolates), and the others were Serratia marcescens (11 isolates), Aeromonas caviae (3 isolates), Chromobacterium violaceum strain C-61 (2 isolates), Chromobacterium violaceum strain C-72 (1 isolate) and unknown species (3 isolates). Among them, C. violaceum strain C-61 had highest chitinolytic activity and fungal growth inhibition on PDA. This bacterium also inhibited the growth of Rhizoctonia solani, Sclerotinia scelrotiorum, Phytophthora capsici and Pythium ultimum, but it didn't inhibit the growth of Fusarium oxysprum and Fusarium solani. C. violaceum strain C-61 suppressed damping-off of eggplant caused by R. solani. Populations of the chitinolytic bacteria such as Aeromonas hydrophila, Serratia marcescens, Aeromonas caviae, Chromobacterium violaceum strain C-61 and Chromobacterium violaceum strain C-72 introduced into R. solani-infested soil were continuously decreased until 20 days after treatment, but their populations except A. caviae were not changed significantly and maintained over 5$\times$104 CFU per g of soil thereafter.
Endophytic fungi from Ginkgo biloba and Taxus cuspidata in Korea were screened for production of taxol. Eighteen and twelve fungal isolates from G. biloba and T. cuspidata, respectively, were shown to produce immunologically detectable amount of taxol. The highest production of taxol at 260 ng/l was achieved by stationary culture of an Alternaria isolate from G. biloba. The strain also produced unidentified antifungal agent(s) against Pythium ultimum. However, the activity gradually decreased when the strain was stored at $4^{\circ}C$ for 6 months.
전국에서 분리한 세균으로부터 항균력이 있는 길항세균들을 먼저 분리한 다음 그중 배양배지 속으로 강력한 항균력을 나타내는 peptide를 분비하는 A405균주를 선발, Biolog System 및 rDNA 염기서열을 이용하여 Bacillus subtilis로 동정하고 이 균주가 생성하는 항균 peptide의 항균력을 조사한 바 Botrytis cinerea, Cercospora sp., Fusarium oxysporum, Penicillium digitatum, Celletotrichum gloeosporioides, Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Pyricularia oryzae등의 식물병원균과 Escherichia coli, Pseudomonas spp. 등의 세균 및 효모인 Candida albicans의 성장도 억제하는 강력한 항균력을 보였다. 또한 이 균주가 생산하는 항균 peptide는 알콜, 아세톤과 같은 유기용매에 내성을 가지고 있었으며 proteinase K와 phenol 처리시에는 항균력이 감소되거나 소실되는 특성을 가지고 있었다. 이 항균 peptide를 SDS-PAGE, Native-PAGE 및 Tris-Tricine 전기영동으로 분자량이 3kDa인 작은 peptide임을 확인하였고 aspartic acid, glycine, serine, glutamine, valine, leucine, isoleucine, proline, tyrocine 등의 9가지 아미노산으로 구성되어 있음을 Amino Acid Analyzer로 확인하였으며 냉동건조한 항균 peptide 50 ug/ml을 체리토마토에 처리하여 과일의 선도유지를 조사한 결과 대조구에 비하여 월등한 선도유지 효과가 있음을 입증하였다.
1982년부터 1885년 동안, 인삼뿌리썩음병 및 근권 토양에서 분리한 Fusarium균(115균주)을 Snyder-Hansen 방식(주로 F. solani 및 F. oxysporum의 동정에 적용) 및 Gerlach-Nirenberg 방식(주로 F. moniliforme[Liseola section]의 균주 동정 및 F. roseum[Snyder-Hansen 분류개념에 의한]에 속하는 균주 동정에 적용), 그리고 Cylindrocarpon균은 Booth 방식으로 분류 동정한 결과, 11개의 종으로 나눌 수 있었다. 가장 많이 분리된 균은 Fusarium solani(55균주), F. oxysporum(35균주), 그리고 F. moniliforme(10균주) 등이었다. Snyder와 Hansen(1945) 분류방식에 의해 F. roseum으로 불리우는 나머지 균주들(15균주)은 매우 드물게 분리되었으며, 8개의 종으로 다시 분류할 수 있었다. 이들은 F. equiseti, F. avenaceum, F. graminum, F. arthrosporioides, F. sambucinum, F. reticulatum, F. semitectum and F. poa 등이었다. 1985년 6월 이들 Fusarium 균주들과 Cylindrocarpon destructans 균주들 및 주요 인삼의 토양전염성 병원균 균주들을 증평인삼시험장 3년생 격리포장에서 균총 절편으로 뿌리 상부에 접종시켜 그 병원성을 검정한 결과, Phytophthora cactorum과 Pythium ultimum은 접종 12일 만에 지상부 위조 및 뿌리의 물렁썩음을 일으키는 높은 병원성을 나타내었다. 접종 후 77일경에 뿌리를 채굴하여 뿌리의 마른 썩음을 조사한 결과, Fusarium solani 균은 34 균주 중 1개 균주만이 병원성을 보였으나, Cylindrocarpon destructans는 12개 접종 균주 모두 인삼의 뿌리썩음에 높은 병원성을 나타내었다 . Fusarium solani 및 Cylindrocarpon destructans는 전형적인 기주-위주의 인삼 토양병원균으로 추정할 수 있었다.
다양한 세균 종이 갯벌이나 젓갈 등 염분이 많은 환경에서 서식하고 있으며, 이들에 대한 단백질 분해능과 염분내성에 관한 많은 보고가 있지만 상대적으로 이들 세균의 식물에 대한 항진균 활성에 대한 연구는 부족한 실정이다. 본 연구에서는 고염분의 환경에서 서식하는 세균의 식물 병원균에 대한 항균활성을 검정하고자 수행되었으며, Sclerotinia sclerotiornm, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Botrytis cineria, Collectotrichum acutatum, Pythium ultimum의 6종에 대한 항균활성 세균을 1차적으로 선발하였다. 갯벌토양과 젓갈에서 형태적인 특성에 따라 분리된 총 423 점의 세균균주 중 40균주가 항균활성 균주로 선발되었으며, MIDI shorlock gas chromatography system 균체 지방산분석에 의해 이들의 종을 동정하였다. 갯벌토양에서 분리된 세균은 6속 10종에 속하는 것으로 확인되었으며 이들 17점의 세균 중 Paenibacillus macerans가 5점으로 가장 많았다. 젓갈에서 분리된 세균은 3속 7종에 속하는 것으로 확인되었으며, 이들 23점의 세균 중 Bacillus atrophaeus가 12점으로 가장 많았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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