• Applied Microscopy
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• 제27권1호
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• pp.13-30
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• 1997

The experiment was performed to study the morphological responses of the thymus of the mice, to antitumour agents (5-Fluorouracil or mitomycin C). Healthy adult mice weighing 25 gm each were divided into normal and experimental groups. 5-Fluorouracil (60 mg/kg) or Mitomycin-C $(400{\mu}g/kg)$ were injected subcutaneously to the animals every other day. Animals were sacrificed at 4 days and 7 days following the first injection. Pieces of the tissue taken from the thymus were prefixed with 2.5% paraformaldehyde-l.5% glutaraldehyde, followed by post-fixation with 1% osmium tetroxide. Ultrathin sections stained with uranyl acetate and lead citrate were observed with a JEM 100 CX-II electron microscope. The observed results were as follow: 1. Apoptoses of T-lymphocytes were observed more frequently in the thymus of the experimental groups than in those of a normal group. 2. In the experimental group, the plasma cells with distended cisternae of the granular endoplasmic reticulum and the eosinophile leukocytes were observed frequently. 3. In the experimental group, newly forming Hassall's corpurscles were observed frequently. 4. In the mitomycin-treated group, the epithelial reticular cells containing distended perinuclear cisternae, distended the granular endoplasmic reticula and pyknotic nuclei were observed in the cortico-medullary junctional area. 5. In the mitomycin-treated group, nuclear bodies with medium electron dense materials were often observed in the T lymphocyte. 6. In the 5-fluorouracil-treated groups, fused and dissolved tonofilament bundles and apoptotic bodies were observed in the some epithelial reticular cells in the medullary area. 7. In the 5-fluorouracil-treated groups, some elongated and bar-shaped lysosomes with electron lucent gap were often observed in the macrophages. 8. In the 5-fluorouracil-treated group, membrane complex of the smooth endoplasmic reticulum were ofen observed in the macrophage. From the above results, it was suggested that 5-fluorouracil or mitomycin could induce rapid involution of the thymus, and disturb maturation and differentiation of T lymphocytes, and, in turn, supress immunity.

• 대한치과보철학회지
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• 제17권1호
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• pp.47-59
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• 1979

In order to study the morphologic changes of the unfixed odontoblasts suspended in phenol solution of several different concentrations, the author carried out the extraction of lower incisor of S-D strain rats to collect the odontoblasts, and the cells obtained were suspended immediately in saline solution. After observing the odontoblasts in fresh state, the saline solution was substituted with 0.125%, 0.25% 0.5%, 1% and 2% diluted phenol solutions. The morphologic changes were examined with phase contrast microscope at intervals of 10, 30, and 60 minutes. The results were as follows: 1. In saline solution the odontoblast showed cytoplasmic swelling, slender cytoplasmic process, thick rim nuclear membrane with increased dark contrast, and prominent nucleoli and chromatin granules with lapse of time intervals. In accordance with time intervals, blisters appeared in the supranuclear zone and increased its size and moved outward of the cytoplasmic membrane resulting detachment from the cell membrane. The phase dark cytoplasmic granules were increased in its dark contrast and in its size. 2. In 0.125% and 0.25% phenol solution, the odontoblasts and its nucleus shrunk immeidately and its contrast of cellular components was increased. With the lapse of time, the phase-dark granules in cytoplasm were aggregated, and several blisters were formed in and out of the cells. The outline of cytoplasmic membrane was also obscured. 3. In 0.5% phenol solution, the necleus shrunk at once, but soon after it revealed karyolysis accompanying dark contrast of neclear components such as nuclear membrane, nucleoli, and chromatin granules. On the contrary, the cytoplasmic granules showed aggregation and increased dark contrast, small and large blisters were formed in and out of the odontblasts and the outline of cytoplasmic membrane became obscured. 4. In 1% phenol solution, it showed shrinkage of odontblasts and its nuclei with thick rim nuclear membrane, aggregation of chromatin granules and occasional karyorrhexis. The dark contrast of cytoplasmic granules was increased and aggregated each other. But the blister formation could not be found. 5. In 2% phenol solution, it showed the shrinkage of odontoblasts and pyknotic nuclei with increased dark contrast of nucleoli and chromatin granules. The number of cytoplasmic granules was decreased by aggregation. But the blister formation could not be found as in 1% phenol solution.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제27권4호
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• pp.355-362
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• 2002

One fifth dilution of formocresol is usually used for pulpotomy of the primary teeth and emergency pulpotomy of the permanent teeth. However the use of formaldehyde has been subjected to criticism because it may be absorbed into the blood stream and become distributed systemically, it nay also alter the pulp tissue rendering it immunologically active, and have carcinogenic potential. Recently Depulpin$^{\circledR}$(VoCo., Germany) gains popularity as a devitalizing agent during root canal therapy in spite of high concentration of 49 % paraformaldehyde because it facilitate devitalization of pulp and make root canal therapy easier But there have been not enough publications about the reaction of pulp and periapical tissue caused by Depulpin. This study was performed to evaluate the histological changes in pulp and periapical tissue of rats after pulpotomy using formocresol and Depulpin and to elucidate the toxic effects of these agents. Thirty six Sprague-Dawley rats were anesthetized by intraperitoneal injection of ketamine Maxillary first molar teeth were used for pulpotomy with formocresol and Depulpin. Rats were sacrificed after 2 days, 4 days, 1 week, 2 weeks, 3 weeks and 4 weeks respectively. Specimens were histologically observed by light microscope changes in pulp and periapical tissue. The obtained results were as follows. 1. Formocresol group A zone of fixed tissue. in which odontoblasts could clearly be defined, was present directly underneath the pulpotomy dressing in almost all teeth of this group. This was followed by an area of necrotic tissue which resembled dried out fibrous tissue with no cellular detail except some pyknotic nuclei. In the specimens of after 2 days, 4 days, 1 week, 2 weeks in which vital tissue was present, it was separated from the fibrous area by a zone of inflammation. In the specimens of after 3 weeks and after 4 weeks, inflammatory infiltrate was in the periodontal ligament adjacent to the apical foramina of the teeth. 2. Depulpin$^{\circledR}$ group The area of necrotic tissue which had no cells and fibers, was present adjacent to the dressing. This was followed by dried out fibrous tissue with no cellular details except some pyknotic nuclei, A short stump of vital pulp with odontoblasts was present at the end of the canal after 2 days. Inflammatory infiltrate was in the periodontal ligament after 4 days and after 1week. Severe root resolution and necrosis of periapical tissue opposite the root resorption site were defined after 2 weeks and after 3 weeks. Periapical lesion which consist of necrotic tissue surrounded by a fibrous connective wall, was found after 4 weeks. The results indicated that Depulpin can cause more adverse reaction to the dental pulp and periapical tissue than formocresol, and further studies are needed for its clinical use with safety.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제46권4호
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• pp.571-584
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• 2004

난포폐쇄는 과립층세포와 난포막세포들의 아포토시스에 의해 이루어지고, 이 과정에 대식 세포는 아포토시스 소체들의 포식작용과 각종 사이토카인 분비를 통해 난포폐쇄의 개시와 완성에 직, 간접적으로 관여함이 널이 보고되어 있다. 그러나 난포 폐쇄시 일어나는 아포노시스가 어디에서부터 개시되고, 어떻게 파급되는지, 아포토시스 소체의 제거방법, 퇴화된 난모세포의 제거 방법, 이들을 제거하는 대식세포의 난포내 진입 시기와 방법 등에 대해서는 아직 확실히 밝혀져 있지 않다. 이에 저자들은 가임기 돼지(Yorkshire-breed)를 실험동물로 난소내 난포의 광학현미경적 및 투과전자현미경적 관찰과 TUNEL 및 돼지 대식세포 단크론항체 4E9를 이용한 면역조직화학적 방법으로 본 연구를 실시하였다. 본 연구 결과, 난포 폐쇄는 과립층세포의 아포토시스로부터 개시되고 그 시기에 난포막 속층 세포들의 아포토시스도 같이 일어나는 것으로 관찰되었다. 과립층세포의 아포토시스는 당해 세포의 과립층내 위치에 관계없이 핵농축으로부터 시작되고 짧은 시간안에 과립층 전체로 파급되고 난모세포를 둘러싸고 있는 괴립층세포의 아포토시스가 가장 마지막에 일어나는 것으로 보인다. 난포 과립층세포의 아포토시스는 핵의 농축과 변형, 세포내 소포들의 출현이 특징적이었고, 아포토시스 소체들은 인접한 정상적인 과립층세포와 대식세포들에 의해 포식되었다. 아포토시스 소체들을 포식한 정상 괴립층세포는 자신도 곧 아포토시스를 일으켜, 이들의 포식작용은 일시적인 것으로 생각된다. 또한 모든 아포토시스 소체들과 퇴화된 난모세포는 대식 세포들이 제거함을 알 수 있었다. 대식세포는 아포토시스의 개시와 함께 난포내로 진입하고, 그 진행과 함께 난포내 모든 부위로 이동하여 아포토시스 소체들과 퇴화 난모세포를 제거하는 것으로 보인다. 처음부터 난포막에 있던 일부 대식세포들은, 아포토시스를 일으켜 난포 바닥막을 와해시킨 난포막세포들의 아포토시스 소체들을 제거하여, 폐쇄된 난포의 난소 실질화를 통해 난포 폐쇄의 완성에 기여하는 것으로 보인다.

• 한국환경농학회지
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• 제20권3호
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• pp.155-161
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• 2001

Paraquat와 bentazone이 횐쥐의 간조직과 NIH 3T3 섬유모세포에 미치는 독성과 그 독성에 대한 3-MC의 보상효과를 조사하기 위하여 NIH 373 섬유모세포에 적응한 후 경시적으로 MTT분석을 이용하여 세포독성을 측정하고 Sprague Dawley계 웅성 횐쥐에 paraquat와 bentazone단독 및 paraquat 및 bentazone과 3-MC를 병용투여한 후 경시적으로 관찰한 결과 paraquat와 bentazone은 NIH 3T3 섬유모세포에 대하여 $IC_{50}$값이 각각 1668.97 ${\mu}M$, 1506.97 ${\mu}M$으로 Borenfreund의 독성평가기준에 의하면 저독성이었다. Paraquat와 bentazone 단독투여군의 H&E 염색에서 3시간째에는 문맥 주위 세포들이 변성을 일으키고 별모양 세포들이 증가하였으나 12시간째에는 간소엽 전체의 세포들이 변성을 일으켰으며 48시간째에는 더욱 심한 변성이 일어났다. 특히 bentazone 투여 후 48시간째에는 핵농축현상이 뚜렷하였다. Best carmine 염색에서 glycogen 과립을 함유하는 간세포들도 3시간째에는 문맥주위의 세포들이, 12시간째에는 간소엽 전체의 간세포들이, 48시간째에는 전체의 간세포들이 함유하는 glycogen 과립량이 현저히 증가하였다. 3-MC를 paraquat와 bentazone과 동시에 투여한 군에서 3시간째와 12시간째에는 단독투여군과 유사하였으나 48시간째에는 bentazone과 3-MC 동시투여군의 문맥주위의 간세포들이 재생되는 경향이었으며 paraquat와 3-MC를 동시에 투여한 군에서는 중심정맥 주위의 세포들만이 glycogen과립을 함유하고 있어 단독 투여군과 뚜렷한 차이를 관찰할 수 있었다. 이 결론에서 3-MC는 paraquat와 bentazone에 의한 간세포의 독성을 경감시킬 수 있는 물질임을 알 수 있었다.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제33권3호
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• pp.247-256
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• 2008

일상생활에서 우리는 항상 스트레스에 노출되어 있으며, 스트레스에 대한 반응은 우리 삶의 질과 건강에 중요한 영향을 미친다. 특히 정서적으로 중요한 구강안면영역에도 다양한 스트레스성 질환이 존재한다. 그러나 스트레스와 질병에 관한 오랜 연구에도 불구하고 스트레스성 구강안면질환의 병인은 아직 명확하지 않다. 이에 저자는 최근 임상의학에서 관심이 집중되어지고 있는 스트레스와 질병에 대한 분자생물학적 접근의 일환으로 스트레스성 구강안면질환의 병인을 규명하고자 본 연구에 임하였다. 즉, 스트레스 단백질로 알려진 clusterin이 스트레스의 생리적 반응으로서 세포보호작용 결과 발현된다는 사실에 기초하여, 스트레스 부여 후 타액선 조직 내에서의 그 발현변화를 추적하였다. Sprague-Dawley계 웅성 백서(200-230g/bw)를 구속 스트레스 부여군(구속장치에 구속한 후 0, 3, 5일에 희생) 및 정상군으로 나누고, 각각 악하선을 적출하였으며, 면역조직화학법 및 Northern Blot을 이용하여 Clusterin의 변화를 관찰하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 구속 스트레스 부여군의 clusterin 단백질은 실험 즉일군에서 증가되었고, 그 이후에는 감소되었다. 2. 구속 스트레스 부여 3일군과 5일군에서 핵붕괴 및 핵농축 등의 핵변화를 동반한 apoptosis가 유도되었다. 3. 구속 스트레스 부여 결과, 선포세포가 도관세포보다 일찍 세포사하였다. 4. 구속 스트레스 부여군의 clusterin mRNA는 실험 즉일군에서만 미약하게 관찰되었다. 즉, 타액선 조직은 스트레스 단백질인 clusterin을 생산하여 세포를 보호함으로써 스트레스 상황에 적응하지만, 생리적 적응한계를 넘는 스트레스에 노출될 때에는 조직이 apoptosis됨이 확인되었다. 따라서, 본 연구결과는 구강건조증등 스트레스성 타액선관련 증상 및 질환의 병리적 기전에 대한 규명에 도움이 되리라고 생각하며, 또한 clusterin은 향후 생체에 가해진 스트레스에 대한 표식자(marker)로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제18권2호
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• pp.200-205
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• 2008

본 연구는 한방초콩환의 고지방식이를 섭식한 흰쥐의 간조직 지방제거 효과를 관찰하기 위하여 서목태(Rhynchosia nulubilis)를 식초에 15일간 절인 후, 5종류의 한약재(감초, 산조인, 백출, 황기, 산수유)를 첨가하여 한방초콩환을 제조하고, 고지방식이로 흰쥐의 비만을 유도하면서 고지방식이에 한방초콩환을 1%와 5% 첨가하여 9주 동안 투여한 후 간장의 무게, 혈청 효소활성도 및 간세포의 미세구조를 투과형전자현미경(TEM)으로 관찰하였다. HF군은 정상군의 간 무게에 비하여 약 35% 증가된 반면에 T5군의 경우는 HF군에 비하여 약 13% 감소하였다. 혈청 중 GOT 활성도는 정상군과 HF군이 비슷한 수준이었으나 T1군과 T5군에서는 HF군에 비하여 각각, 6.1%, 17.8% 감소하였으며 혈청 중 GPT 활성도 역시 정상군과 HF군이 거의 비슷한 수준이었으나 T1군과 T5군에서는 HF군에 비하여 각각 25.4, 32.4% 감소하였다. 간세포조직의 지방축적 정도 및 형태적 특징을 전자현미경으로 관찰한 결과, 정상군의 모양은 원형 내지 다각형을 나타내고 핵은 크고 둥글며 세포의 중앙에 위치해 핵질이 고르게 발달해 있을 뿐만 아니라 세포질에는 미토콘드리아를 비롯한 각종 세포 소기관이 고루 분포되어 있었으며 세포 전반에 걸쳐 지방구는 보이지 않았다. HF군은 세포전반에 걸쳐 지방구에 뒤덮여 세포의 형태 관찰이 불가능할 정도였으며 지방의 과잉 축적으로 인한 전자밀도가 낮아 백색을 나타내어 세포소기관의 막과 형태가 불분명한 지방간의 심각한 양상을 볼 수 있었다. T1군은 HF군에 비하여 지방구가 많이 소멸되었으며, T5군은 T1군에 비하여 지방세포의 크기와 수가 현저히 줄어든 것이 관찰 되었고, 더욱더 선명한 핵과 핵막 및 세포질의 전자밀도가 높아 지방질의 감소를 볼 수 있었다.

• 한국축산식품학회지
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• 제40권6호
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• pp.1014-1032
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• 2020

This work aimed to investigate the psychobiotic effects of six bacterial strains on the mind and behavior of male Wistar rats. The probiotic (PRO) group (n=7) were rats pre-treated with antibiotics for 7 days followed by 14-day probiotic administration, antibiotics (ANT) group (n=7) were rats treated with antibiotics for 21 days without probiotics. The control (CON) group (n=7) were rats that received sham treatment for 21 days. The six bacterial strains with probiotic properties were mostly isolated from Thai fermented foods; Pedicoccus pentosaceus WS11, Lactobacillus plantarum SK321, L. fermentum SK324, L. brevis TRBC 3003, Bifidobacterium adolescentis TBRC 7154 and Lactococcus lactis subsp. lactis TBRC 375. The probiotics were freeze-dried into powder (6×10⁹ CFU/5 g) and administered to the PRO group via oral gavage. Behavioral tests were performed. The PRO group displayed significantly reduced anxiety level and increased locomotor function using a marble burying test and open field test, respectively and significantly improved short-term memory performance using a novel object recognition test. Antibiotics significantly reduced microbial counts in rat feces in the ANT group by 100 fold compared to the PRO group. Probiotics significantly enhanced antioxidant enzymatic and non-enzymatic defenses in rat brains as assessed using catalase activity and ferric reducing antioxidant power assay, respectively. Probiotics also showed neuroprotective effects with less pyknotic cells and lower frequency of vacuolization in cerebral cortex. This multi-strain probiotic formulation from Thai fermented foods may offer a potential to develop psychobiotic-rich functional foods to modulate human mind and behaviors.

• Journal of Radiation Protection and Research
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• 제21권4호
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• pp.273-284
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• 1996

착상전기(着床前期}의 태아(胎兒)는 방사선(放射線)을 비롯한 많은 환경요인(環境要因)에 대하여 감수성(感受性)이 높은 개체(個體)임에도 불구하고 특히 이 시기는 임신부(姙娠婦)가 자각(自覺)적으로 임신을 감지할 수 없는 시기이기에 이러한 여러 환경유해요인으로부터 의도적으로 피할 수가 없다. 그러므로 착상전기의 영향을 충분히 검토한 후에 의료행위를 취할 것이며 이에 대한 방어(防禦)대책도 검토할 필요가 있다. 종래 까지 방사선에 대한 태아영향에 관한 많은 연구결과에 의하면 방사선 및 그 외의 유해요인에 대한 착상전기의 영향은 배사망(胚死亡)(유산(流産))만이 일어나며 기형(奇形)은 유발(誘發)하지 않는다고 하여 발생학(發生學)등 여러 교과서에서 기형은 기관형성기(器官形戚期)만이 국한(局限)해서 일어나는 영향이라고 단정되어 왔었다. 그러나 이 연구결과 착상전기에 있어서도 기형이 유발하여 오히려 기관형성기((器官形成期)보다도 감수성이 높다는 것이다. 또한 착상전기에서도 기형유발의 시기특이성을 가지며 여러 종류의 기형이 발생한다는 것이 본 연구로부터 밝혀졌다. 실험동물은 ICR Mouse를 사용했다. ICR Mouse는 일반적으로 태아사망 및 기형실험에 널리 사용되는 것이다. 사육조건은 Conventional 한 조건하에서 사육했으며 Mating 방법(方法)은 Female 마우스의 발정기(Sexual Excitement period)에 있는 mouse 질(膣)을 육안 적으로 관찰하여 $AM 6:00{\sim}AM 9:00$시까지 3시간만 mate시켰다. AM9:00시에 Vaginal Plug를 관찰하여 임신을 확인했다. Plug가 확인 된 마우스는 AM8:00시에 수정(Conception)된 것으로 가정하고 이 시점을 임신 0일 0시로 수정 난의 태아연령을 산정했다. 방사선조사는 $^{135}Cs\;{\gamma}-$선을 사용하였으며 임신 마우스의 전신조사를 실시하고 조사한 시기는 각 2, 48, 72, 96hpc이며 조사한 방사선 선량 군은 $0.1{\sim}2.5Gy$이다. 태아영향 관찰지표는 태아 연령은 mate일 오전 8:00시를 임신 0일 0시로 환산하여 태아연령 18일에 임신마우스를 Cervical vertebral dislocation에 의해 도살했다. 도살 후 해부하여 각 임신 마우스별로 관찰했다. 착상 율을 관찰하기 위하여 황체수를 세었고, 태아사망과 생존태아를 구별했다. 자궁 내 사망의 분류는 태아사망을 1) preimplantation death 2) Embryonic death 3) Fetal death로 분류했다. 착상전사망은 수정후 $0{\sim}4.5$일(1세포기${\sim}$배반포후기 부화까지)까지의 사망으로써 난소의 황체수(배란 수)와 착상태아(생존태아, 착상흔, 태반유잔, 흡수태아, 침연태아의 합계)로부터 구할 수 있다. Embonic death는 수정 후 $4.5{\sim}13$일까지의 사망으로써 Implantation sites, Placental remnants, Resorption of fetus로 관찰된 것이다. Fetal death는 수정후 $14{\sim}18$일까지의 사망으로써 Maceration of fetus로 관찰되는 것이다. 통계학적 분석은 각 Group의 착상 을과 자궁 내 사망 율을 산출할 때에는 각 임신마우스에 따라 발생빈도가 크게 다르기 때문에 통계처리에는 Non parametric 검정인 Kluskal Wallis 검정을 사용하여 분석하였다. 또한 개체 Level 영향인 착상을, 태아사망, 기형의 threshold dose의 산정에 대해서는 SAS-Logistic 검정에 따라 통계 분석을 하여 $5%(Ld_5,\;ED_5)$ 및 $10%{\times}2/3$점을 threshold dose로 판단했다. 태아체 중에 대해서는 parametric검정인 t-test검정에 의하여 분석했다. 그 결과 착상전기에서도 기형이 유발하며 특히 시기에 따라 일어나는 때와 일어나지 않는 때가 있음을 본 연구로부터 밝혀졌다. 또한 착상전기의 영향으로써 유발되는 기형은 여러 종류의 기형이 발생함이 밝혀졌다. 특히 이시기는 착상전 사망 및 배(胚)사망은 방사선 선량에 따라 크게 일어나나 태아사망(Fetal death) 및 태아체중은 유의차(有意差)가 없었다.