• 제목/요약/키워드: protein mixture

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A new purification method for the Fab and F(ab)2 fragment of 145-2C11, hamster anti-mouse CD3ε antibody

  • Kwack, Kyu-Bum
    • BMB Reports
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    • 제33권2호
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    • pp.188-192
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    • 2000
  • Recombinant protein G has been utilized in the purification of antibodies from various mammalian species based on the interaction of antibodies with protein G. The interaction between immunoglobulin and protein G may not be restricted to the Fc protion of antibodies, as many different $F(ab)_2$ or Fab fragments can also bind to protein G. I found both FAb $F(ab)_2$ of 145-2C11, a hamster anti-mouse $CD3{\varepsilon}$ antibody, bound to the protein G-sepharose. Interestingly, Fab and $F(ab)_2$ of 145-2C11 did not bind to the protein A-sepharose. The binding of Fab and $F(ab)_2$ of 145-2C11 to protein G provided a useful method to remove proteases, chopped fragments of the Fc region, and other contaminating proteins. The remaining intact antibody in the protease reaction mixture can be removed by using a protein A-sepharose, because the Fab and $F(ab)_2$ portions of 145-2C11 did not bind to protein A-sepharose. The specific binding of Fab and $F(ab)_2$ portions of 145-sC11 to a protein G-sepharose (though not to a protein A-sepharose) and binding of intact 145-2C11 to both protein A- and G-sepharose will be useful in developing an effective purification protocol for Fab and $F(ab)_2$ portions of 145-2C11.

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SOLVING BIOANALYTICAL PROBLEMS BY THE METHOD OF MATRIX-ASSISTED LASER DESORPTION IONIZATION MASS SPECTROMETRY (MALDI-MS)

  • Zhao, Shankai;Zhong, Feng;Zhu, Zhihua
    • 분석과학
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    • 제8권4호
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    • pp.865-868
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    • 1995
  • The method of matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry has been used to solve some bioanalytical problems, which is difficult to analyse by general methods. For the selection of proper laser wavelength and matrices, eight matriees was used with laser wavelength of 226 and 355nm. The result shows that with wavelength of 355nm better results could be obtained with most of the matrices. The molecular weight of eytochrome C, which was seperated by gel electrophoresis and electro-blotted onto NC membrane is determined by MALDI. The accuracy is better than 0.1%, which is much higher than that of SDS-PAGE. Protein mixture extracted from crude peanut oil is directly determined by MALDI. The molecuiar weight of its three components are determined, and the result also demonstrated that these proteins are in free manner. As proteins arc in 2S bond, with the traditional method, SDS-PAGE, it is not able to decide whether protein exists in combination mode or in free manner. In the technique of two phase aquesous solution, which is used for separating biomaterials, water soluble polymers stained with dyes are used in this technique. By the use of MALDI the number or the dye molecules react with the polymer PEG molecule are determined, and that is difficult to determined by other methods.

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이성분계 단백질 혼합물의 미세막 분리공정에서 막오염에 관한 연구 (Fouling Study with Binary Protein Mixtures in Microfilration)

  • 안병훈;문동주;유계상
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제43권2호
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    • pp.236-242
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    • 2005
  • 대표적인 단백질 물질인 bovine serum albumin(BSA), lysozyme, pepsin, casein 그리고 ovalbumin의 이성분계 단백질 혼합물의 미세 분리 막에서 보이는 막 오염 현상에 관한 실험을 고찰하였다. 트랙 에치법에 의해 제조된 $0.2{\mu}m$ 폴리카보네이트 미세 막을 이용하여 단백질 혼합물 용액의 조성과 종류가 여과유량감속에 미치는 영향에 대한 실험을 일정한 압력(14 kPa)과 수소이온농도(pH=11) 하에서 수행하였다. 각각의 이성분 단백질 혼합물에 대한 막오염 현상을 확인하였으며, 유량 감속 데이터는 최근에 개발된 pore blockage-cake formation 모델을 이용하여 분석한 결과, 실험 결과와 일치하였다. 이성분계 단백질 혼합물의 조성과 단백질 종류가 막오염 및 유속변화에 미치는 영향은 공극막힘속도(${\alpha}$), 단백질 침적층의 초기 저항($R_{po}$) 및 단백질 저항의 증가속도(${\beta}$)에 의해 설명 할 수 있었다. 대체로 공극막힘속도의 변화는 유속감소현상과 일치함을 알 수 있으며, 특히 casein이 존재하는 단백질 혼합물에서의 급격한 유량감속은 casein에 의한 단백질 침적층의 초기저항에 크게 기인된 것으로 판단된다.

Isolation of $\beta$-Lactamase Inhibitory Protein from Streptomyces exfoliatus SMF19 and Cloning of the Corresponding Gene

  • PARK, HYEON-UNG;KYE JOON LEE
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제6권6호
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    • pp.369-374
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    • 1996
  • The ${\beta}$-lactamase inhibitory protein (BLIP) produced by Streptomyces exfoliatus SMF19 was purified(33 kDa) and the N-terminal amino acid sequence was determined as NH2-ATSVVAWGGNND. Genomic DNA library of S. exfoliatus SMF19 was constructed in pWE15 and recombinants harbouring the corresponding gene were selected by colony hybridization to the mixture of 36-mer oligonucleotide designed from the N-terminal amino acid sequence. The corresponding gene (bliX) was isolated on a 4-kb ApaI fragment of S. exfoliatus SMF19 chromosomal DNA and then sequenced. The bliX consisting of 1, 119bp encoded a mature protein with a deduced amino acid sequence of 342 residues and also encoded a 40-amino-acid signal sequence. No significant sequence similarity to bliX was found by pairwise comparison using various protein and nucleotide sequences.

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사료성분에 의한 닭의 혈중 Cholecystokinin 농도의 상승 (Enhanced Release of Cholecystokinin by Dietary Components in Chicks)

  • 양성익
    • 한국가금학회지
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    • 제17권2호
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    • pp.83-91
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    • 1990
  • 닭의 Cholecystokinin (CCK) 방출에 미치는 사료성분에 대한 효과에 대해서 stomach tube에 의한 사료투여에 의해, 특수 CCK-8 antibody 를 이용해서 그 혈중 CCK의 농도를 측정했다. 실험 1에서, 무단백질사료에 대두단백질 및 대두단백질과 같은 조성의 아미노산혼합물을 첨가해서 투여한 결과 무단백질사료에 비교해서 유의하게 높은 증가를 보였으며, 아미노산혼합물사료투여가 단백질사료투여보다 빠른 증가가 관찰되었다. 무단백질사료에 아미노산을 단독으로 첨가하여 투여한 결과. phenylalanine 첨가 사료에서 Plasma중의 CCK농도가 가장 높게 나타나 아미노산혼합물과 같은 수준으로 나타났으며. 뒤이어 arginine이, valine에서 가장 낮은 분필반응이 관찰되었다. 실험 2와 3에서, 단백질사료에 SBTI를 첨가하여 투여한 결과, SBTI첨가 사료에 의해 Plasma CCK 농도는 투여 후 급격히 증가하였으며, 그 반응은 1,000mg첨가가 100mg/kg첨가보다 높은 dose response가 관찰되었다. SBTI첨가 사료에 의한 crop emptying에는 처리군과 차이가 나타나지 않아, SBTI가 단독으로 plasma CCK농도를 상승시킨다고 생각된다.

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인간 전립선 암세포인 TSU-Pr1에서 trans-10,cis-12 Conjugated Linoleic Acid에 의한 Apoptosis 유발과 Bcl-2 단백질의 발현억제 (Induction of Apoptotic Cell Death and Depression of Bcl-2 Protein Levels by Trans-10,cis-12 Conjugated Linoleic Acid in Human Prostate Cancer)

  • 오윤신;김은지;이상곤;정차권;강일준;신현경;윤정한
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제31권6호
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    • pp.1126-1133
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    • 2002
  • CLA 이성체 mixture와 trans-10,cis-12 CLA는 살아있는 TSU-Prl 세포 수를 감소시키는 반면 LA와 cis-9,trans-11 CLA는 세포 수에 아무런 효과가 없었다. 세포 수를 감소시키는 CLA 이성체 mixture와 tran-10, cis-12 CLA는 apoptotic cell death를 유도하는 것을 관찰하였고, 특히 trans-10,cis-12 CLA는 Bcl-2/Bax 비율을 감소시켰다. Trans-10,cis-12 CLA에 의해 Bax와 Bcl-2 mRNA의 수준이 변하지 않았으므로 이 지방산에 의한 Bcl-2의 변화는 mRNA 전사 후에 일어나는 단계에서 일어난다고 결론지을 수 있다. 이로써 CLA에 의한 세포증식 억제는 부분적으로 TSU-Prl 세포의 apoptosis를 유도함으로서 이루어지는 것이라 할 수 있다.

살균${\cdot}$숙성된 남은 음식물의 공정별 미생물 분포 및 Pepsin과 In vitro 소화율 평가 (Changes of the Microbial Population and Determination of Pepsin and In vitro Digestibilities of Pasteurized and Cured Food Wastes)

  • 백용현;지경수;곽완섭
    • 한국축산시설환경학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.125-134
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    • 2005
  • 본 연구는 남은 음식물에 수분흡수제 또는 영양 보충제로 유기성 부산물인 제과부산물, 밀기울, 맥강, 육계분 등을 혼합한 후 rotary drum 방식의 반건식 살균처리 및 호기적 숙성 과정 별 혼합사료 내의 미생물 분포 및 사료단백질 pepsin 소화율과 in vitro 영양소 소화율을 측정하여 실제 동물 급여 시의 효능을 사전 예측하고자 실시하였다. 살균 처리 공정($80^{\circ}C$에서 30분간)은 전반적으로 균수를 감소시키는 경향과 곰팡이를 사멸시키는 효과가 있었으며(P<0.05), 연이은 숙성 과정은 살균과정에서 감소된 lactic acid bacteria를 증식시키는 효과가 있었다(P<0.05). 열처리 살균 공정은 혼합사료 단백질의 pepsin 소화율을 감소시켰다(P<0.05). 사료원료 건물 및 유기물의 in vitro 소화율은 제과부산물>밀기울>남은 음식물=맥강 순으로 높았다. 상기한 연구 결과는 반건식 남은 음식물 혼합사료의 동물 급여시 중요한 기초 자료로 활용될 것이다.

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조.만생 Orchargrass 품종의 생육특성과 수량성 및 사료가치 비교 연구 (Growth Characteristics , Yield , and Nutritive Value of Early- and Late Maturing Cultivars of Orchargrass ( Dactylis glomerate L. ))

  • 서성;신동은;정의수;강우성;양종성
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.27-34
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    • 1997
  • This experiment was carried out to determine growth characteristics, dry matter (DM) yield, seasonal yield distribution and nutritive value of early- and late maturity orchardgrass, 1990 to 1992. The cultivars used in this study were Potomac, Hallmark (early maturing cultivar) and Lidacta, Rancho (late maturing cultivar), and a mixture plot (Potomac 25% + Hallmark 25% + Lidacta 25% + Rancho 25%) was involved. The seeding rate was 20 kgha in all treatments. Plant height of Potomac and Hallmark was longer than that of Lidacta and Rancho. The dates of initial heading and 50% heading of early maturing cultivars (Apr. 30 and May 10) were 10 days earlier than those of late matuing cultivars. Potomac and Hallmark were upright, and Lidacta and Rancho were semi-upright type, and severe disease and weeds (30 ~ 40%) were observed at Lidacta plot. On an average of three years, the DM yields of Potomac (10,549 kglna), Hallmark (10,435 kg) and mixture (10,356 kg) were significantly (P<0.05) higher than those of Rancho (9,457 kg) and Lidacta (8,218 kg). However, seasonal yield distribution of late maturing cultivars was better than that of early maturing cultivars. The contents of crude protein, crude fat, crude fiber, nitrogen %ee extract, aude ash, neutral detergent fiber, P, K, Ca, and Mg were not significantly different between cultivars, but higher aude protein yield was found at Potomac, Hallmark and mixture plots. Based on the above results, it may be concluded that early maturing cultivars for high productivity, late maturing cultivars for seasonal yield distribution, and seeding of mixture andlor separation of early- and late maturing cultivars are recommended. Also Lidacta was a not promising cultivar due to low productivity, severe disease, and high weeds development.

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액상우분뇨 시용과 콩과작물의 혼파가 청보리와 호밀의 생산성, 사료가치 및 단위면적당 유기가축 사육능력에 미치는 영향 (Effects of Applying Cattle Slurry and Mixed Sowing with Legumes on Productivity, Feed Values and Organic Stock Carrying Capacity of Whole Crop Barley and Rye)

  • 조익환;황보순;이성훈
    • 한국유기농업학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.419-432
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    • 2010
  • 본 실험에서는 월동작물로 재배되는 청보리와 호밀에 화학비료, 유기질비료 및 가축분뇨의 시용 그리고 콩과작물의 혼파재배가 작물의 생산성과 사료가치를 평가함으로써 토양의 지력향상과 함께 양질의 유기조사료를 확보하여 단위면적당 유기가축 사육능력을 추정하고자 무비구, 화학비료 인산칼리 시비구, 화학비료 질소인산칼리 시비구, 유기질비료 시용 액상우분뇨 시용구, 액상우분뇨 시용에 헤어리베치 혼파구 및 액상우분뇨 시용에 사료용완두 혼파구 등 7처리 3반복 난괴법으로 배치하여 실험이 실시되었다. 청보리의 연간 건물, 조단백질 및 가소화양분총량 수량은 화학비료 질소인산칼리 시비구가 액상우분뇨를 시용한 구를 제외하고 다른 처리구보다 유의하게 높았다(p<0.05). 청보리의 조단백질함량은 화학비료 질소인산칼리 시비구(9.8%)와 액상우분뇨 시용과 콩과작물 혼파구(8.6~9.7%)가 처리구보다 유의하게 높았다(p<0.05). 보리를 급여시 유기 한우 암소는 액상우분뇨 시용에 콩과작물 혼파구가 연간 ha당 평균 l.7~1.8두를 사육할 수 있다 호밀의 연간 건물, 조단백질 및 가소화양분총량 수량은 액상우분뇨에 콩과작물을 혼파한 구가 ha당 각각 6.9~7.1, 0.5~0.6 및 4.3~4.4톤으로 나타났다. 호밀의 조단백질함량은 화학비료 시비구가 10.8%로 모든 처리구보다 높았다(p<0.05). 호밀을 급여한 유기한우 암소의 연간 ha당 사육두수는 액상우분뇨 시용에 콩과작물 혼파구가 평균 1.9두를 사육할 수 있다. 단위당 생산수량 및 유기가축 사육능력측면에서 청보리 및 호밀에 대한 가축분뇨의 시용은 화학비료에 준하는 생산성적을 나타내었다. 가축분뇨 시용구내에서 청보리는 헤어리베치와 혼파 시에, 호밀은 사료용완두와 혼파 시에 더 많은 생산수량을 나타내었다. 또한, 가축분뇨 시용구내 콩과작물과의 혼파는 조단백질수량과 가소화양분총량을 증가시켰다. 결론적으로 가축분뇨 시용과 콩과작물과의 혼파는 유기가축사양 시 단백질공급원으로 이용 되는 수입유기곡류를 대체하는 효과를 가질 수 있을 것으로 기대한다.

가열온도, 가열시간, 단백질농도가 혈장단백질과 근원섬유단백질 혼합물의 gel 특성 및 열안정성에 미치는 영향 (Effect of Heating Temperature, Time and Protein Concentration on the Gel Properties and Heat Stability of a Mixed System of Pork Myofibrillar and Plasma Proteins)

  • 김천제;한의수;고원식;최도영;이치호;정구용;최병규
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.295-298
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    • 1993
  • 식품산업 특히 육가공산업에 돈혈액의 이용을 위하여 가열온도 가열시간 및 단백질 농도가 혈장단백질과 근원섬유단백질 혼합물의 gel 특성과 열안정성에 어떠한 영향을 미치는지를 규명하기 위하여 실시되었다. 혈장단백질과 혼합물(plasma+myofibrillar protein)의 용해성은 가열온도가 $70^{\circ}C$에서 $90^{\circ}C$로 증가함에 따라 크게 감소하였으며, 근원섬유단백질은 $40{\sim}60^{\circ}C$에서 용해성이 서서히 감소하였다. 또한 gel 강도와 혼탁도는 이 온도범위에서 크게 증가하였다. 가열온도 $75^{\circ}C$에서 가열시간이 경과함에 따라 혈장단백질과 혼합물의 용해성은 감소하였으나 gel 강도와 혼탁도는 증가하였다. 근원섬유단백질은 $75^{\circ}C$에서 가열시간이 경과함에도 용해성, 혼탁도, gel 강도의 변화가 거의 나타나지 않았다. 근원섬유단백질, 혈장단백질, 혼합물의 gel 강도는 단백질 농도가 5%에서 9%로 증가함에 따라 증가하였다.

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