본 연구에서는 늙은 호박의 효소처리 조건에 따른 추출특성을 조사하였다. 그 결과, pectinase에 의한 영향에서는 효소제 처리를 한 모든 구가 대조구보다 품질 특성이 우수하였으며, 특히 0.15%(w/w) pectinase 처리구의 품질특성이 가장 높게 분석되었다. 혼합 효소제 처리에서는 pectinase와 cellulase의 단독 처리구에 비해 pectinase와 cellulase의 혼합 효소제의 추출율이 높게 나타났다. 최적 효소제 처리조건 설정을 위한 늙은 호박의 추출조건(I~IV)에서 추출물의 수율은 pectinase와 cellulase를 혼합 처리한 구(III)에서 86.94%로 가장 높게 나타났으며, 가용성 고형분 및 pH는 모든 처리구에서 비슷한 경향을 보였다. 환원당과 전당 함량은 각각 2.81, 4.60%로 나타난 효소제 혼합 처리구(III)가 높았으며 total carotene은 pectinase 처리구가 5.36mg%로 높은 함량을 나타내었다. 모든 처리구에 대한 아질산염소거능 결과는 pH 6.0을 제죄한 pH 1.2, 3.0, 4.0에서 소거능이 있는 것으로 나타났고 유리 아미노산 분석에서는 총 함량이 176.85, 171.89 mg%인 II, III 처리구가 무처리구에 비해 높은 함량으로 분석되었으며 citrulline은 I, IV 처리구에서는 분석되지 않았으나 II, III 처리구에서는 1.61, 1.4l mg%로 분석되었다. 이상의 결과로 늙은 호박의 추출조건으로는 무처리구보다는 효소제를 처리한 구에서 높은 수율 및 품질의 우수성이 인증되었으며 그 중 III 처리구인 pectinase와 cellulase(0.15 : 0.05, %)를 혼합하여 추출함으로써 추출율 및 품질특성이 우수한 추출물을 얻을 수 있을 것으로 생각된다.
민간약으로 사용되는 당호박의 물 추출물에 대하여 실험한 결과 500mg/kg 투여군에서 carrageenan에 의한 부종에 대하여는 42.1%의 억제효과를 보였고, 고지방 식이에 의해 상승된 혈중 cholesterol과 triglyceride의 함량을 각각 20.1%와 35.3% 감소시킨 반면 HDL-cholesterol의 함량을 43.1% 증가시킴으로 고지혈증에 대하여 유의성 있는 억제효과를 나타내어 당호박의 부종 및 고지혈증의 치료에 대한 약용가치는 충분하다고 사료된다.
Glutathione S-transferases(GSTs, EC 2.5.1.18), glyoxalase-I(EC 4.4.1.5) and alliin lyase(alliinase, EC 4.4.1.4) are important enzyme systems in plant bodies. The first two are mainly detoxifying enzymes that utilize glutathione(GSH) in the defense mechanism, and the last one is mainly involved in secondary metabolism and relevant to sulfur compounds derived from GSH. The activities of the three enzymes have been investigated in soluble extracts of vegetable crops, including pumpkin, cabbage, broccoli, radish, carrot, potato, sweet potato, mungbean, and onion. GST activities were detected in all of the vegetables, and the extract of onion bulb exhibited the highest specific activity(648 nmol/min/mgP). The putative GSTs of most of the vegetables were found to be induced by ethanol. The activities of GSTs in onion bulb were found to be markedly inhibited by S-hexyl glutathione and were also inhibited by S-butyl glutathione and S-propyl glutathione. The anti-CmGSTF1 antiserum recognized a thick band for putative onion GST. The estimated glyoxalase-I activity level was also high in onion bulb(4540 nmol/min/mgP), indicating that the thick band detected by Western blot analysis might result from partial recognition of glyoxalase-I by the antiserum. The specific activities for glyoxalase-I were moderate in radish and carrot, and the extracts of other vegetables had rather low levels of activities. The extract of onion also showed the highest specific activity level for alliinase(2069nmol pyruvate/mgP). The extracts of other vegetables also had alliinase activities, although the estimated values were much lower than that of onion.
본 연구에서는 흰점박이꽃무지 함유 음료의 총폴리페놀함량과 항산화활성(DPPH 라디칼 소거능, TRAP, ORAC assay, comet assay) 및 사용에 대한 안전성을 검증하기 위하여 ICR mouse를 사용하여 흰점박이꽃무지 무첨가군과 첨가군 단회 투여(2 g/kg) 시 나타나는 치사율, 체중, 생리적 증상, 장기무게, 생화학적 분석(triglyceride, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, aspartate transaminase, alanine transaminase)을 통해 급성독성시험을 실시하였다. 흰점박이꽃무지를 함유한 호박, 알로에, 돼지감자음료 1 pack의 총 페놀함량은 66.35~100.98 mg/pack, DPPH 라디칼 소거능은 67.1~90.0%/1 pack, TRAP 값은 $1.46\sim1.54{\mu}M$/trolox equivalent(TE)를 보였으며, 모든 음료의 ORAC 값은 1500보다 높았다. 모든 음료는 인체 임파구에서 세포독성을 보이지 않았으며, $H_2O_2$에 대한 DNA 손상에 대한 보호효과는 유의적이었다. 흰점박이꽃무지 첨가/무첨가 음료의 ICR mouse 암수 각각에 경구투여(2 g/kg) 후 14일까지 치사된 실험동물은 관찰되지 않았으며, 체중, 생리적, 병리적 및 생화학적 분석에서 대조군과 비교 시 그룹들 간의 유의한 변화는 관찰되지 않았다. 그러므로 2 g/kg의 흰점박이꽃무지 첨가/무첨가 음료를 ICR mouse에 단일 경구투여시 독성이 없는 것으로 판명되었다. 본 연구에서 규명된 흰점박이꽃무지 함유 음료의 항산화활성과 안전성은 산업적측면에서 약용 및 식용 자원으로 적극적인 활용을 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 국내에서 재배되고 있는 컴프리의 형태학적 특성 및 pyrrolizidine alkaloids을 분석하기 위해서 수행되었다. 국내에서 채취한 12개 지역의 컴프리를 대상으로 형태학적 인 연구를 실시한 결과 모두 한 종류의 Symphytum officinale임을 확인할 수 있었다. 또한 이들 시료를 hot methanol과 ultra-sonification으로 추출하여 pyrrolizidine alka loids 함유 여부를 확인하기 위하여 TLC 시험을 실시한 결과, 12개 시료의 컴프리는 o-chloranil과 Ehrlich's reagent의 발색시약이 pyrrolizidine alkaloids와 반응하여 특이적인 purple spot을 나타내었다. 그러나 치커리, 호박잎 및 깻잎을 사용하여 동일한 시험을 실시한 결과 purple spot이 관찰되지 않음을 알 수 있었다. HPLC 패턴을 분석 결과, 12개 시료의 컴프리는 retention time 30 부근에 특이적인 peak를 나타내었으나, 치커리, 호박잎 및 깻잎은 peak를나타내지 않았다. 따라서 국내 재배중인 컴프리 12종은 형태학적 특성 및 pyrrolizidine alkaloids로 조사한 결과, S. officinale 종임을 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 늙은호박(Cucurbita moschata Duch.)의 부위별 항산화 효과 및 생리활성을 평가하기 위하여 잎과 과피, 과육과 씨 네 부분으로 나누어 일반성분을 측정하고, 환류 추출과 감압농축 및 동결건조를 통하여 분말을 얻은 후 실험에 사용하였다. 호박의 부위별 총 폴리페놀 함량은 잎이 $29.62{\pm}0.88mg$ GAE/g DM로 가장 높게 측정되었다. 플라보노이드 함량도 잎이 가장 높고 과피, 과육, 씨의 순서로 측정되어 폴리페놀 함량과 같은 경향을 보였다. DPPH radical 소거 활성과 ABTS radical 소거 활성에서 SC50값을 측정하였을 때는 잎에서 가장 높은 소거 활성을 나타내었다(DPPH: $1.27{\pm}0.14$, ABTS: $2.28{\pm}0.05$). FRAP assay를 이용한 환원력을 실험한 결과에서도 잎에서 가장 높은 환원력이 관찰되었다. 한편, 생리활성적인 측면 중 tyrosinase 효소 억제 활성 능력은 대조군인 kojic acid와 비교하였을 때 같은 농도인 0.1 mg/mL에서 20.70%이었던 반면 실험군인 잎은 49.58%, 과육은 40.20%을 보였고, 과피는 41.30%, 씨는 36.79%가 관찰되어 모두 이보다 높은 수치를 나타냈으므로 kojic acid 보다 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다. 최종당화산물(AGEs) 생성억제 효능에서는 잎(65.85%), 과피(50.14%), 과육(13.72%), 그리고 씨(11.18%)의 순서로 관찰되었다. ${\alpha}$-Glucosidase 저해활성은 씨 부분의 저해활성이 63.58%로 67.28%를 나타낸 대조군 0.06 mM acarbose에 근접한 수치를 나타내었다.
Korean dishes, Hansik are characterized by healthful vegetable intake. The purpose of this study was to evaluate the inhibitory effect of commonly consumed vegetables by Koreans on obesity/metabolic disease-related inflammation. Through statistical analysis of the KNHANES database ($1^{st}$ 1998, $5^{th}$ 2010, 2011) and a literature review, we selected vegetables for study. Among the vegetables, main or sub ingredients of Kimchi were excluded. Samples were prepared using only edible portions and freeze-dried. After grinding, samples were extracted with ethanol, evaporated and finally lyophilized. The cytotoxicity of samples was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, at various concentrations that do not affect cell viability. Raw 264.7 macrophages were treated with lipopolysaccharide (LPS) and 11 kinds of samples or positive control (troglitazone) dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO). After 24 hours, nitric oxide (NO), tumor necrosis factor ${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) production were determined. Excepts for young pumpkin and bracken, nine samples effectively reduced NO production compared with control treated with LPS and DMSO. NO levels of five samples (bean sprouts, leeks, eggplant, mugwort, and pumpkin) were similar to that of the positive control. These five samples showed significantly decreased TNF-${\alpha}$ or MCP-1 compared to the control group. Our results suggest that consumption of commonly consumed vegetables contributes to partial prevention of obesity and related metabolic syndrome through reduction of NO, TNF-${\alpha}$, and MCP-1 production.
애호박의 부위 중 덩굴손 유래의 열수 추출물에 대한 세포 독성 및 염증제어활성 대하여 조사하였다. 애호박 덩굴손의 열수에 대한 세포의 독성에 미치는 영향을 조사한 결과 0.313-2.5 mg/mL의 농도일 때 물 추출물은 세포의 생장에 영향을 미치지 않아 세포에 대한 독성이 없다고 판단되었다. BMDMs를 배양한 세포에 호박덩굴손 열수 추출물과 LPS와 함께 처리한 결과 염증성 사이토카인인 IL-6 및 TNF-${\alpha}$의 농도 의존적으로 감소함을 확인하였다. 호박 덩굴손 열수 추출물로부터 단리 정제된 rutin에 의한 염증성 사이토카인의 분비가 억제되었다. 국내에서 재배되고 있는 호박의 부위별로 조사해본 결과 호박부위 중 유일하게 덩굴손부분에서 염증억제 활성을 보였다. 쥬키니 호박, 애호박 및 늙은 호박의 덩굴손에서 유효성분인 rutin을 함유하고 있었고 향후 염증 억제 소재로서의 활용가능성을 시사하였다.
갓김치에 항산화 성분의 함량이 높은 부재료를 첨가하여 기능성이 증진된 갓김치를 개발하기 위하여 본 연구를 행하였다. 부재료로 선정된 녹차 및 늙은호박을 분말로하여 이들의 첨가비를 달리 한 갓김치를 제조한 후 chlorophyll, carotenoids, 총 페놀 및 비타민 C 함량을 담금 직후와 적숙기에 측정하여 부재료 첨가에 따른 갓김치의 항산화 성분 함량을 비교 연구하였으며 , 그 결과 늙은호박분말 0.3%와 녹차분말 0.2%을 첨가한 갓김치구가 높은 함량을 나타내었다. 이에 늙은호박분말 0.3%와 녹차분말 0.2%을 첨가한 갓김치구를 대조구과 함께 비교하면서 항산화성에 대한 실험을 행하였다 항산화성 실험은 갓김치를 담은 첫날과 적숙기에 행하였으며, 그 결과 거의 모든 실험에서 대조구보다 녹차 및 늙은호박을 첨가한 갓김치구가 항산화성을 나타내는 산화에 대한 저해율이 높게 나타났다. 담금 첫날 갓김치 구보다 적숙기의 갓김치구가 힝산화성이 높았는데, linoleic acid 자동산화에 대한 억제효과는 담금 첫날 대조구의 저해율 42.81%보다 늙은호박분말 0.3%와 녹차분말 0.2% 첨가 처리구가 46.95%로 더 높았으며, 적숙기에는 대조구는 58.63%, 처리구는 65.91% 으로 적숙기의 처리구가 다른 군에 비해 가장 높았다. Conjugated diene생성 억제효과는 적숙기의 처리구는 55.50%로 가장 높았고, LDL 산화 저해효과, TBA가 측정 결과도 적숙기의 녹차 및 늙은호박분말 첨가구가 가장 높은 저해율을 나타내었다. 그리고 DPPH 소거효과에서 담금 첫 날 대조구의 51.23%에 비해 적숙기의 처리구는 76.81%로 저해율이 아주 높게 측정되었는데 이는 부재료 첨가 갓김치구는 DPPH에 대한 강한 소거작용을 하는 것으로 보인다. 따라서 이상과 같은 실험 결과를 종합할 때 갓김치에 녹차 및 늙은호박분말을 첨가함으로써 첨가하지 않은 갓김치 대조구에 비해 항산화 관련 성분의 함량도 증가하였고, 또한 항산화성 실험 에서도 산화에 대한 저해율이 높게 나타났으며 그 중에서도 갓김치에 늙은호박분말 0.3%와 녹차분말 0.2% 첨가 갓김치구가 가장 우수하였고 특히 적숙기에 가장 높은 항산화성을 보이는 것으로 나타났다.
늙은 호박을 최적의 추출조건에서 추출물을 얻고자 반응표면분석을 이용하여 추출조건을 최적화하였다. 중심합성 계획에 따라 요인변수로 마이크로웨이브 에너지(30~150 watt), 에탄올 농도(0~100%) 및 추출시간(1~9분)을 달리하고, 전자공여작용, tyrosinase 저해효과, SOD 유사활성 및 총 폴리페놀 함량을 종속변수로 하여 추출하였다. 추출 결과 종속변수에 따라 회귀식의 $R^2$이 각각 0.7035, 0.7748, 0.9496 및 0.9219로 나타나 SOD 유사활성과 총 폴리페놀 함량의 유의성이 인정되었다. 종속변수인 전자공여작용, tyrosinase 저해효과, SOD 유사활성 및 총 폴리페놀 함량 모두 마이크로웨이브 에너지의 영향이 가장 큰 것으로 나타났다. 네 가지 종속변수의 극대값을 얻기 위한 최적 추출조건의 범위는 4차원 반응표면분석을 superimposing하여 얻었다. 그 결과 최적 추출조건이 마이크로웨이브 에너지 72~144 watt, 에탄올 농도 0~38%, 추출시간 6~9분의 범위를 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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