한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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pp.283-307
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1987
Glycinin and $\beta$-conglycinin are the most abundant storage protein in soybean. These proteins are known to be synthesized predominantly during germination and cell expansion phase of seed development for short period, and synthesized not in other tissues. Genes encoding these storage proteins are useful system to study the mechanism of development stage and tissue specific gene expression in eukaryotes, especially plants, at the molecular level. The cDNA and genomic clones coding for glycinin have been isolated and regulation mechanism of the gene expression has been studied. Initially, development and tissue-specific expression of the glycinin gene is regulated at the level of transcription. Post-transcriptional processing is also responsible for delayed accumulation of the mRNA. Translational control of the storage protein gene has not been reported. Post-translational modification is another strategic point to regulate the expression of the gene. It is possible to identify positive and/or negative reguratory clements in vivo by producing transgenic plants agter gene manipulation. Elucidation of activation and repression mechanism of soybean storage protein genes will contribute to the understanding of the other plant and eukaryotic genes at molecular level.
In the previous report (Choi et al., 1997), the angiogenin binding peptides identified from a phage-peptide library were analyzed by using the fusion proteins composed of the Escherichia coli maltose binding protein and its corresponding peptides. However, it was difficult to obtain a sufficient amount of the fusion proteins required for further analysis because of the low expression level. We now report a high level expression of the fusion protein and analysis of its anti-angiogenin activity. The use of strong T7 promoter and removal of signal sequence allowed about a 20-fold increase in the expression efficiency of the fusion protein. We were able to obtain about 10 mg of purified fusion protein from one liter of culture. The purified fusion protein showed angiogenin-specific affinity and inhibited the binding of biotinylated actin to human angiogenin at $IC_{50}$ of 0.6 mM. Its anti-angiogenin activity was also revealed by the chorioallantoic membrane assay.
This study was carried out to examine how dietary protein and calcium levels in rats fed fat-enriched diet affect the total lipid and cholesterol contents of blood and tissues. Male Sprauge-Dawley rats weighing approximately 200g were fed six purified diets which contained 18%(w/w) beef tallow, 1% (w/w) cholesterol, two source of protein, casein or isolated soy protein (ISP) and three levels of dietary calcium, 0.1%, 0.4% and 1.0%, first, for four weeks, and second, for eight weeks. The contents of the total lipid, cholesterol and triglyceride in blood, liver, heart and feces were determined. After four weeks feeding serum lipid and cholesterol concentrations significantly decreased in rats fed 1.0% (w/w) level calcium, regardless of dietrary protein sources. After eight weeks, these concentrations were significantly lower in the rats fed soy protein than in casein-fed rats. As dietary calcium level increased serum and tissue lipid and cholesterol contents were decreased and fecal lipid excretion increased. It is concluded that hypolipidemic and/or hypocholesterolemic effects of soy protein and calcium were partly due to decrease in lipid absorption.
Min, T.S.;Kim, J.D.;Lee, J.H.;Hyun, Y.;Sohn, K.S.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제14권4호
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pp.525-534
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2001
A total of 120 pigs were used to investigate the effects of yucca extracts on the growth performance, nutrient digestibility, nutrient excretion and carcass characteristics of finishing pigs fed different levels of dietary protein. Pigs were allotted into $2{\times}3$ factorial design by the supplementation of yucca extracts (YE, 0 and 120 mg/kg) and 3 levels of dietary protein (14, 16, 18% for early finisher and 12, 14, 16% for late finisher for low, medium and high protein diet, respectively). During the early finishing period (51~76 kg BW), no significant difference was found in growth performance regardless of the YE supplementation or dietary protein levels. Growth performance of late finishing pigs (76~101 kg BW) was also not significantly different among treatments. However, ADG of pigs fed YE diet was significantly improved (p<0.05) regardless of the dietary protein levels. For the overall period (51~101 kg BW), although adding YE to the diet and elevating the protein level showed better ADG, there were no significant differences on growth performance among treatments. Early finishers showed significantly higher crude protein, crude ash and crude fat digestibilities when they were fed diets supplemented with YE. Digestibilities of amino acids were not affected by YE. Late finishers did not show any significant differences in proximate nutrient digestibilities regardless of YE supplementation or dietary protein levels. YE tended to slightly improve the CP digestibility, however no significant difference was found with increased dietary protein levels. There was no significant difference in amino acid digestibilities with YE supplementation or dietary CP levels during the late finishing period. Dry matter (DM) and nitrogen (N) excretion in feces did not show any significant difference among treatments. Early finishing pigs also did not respond to the inclusion of YE or dietary protein levels (p<0.05). Fecal N excretion of early finishing pigs seemed to be lowered in pigs fed YE. Pigs fed medium dietary protein diet tended to excrete a higher amount of N during the early finishing period, but not statistically different. A slight increase in fecal N excretion was found with the increased level of dietary protein during the late finishing period. For ammonia nitrogen excretion, although there was no significance, the NH3-N content tended to be increased by the increased dietary protein levels and with YE supplementation. The NH3-N content in manure increased by 24.5% with YE supplementation. There were no significant differences in carcass weight, backfat thickness, carcass grade and loin eye area among treatments. However, pigs fed non-YE with low protein diet showed a significantly (p<0.05) low carcass ratio among treatments and there was significant (p<0.05) difference between the YE-added treatment and non YE treatment in carcass ratio. As for the feed cost, the cost of feeding high level protein was higher than that of medium level protein by 5% and low level protein by 9% (p<0.05). Therefore, based on this study, it could be concluded that environmentally friendly agents might play a role to some extent in finishing pigs from the aspect of pollution control, and that more than 14 and 12% of dietary protein for early finishing and late finishing pigs respectively do not necessarily guarantee high growth performance.
The nucleosomal organization of chromatin using histone proteins is a fundamental and ubiquitous feature of eukaryotic nuclei, with the major exception of dinoflagellates. Although a number of recent genomic and transcriptomic analyses have detected numerous histone genes in dinoflagellates, little is known about their expression. Here in, we aimed to investigate the expression pattern of histone genes under nutritional stress, and an attempt was made to detect histone expression at the protein level in Alexandrium pacificum. The presence of histones at the mRNA level was confirmed in this study by the amplification, cloning, and sequencing of 10 different genes. Relative expression profiling of these genes under different growth conditions was determined with real-time PCR and revealed considerable levels of histone transcription in nutritionally stressed cells. We were unable to detect the expression of histones at the protein level even after immunodetection and analysis using mass spectrometry, although a histone-like protein was detected as a major nuclear component. A. pacificum expresses multiple variants of histone, and protein sequences revealed both conservation and divergence with respect to other eukaryotes. We concluded that A. pacificum maintained an active transcription of histone genes within the cell, and enhanced expression of histone genes in nutritional stress strongly suggest that histones have functional significance in dinoflagellates, although expression at the protein level was below our current detection limits, which suggests a limited role of histones in DNA packaging. Finally, the plausible regulation of histone expression at the gene and protein levels in A. pacificum is discussed.
These experiments were designed to study the influence of protein undernutrition during lactation period(3 wks) or after-weaning period(8 wks) on growth of organs, and on brain and liver composition of the experimental rats. The following experimental groups were studied. Group No. Rats Lactation(3 wks) (Diet of mother rat) After-weaning period(8wks) Rehabilitation Period(17wks) I 8 25% Casein diet 25% Casein diet 25% Casein diet II 8 12% Casein diet 25% Casein diet 25% Casein diet III 8 25% Casein diet 5% Casein diet 25% Casein diet IV 8 12% Casein diet 5% Casein diet 25% Casein diet After the perriod of rehabilitation(17 wks) with 25% casein diet, the following results were obtained. 1. Most of the organs except the spleen could not catch up with the normal group in their weights for the group of protein undernutrition during lactation(3 wks), even after 17 weeks of rehabilitation. For the group of protein undernutrition during after-weaning period(8 wks) brain, lung, heart, spleen and pancreas could catch up with the normal group after rehabilitation. According to this result it is assumed that the growth of brain, lung, heart and pancreas might be developed mostly during lactation and that the growth of liver and kidney might be developed after-weaning period continuously. 2. For the groups of protein underuntrition during lactation period or after-weaning period the amounts of total lipid, cholesterol and phospholipid of brain were lower than those of normal group. Especially, cholesterol level was significantly lower than normal group. And there was also a significant difference in the phospholipid level of the after-weaning(8 wks) deprivation group. 3. The groups of protein undernutrition during lactation or after-weaning period(8 wks) showed lower level of liver nitrogen and higher level of liver fat. Especially, protein undernutriton during lactation gave a greater influence on the lever of liver fat.
본 시험은 사료의 에너지 및 단백질수준이 육계의 생산성 및 복강지방 축적에 미치는 영향을 구명하기 위하여 대사에너지 3수준(2,800, 3,000 및 3,200kcal/kg)과 단백질 3수준(16, 18 및 20%)을 조합한 9개 처리를 두었으며, 처리당 암수 각 39수씩 총 702수를 공시하여 1990년 7월 10일부터 9월 4일까지 8주간에 걸쳐 시험을 실시하였던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 증체양은 대사에너지수준이 증가할수록 점차 증가하는 경향을 보여 통계적인 유의성이 인정되었으나 (P<0.05), 대사에너지 2,800kcal/kg과 3,000kcal/kg 또는 3,000kcal/kg과 3,200kcal/kg 수준간에는 유의차가 없었으며, 단백질수준간에도 유의적인 차이를 보이지 않았다. 2. 사료섭취량은 대사에너지 및 단백질수준이 증가할 수록 점차 감소하는 경향을 보였으나 통계적인 유의성은 인정되지 않았다. 3. 사료요구율은 대사에너지수준이 증가할수록 현저히 개선되어 고도의 유의성이 인정되었으며(P<0.01), 단백질수준이 증가할수록 점차 개선되는 경향을 보였으나(P<0.05), 단백질 18%와 20% 수준간에는 유의차가 없었다. 4. 도체율은 대사에너지 및 단백질수준간에 일정한 경향이나 통계적인 유의차를 보이지 않았다. 5. 복강지방 축적률은 대사에너지수준이 증가할수록 현저히 증가하는 경상을 보였으나(P<0.01), 대사에너지 2,800㎉/kg과 3,000kcal/kg 또는 3,000kcal/kg과 3,200kcal/kg 수준간에는 유의차가 없었으며, 단백질 15% 18% 수준간에는 유의적인 차이를 보이지 않았으나 단백질 20%수준에서는 현저히 감소하여 고도의 유의성이 인정되었다. (P<0.01). 6. kg증체당 사료비는 대사에너지수준이 증가할수록 점차 감소하는 경향이었고, 단백질 16% 및 20% 수준에 비해 18%수준에서 약간 감소하는 경향이었으나, 대사에너지 및 단백질 수준간에 통계적인 유의성은 인정되지 않았다.
This study was a sequential experiment consisting if feeding trial and in vitro culture studies. Feeding was conducted by $2{\times}2{\times}2$ factorial design with two cimaterol levels (0, 0.25 mg/kg), two energy levels (3,200, 2,900 ME kcal/kg) and two sexes. In starting period (0-21 days) broilers were fed diets containing two energy level without dietary supplementation of cimaterol. During finishing period (21-42 days) cimaterol groups were fed cimaterol supplemented diets. In vitro cultures were carried out to study the cellular metabolism of protein and fat in liver and adipose tissues prepared from chicks used in feeding trials. Body weight gain was significantly improved by the administration of cimaterol to experimental diets by 2.4% (p < 0.05). Feed intake was reduced by cimaterol administration at the high energy level, but this trend was reversed at low energy level. Feed efficiency was improved by cimaterol administration and at high energy level the difference (5.7%) was significant(p < 0.05). The administration of cimaterol had no effects on percentage of abdominal fat content, giblet and neck. There was little difference in carcass yield between control and cimaterol treated group. The administration of cimaterol had no effects on nutrient metabolizability or carcass composition. The results of in vitro studies with liver tissues showed that cimaterol increased the lipolytic activities (p < 0.05) and decreased lipogenic activities (p < 0.05). In in vitro studies with acinar cell of liver tissues. cimaterol increased the amount of retained protein and decreased secreted protein at high energy level. but the trend was opposite at low energy level.
Myelin basic protein (MBP), a major structural protein of the myelin, is thought to be important for the maintenance of myelin in the central nervous system (CNS). We investigated the effect of maternal folic acid nutritional status on the folate level and the synthesis of MBP in the offspring. In order to test this hypothesis, female Sprague-Dawley rats were fed either folic acid sufficient (8 mg/kg diet) or deficient (0 mg/kg diet) diet from 2 wks prior to the mating throughout the entire pregnancy, lactation and weaning period. We examined plasma folate level by the radioimmunoassay and homocysteine level by HPLC, respectively. The MBP expression was measured by the western blot analysis. The maternal folic acid deficiency decreased plasma folate level with a concomitant increase in plasma homocysteine level in their offspring. The maternal folic acid deficiency decreased hepatic levels of SAM and SAM/SAH ratio with a concomitant increase in hepatic levels of SAH and the MBP expression of spinal cord in their offspring at 7 wks of age. These results suggest that maternal folic acid nutritional status affect plasma folate and homocysteine level in their offspring. Moreover, the maternal folic acid deficiency mi호t inhibit the MBP expression of the spinal cord and disrupt many other vital CNS reactions in their offspring.
This study was performed to investigate the effect of dietary protein and cysteine levels on cadmium toxicity in rats. Seventy-two male rats of Sprague-Dawley strain weighting 171$\pm$3g were blocked into 12 groups according to body weight, and were raised for 30 days. cadmium chloride was given at levels of 0 or 400ppm, protein at levels of 7, 15 and 40%, and cysteine was added(total dietary cysteine contents : 0.45%) to diet or not. The results are summarized as follow. Food intake, weight gain, food were lower than those of cadmium free group. But, these were increased with increasing dietary protein level and cysteine addition. Fecal cadmium excretion was remarkably increased in high protein (40%) groups. Thus, cadmium retention rates were decreased in high protein groups. Metallothionein concentrations in liver and kidney were increased in cysteine addition, and cadmium administration. Especially, these were remarkably increased in cadmium and cysteine added groups. Urinary calcium excretion was increased with cadmium administration, but urinary protein excretion and creatinine clearance were not changed in these animal. In conclusion, food intake, weight gain and organ weights were decreased with administration. Cadmium toxicity was alleviated by increasing fecal cadmium excretion, while cysteine addition increased metallothionein concentrations in liver and kidney. From these results, it was shown that cadmium toxicity was alliviated by synergistic effect of high protein level and cysteine addition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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