A large portion of total energy expenditure associated with ruminant livestock production goes towards maintenance. Approximately 55% of whole body energy use is consumed by visceral tissues (including internal organs) with the majority of this going to the liver and gastrointestinal tract. Muscle and adipose tissues consume about 27% of total body energy expenditure. Metabolic components within the viscera responsible for the majority of energy consumption include ion transport, protein turnover, substrate cycling, and urea synthesis (liver). Within muscle tissue of growing animals ion transport and protein turnover account for most of the energy expenditure. Protein synthesis consumes approximately 23% of whole body energy use and visceral tissues account for proportionally more of whole body protein synthesis than skeletal muscle. Research efforts focused on improving energetic efficiency of the tissues and metabolic mechanisms responsible for the majority of whole animal energy expenditure should provide information leading to more efficient production of an edible product.
β-1,3-glucanosyltransferases play essential roles in cell wall biosynthesis in yeast. Kluyveromyces lactis has six putative β-1,3-glucanosyltransferase genes. KlGAS1-1 and KlGAS1-2 are homologs of Saccharomyces cerevisiae gene GAS1. RT-qPCR indicated the transcription level of KlGAS1-1 was significantly reduced while heterologous protein (thermostable xylanase B) secretion was enhanced during medium optimization. To evaluate if these two events were related, and to improve xylanase B secretion in K. lactis, we constructed KlGAS1-1 and KlGAS1-2 single deletion strains and double deletion strain, respectively. KlGAS1-1 gene deletion resulted in the highest xylanase B activity among the three mutants. Only the double deletion strain showed morphology similar to that of the GAS1 deletion mutant in S. cerevisiae. The two single deletion strains differed in terms of cell wall thickness and xylanase B secretion. Transcription levels of β-1,3-glucanosyltransferase genes and genes related to protein secretion and transport were assayed. The β-1,3-glucanosyltransferase genes displayed transcription complementation in the cell wall synthesis process. KlGAS1-1 and KlGAS1-2 affected transcription levels of secretion- and transport-related genes. Differences in protein secretion ratio among the three deletion strains were associated with changes of transcription levels of secretion- and transport-related genes. Our findings indicate that KlGAS1-1 deletion is an effective tool for enhancing industrial-scale heterologous protein secretion in K. lactis.
This study was conducted to investigate stimulatory effect of epidermal growth factor (EGF) on nuclear maturation and the expression level of EGF-receptor (EGFR), GM-130 (a marker of Golgi apparatus), transport protein Sec61 subunit beta ($Sec61{\beta}$), and coatomer protein complex subunit gamma 2 (COPG2) in porcine oocytes. The cumulus-oocyte complexes were collected from follicle with 3-6 mm in diameter. They were incubated in medium with/without EGF for 22 h (IVM I) and subsequently incubated hormone-free medium with/without EGF for 22 h (IVM II). Nuclear maturation state was checked by aceto-orcein stain. Protein expression of EGFR, GM-130, $Sec61{\beta}$, and COPG2 were measured by immunofluorescence. In results, nuclear maturation of oocytes in EGF non-treated oocytes were significantly lower than EGF-treated groups at IVM I or IVM II stage (P<0.05), whereas maturational rate in EGF treatment groups at both of IVM stage was higher in among the all treatment groups (P<0.05). EGFR, GM-130, $Sec61{\beta}$ and COPG2 were expressed in the cytoplasm of oocytes. Especially, GM-130 and EGFR were strongly expressed, but $Sec61{\beta}$ and COPG2 were weakly expressed in cortical area of cytoplasm. The protein level of GM-130, $Sec61{\beta}$, and COPG2 were significantly higher in the EGF-treated groups (P<0.05). However EGFR was no difference between non EGF-treated groups and control. In conclusion, EGF plays an important role in the systems for oocyte maturation with endoplasmic reticulum and Golgi apparatus. In addition, the protein levels of $Sec61{\beta}$ and COPG2 could be changed by EGF in the porcine oocytes during maturation.
Brazilin shows hypoglycemic effect in diabetic animals through enhancement of glucose metabolisms in insulin responsive tissues. One of the major mechanisms of brazilin to enhance glucose metabolism is stimulation of glucose transport in adipocytes. In this study, the essential molecular moiety of brazilin for the stimulation of glucose transport was investigated. We found that brazilin undergoes a structural change in physiological buffer and produces hydrogen peroxide. Methylation of hydroxyl group of brazilin or addition of catalase along with brazilin resulted in the complete inhibition of brazilin-induced glucose transport in adipocytes. Because hydrogen peroxide increases glucose transport by inhibition of phosphatases, we examined the effect of brazilin on phosphatase activity. Brazilin inhibited phosphatases in a wide range of activity, and protein phosphatase 1 and 2A were also inhibited. These results suggest that the production of hydrogen peroxide by oxidation of catechol hydroxyl group of brazilin mediates glucose transport through inhibition of phosphatases which otherwise decrease glucose transport in adipocytes.
The purpose of the present study was to investigate the bidirectional transport of 1-anilino-8-naphthalene sulfonate (ANS) using isolated rat hepatocytes. The initial uptake rate of ANS by isolated hepatocytes was determined. The uptake process of ANS was saturable, with a $K_m of 29.1\pm3.2 \mu M and V_{max} of 2.9\pm0.1$ mmol/min/mg protein. Subsequently, the initial efflux rate of ANS from isolated hepatocytes was determined by resuspending preloaded cells to 3.0% (w/v) BSA buffer. The efflux process for total ANS revealed a little saturability. The mean value of the efflux clearance was $2.2\pm0.1 \mu$ L/min/mg protein. The efflux rate of ANS from hepatocytes was markedly decreased at $4^{\circ}C$, indicating that the apparent efflux of ANS might not be attributed to the release of ANS bound to the cell surface, but to the efflux of ANS from intracellular space. The efflux clearance was furthermore corrected for the unbound intracellular ANS concentration on the basis of its binding parameters to cytosol. The relation between efflux rate and unbound ANS concentration was fitted well to the Michaelis-Menten equation with a saturable and a nonsaturable components. The $V_{max} and K_m$ values were 0.54 mmol/min/mg protein, and 10.0 $\mu$ M, respectively. Based on the comparison of the ratios of $V_{max} to K_m (V_{max}/K_m)$ corresponding to the transport clearance, the influx clearance was two times higher than the efflux clearance. Together with our preliminary studies that ATP suppression in hepatocytes substantially inhibited ANS influx rate, we concluded that the hepatic uptake of ANS is actively taken up into hepatocytes via the carrier mediated transport system.
The baculovirus/insect cell expression system is of great value for the large-scale production of normal and mutant mammalian passive glucose-transport proteins heterologously for structural and functional studies. In most mammalian cells that express HepG2, this transporter isoform is predominantly located at the cell surface. However, it had been reported that heterologous expression of other membrane proteins using the baculovirus system induced highly vacuolated cytoplasmic membranes. Therefore, how a cell responds to the synthesis of large amounts of a glycoprotein could be an interesting area for investigation. In order to examine the subcellular location of the human HepG2 transport proteins when expressed in insect cells, immunofluorescence studies were carried out. Insect cells were infected with the recombinant baculovirus AcNPVHIS-GT or with wild-type virus at a MOI of 5, or were not exposed to viral infection. A high level of fluorescence displayed in cells infected with the recombinant virus indicated that transporters are expressed abundantly and present on the surface of infected Sf21 cells. The evidence for the specificity of the immunostaining was strengthened by the negative results shown in the negative controls. Distribution of the transporter protein expressed in insect cells was further revealed by making a series of optical sections through an AcNPVHIS-GT-infected cell using a confocal microscope, which permits optical sectioning of cell sample. These sections displayed intense cytoplasmic immunofluorecence surrounding the region occupied by the enlarged nucleus, indicating that the expressed protein was present not only at the cell surface but also throughout the cytoplasmic membranous structures.
The response of Spirulina (Arthrospira) platensis to high salt stress was investigated by incubating the cells in light of moderate intensity in the presence of 0.8 M NaCl. NaCl caused a decrease in photosystem II (PSII) mediated oxygen evolution activity and increase in photosystem I (PSI) activity and the amount of P700. Similarly maximal efficiency of PSII (Fv/Fm) and variable fluorescence (Fv/Fo) were also declined in salt-stressed cells. Western blot analysis reveal that the inhibition in PSII activity is due to a 40% loss of a thylakoid membrane protein, known as D1, which is located in PSII reaction center. NaCl treatment of cells also resulted in the alterations of other thylakoid membrane proteins: most prominently, a dramatic diminishment of the 47-kDa chlorophyll protein (CP) and 94-kDa protein, and accumulation of a 17-kDa protein band were observed in SDS-PAGE. The changes in 47-kDa and 94-kDa proteins lead to the decreased energy transfer from light harvesting antenna to PSII, which was accompanied by alterations in the chlorophyll fluorescence emission spectra of whole cells and isolated thylakoids. Therefore we conclude that salt stress has various effects on photosynthetic electron transport activities due to the marked alterations in the composition of thylakoid membrane proteins.
Proper targeting of the βPAK-interacting exchange factor (βPIX)/G protein-coupled receptor kinase-interacting target protein (GIT) complex into distinct cellular compartments is essential for its diverse functions including neurite extension and synaptogenesis. However, the mechanism for translocation of this complex is still unknown. In the present study, we reported that the conventional kinesin, called kinesin-1, can transport the βPIX/GIT complex. Additionally, βPIX bind to KIF5A, a neuronal isoform of kinesin-1 heavy chain, but not KIF1 and KIF3. Mapping analysis revealed that the tail of KIF5s and LZ domain of βPIX were the respective binding domains. Silencing KIF5A or the expression of a variety of mutant forms of KIF5A inhibited βPIX targeting the neurite tips in PC12 cells. Furthermore, truncated mutants of βPIX without LZ domain did not interact with KIF5A, and were unable to target the neurite tips in PC12 cells. These results defined kinesin-1 as a motor protein of βPIX, and may provide new insights into βPIX/GIT complex-dependent neuronal pathophysiology.
A pollen-specific cDNA clone, LMP50, was isolated from the mature pollen cDNA library of the Easter lily. The LMP50 transcript was highly abundant in mture pollen grains but not detectable in other organs. The LMP50 cDNA clone contains 1383 nucleotides and two open reading frames. The first codes for a peptide of 15 amino acid residues. The role of this peptide is nuclear. The second encodes a protein containing 329 amino acid residues. This protein exhibited a significant homology to human tartrate-resistant acid phosphatase and porcine uteroferrin. Both of these enzymes have been suggested to play a role in iron transport. Therefore, LMP50 may act as an iron carrier protein in mature pollen grains.
Vicilin and legumin, the storage Proteins of seed, were Purified from ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) endosperm cells. They were immunized in rabbits, and antibodies were raised respectively. Using these two antibodies, double immunogold labeling of vicilin and legumin was carried out to determine the gap of synthetic time and the transport pattern of vicilin and legumin in the ginseng endosperm cells. Vicilin and legumin were synthesized at the same time at early embryo developmental stage. They were secreted from the Golgi bodies and accumulated into the small vacuoles. As the endosperm cells developed, vicilin and legumin localized in the small vacuoles were gradually transported toward the large central vacuole where they were stored. Protein bodies were derived from the vacuoles filled with proteins and distributed in the endosperm cells of mature red seed. Protein bodies were various in size from 1 to 8 ${\mu}{\textrm}{m}$ in which vicilin and legumin were mixed each other. The number of small particles labeled on the vicilin was greater than that of large particles labeled on the legumin in the protein bodies indicating that the amount of vicilin is higher than that of legumin in the protein bodies.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.