International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제33권2호
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pp.78-84
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2016
The antioxidant activity of silkworm powder treated by proteolytic enzyme was investigated. Total protein content of silkworm power was assayed using BCA, Bradford assays and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) with alkaline protease treatment conditions including temperature and pH. The optimum condition of alkaline protease treatment for silkworm powder was found to be $60^{\circ}C$ and pH 7. The alkaline protease treatment resulted in increased contents of free amino acids, total polyphenol and total flavonoid compared to control group. The silkworm hydrolysates showed excellent antioxidant activities in various in vitro models such as 2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, 2,2 - azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6)-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activity. These results provide useful information for using silkworm powder as an ingredient in functional foods and for exploiting alkaline protease treatment to improve the extractability and bioactivity of a raw material.
Industrial development has increase consumption of crude oil and environmental pollution. A large number of microbial lipolytic enzymes have been identified and characterized to date. To development for a new lipase with catalytic activity in degradation of crude oil as a microbial enzyme, Acinetobactor sp. B2 was isolated from soil samples that were contaminated with oil in Daejon area. Acinetobactor sp. B2 showed high resistance up to 10 mg/mL unit to heavy metals such as Ba, Li, Al, Cr, Pb and Mn. Optimal growth condition of Acinetobactor sp. B2 was confirmed $30^{\circ}C$. Lipase was purified from the supernatant by Acinetobactor sp. B2. Its molecular mass was determined to the 60 kDa and the optimal activity was shown at $40^{\circ}C$ and pH 10. The activation energies for the hydrolysis of p-nitrophenyl palmitate were determined to be 2.7 kcal/mol in the temperature range 4 to $37^{\circ}C$. The enzyme was unstable at temperatures higher than $60^{\circ}C$. The Michaelis constant $(K_{m})\;and\;V_{max}$ for p-nitrophenyl palmitate were $21.8{\mu}M\;and\;270.3{\mu}M\;min^{-1}mg\;of\;protein^{-1}$, respectively. The enzyme was strongly inhibited by $Cd{2+},\;Co^{2+},\;Fe^{2+},\;Hg^{2+},\;EDTA$, 2-Mercaptoethalol. From these results, we suggested that lipase purified from Acinetobactor sp. B2 should be able to be used as a new enzyme for degradation of crude oil, one of the environmental contaminants.
본 연구는 도축 폐기물인 가축혈액을 이용하여 항고혈압 기능성 식품소재로서의 angiotensin I converting enzyme 저해 펩타이드 분획을 생산하기 위한 조건과 가능성을 조사하기 위하여 수행되었다. 산업적으로 이용 가능한 단백분해효소 중 Alcalase가 혈장 원액 및 그로부터 분리된 albumin에 대하여 가장 높은 활성의 가수분해물을 생성하였다. 특히 albumin의 Alcalase 가수분해물과 이를 gel chromatography를 통새 분획하여 얻은 고활성 분획의 $IC_50$값은 각각 0.5 및 0.02 mg/mL로서 지금까지 보고된 식품단백질 유래 펩타이드 혼합물들과 비교할 때 활성이 매우 높은 것에 속함을 알 수 있었다. 또한 이 고활성 펩타이드 분획은 혈장 원액으로부터 단순한 한외여과만을 거쳐도 얻을 수 있음을 확인함으로써 산업적 실용화 가능성이 높은 공정임을 알게 되었다.
방송이를 4% H$_2$SO$_4$,용액으로 1.5kg/$ extrm{cm}^2$에서 30분간 전가수분해 시키면 원료에 대한 당화율은 21%을 얻었으며 생성된 당화액에 효모 Candida를 배양한 결과 당이용율은 20.5%에 불과하며 생성당에 대한 균체량의 비율은 21.25%을 얻을 수 있었다.
KIM HYUNG-WOOK;KO EUN-JUNG;HA SANG-DO;SONG KYUNG-BIN;PARK SANG-KYU;CHUNG DUCK-HWA;YOUNS KWANG-SUP;BAE DONG-HO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권4호
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pp.815-822
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2005
In order to extend the shelf-life of packaged or coated foods, an antibacterial edible film was developed from soybean meal that had been fermented with Bacillus subtilis under the optimum condition of pH 7.0-7.5 and $33^{\circ}C$ for 33 h. The water vapor permeability of the fermented film ($86.0 mg/cm^2{\cdot}h$) was higher than those of normal soybean films ($66.9 mg/cm^2{\cdot}h$). Protein solubility of the fermented film was also higher than ordinary soy protein film at the pH range of 3 -10. The fermented soybean film had higher tensile strength and lower $\%$ elongation (elongation rate) than the ordinary soybean film, mainly because partial hydrolysis of proteins in the soybean film occurred during fermentation. Antimicrobial properties of the fermented film on foodstuffs were measured by placing the films on surime, jerked beef, and mashed sausage media; containing $10^2-10^3$ CFU/plate of foodborne pathogenic bacteria, and showed significantly higher inhibitory effects on the growths of all the indicating bacteria. The film could be used as a packaging material in the food industry. However, before direct application of the fermented film to the commercial food industry, its poor mechanical and antibacterial properties need to be improved.
Aspergillus niger CF-34가 생산하는 대두세포벽분해 효소 복합액을 알칼리로 처리하여 조효소액 중에 함유된 protease만을 선택적으로 제거할 수 있었다. 조효소액을 알칼리로 처리하였을 때 세포벽분해활성에는 영향을 적게 주고, 대두 단백질을 분해시켜 쓴 맛의 peptide를 생성하는 protease만을 선택적으로 불활성화시킬 수 있었다. 조효소액의 pH를 $9.0{\pm}0.1$로 조절하여 $20^{\circ}C$에서 약 30분 동안 서서히 교반한 후 다시 pH를 5.0로 조절하는 것이 최적 조건이었다. 이때 조효소액 중 protease 활성은 초기의 약 10% 미만으로 감소하였으며, 각 효소의 잔존 활성을 살펴보면 pectinase는 약 80%, polygalacturonase는 약 85%, xylanase는 약 95%, carboxymethyl cellulase는 약 100% 정도이었고, 대두세포벽분해활성은 초기의 약 90% 정도 유지할 수 있어 protease만이 선택적으로 제거되었다. 이렇게 처리된 효소액을 사용하여 비지 중의 대두 단백질을 추출할 경우 생산효율은 비록 감소하였지만, 대두단백질의 분해를 막고, 쓴맛 생성을 억제하여 품질 및 관능적으로 우수한 제품을 생산할 수 있었다.
The purpose of this study was to investigate the effect of low temperature thermal pre-treatment on biodegradation of waste activated sludge for anaerobic digestion as a countermeasure for increasing sludge generation. The experimental condition was accomplished in 2 %, 4 %, and 6 % TS concentration, and $70^{\circ}C$, $80^{\circ}C$, $90^{\circ}C$ of temperature for a maximum of 120 minutes retention time. Then, it was followed by analysis of physical/chemical properties, BMP test and composition of biogas. The biogas characteristic was evaluated by applying the modified Gomperz model. As a result, solubility of dissolved substrate, such as $SCOD_{Cr}$, soluble carbohydrate, and soluble protein, and biogas production increased as temperature increased. Solubilization efficiency at $90^{\circ}C$ was 18.4 %, 17.03 % and 16.88% in 2 %, 4 %, and 6 % TS concentration respectively. Also, solubilization rates of carbohydrate and protein similarly increased. BMP test results also showed that methane production in excess sludge increased to 0.194, 0.187 and $0.182m^3/kg$ VS. respectively, and lag phase decreased to 0.145, 0.220, 0.351 day due to acceleration of the hydrolysis step. Consequently, low-temperature thermal pre-treatment could increase biodegradability of sludge, positively affecting biogas production and sludge reduction.
본 연구에서는 하수슬러지의 가용화를 위한 처리공정으로 열처리를 수행하였다. 열처리에 의하여 입자상 유기성분의 가용화를 확인할 수 있었다. $120^{\circ}C$ 30분의 열처리에 의하여 1차 슬러지의 경우 COD기준 8.3%의 가용화효과를 나타내었다. 반면 2차슬러지의 경우 16.5%의 높은 값을 보여주었고 이는 단백질의 높은 가용화 효과에 기인하는 것으로 나타났다. 한편 모든 슬러지에 대하여 열처리에 따른 분해율 및 유기산 생성율의 향상을 확인 할 수 있었다. 단 산발효 실험을 통하여 최적 열처리조건은 대상 기질의 유기물 조성에 따라 결정되는 것으로 판단되었다. 즉 탄수화물의 함량이 높았던 1차슬러지의 경우 $80^{\circ}C$ 30분의 열처리를 통하여 최대의 분해율과 유기산 생성효과를 얻었으며 단백질의 함량이 높았던 2차 슬러지의 경우 $120^{\circ}C$ 30분이 최적의 열처리 조건인 것으로 나타났다.
세포막의 정보전달기전중 phosphoinositide system은 정보가 전달될때 phospholipase C 효소의 작용으로 phosphatidyl inositol bisphosphate로부터 inositol triphosphate($IP_3$)와 diacylglycerol이 생성되며 $IP_3$는 다시 $IP_3$kinase에 의해 inositol tetrakisphosphate($IP_4$)로 되어 이차전령 물로서 작용한다. 본 연구는 $IP_3$kinase효소가 $Ca^{2+}$와 calmodulin에 의해 활성화되는 성질을 이용하여 calmodulin을 정제하고 $IP_3$kinase효소와의 친화도를 비교 관찰하였다. Calmodulin정제는 phenyl-Sepharose resin을 이용하여 column chromatography를 시행하여 정제확인하였으며 분자량이 17,000임을 SDS-polyacrylamide gel 전기영동으로 확인하였다. 정제된 calmodulin을 affigel column에 결합시킨 gel에 소의 뇌로부터 분리한 $IP_3$kinase효소가 담긴 시료를 calmodulin-affigel column에 적용하여 결합 및 유출정도를 비교하였으며 $Ca^{2+}$이 든 buffer에서 친화도가 가장 컸으며 유출은 EGTA용액에서 일부 유출되었으며 calmodulin/$Ca^{2+}$이 든 buffer에선 강한 유출정도를 관찰하였다. 그러나 calmodulin/$Ca^{2+}$는 $IP_3$kinase효소의 활성을 증가시키며 calmodulin이 단백질이어서 정제면에서 효소와의 분리가 쉽지않아 여러 다른 detergent를 적용하였으나 0.2% chaps buffer에서 집중된 유출을 관찰하였다.
전보에서 분리 동정한 Y-33 균주의 $\beta$-galactosise 효소생산조건을 검토하고 효소를 정제하여 정제효소의 성질을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 효소생산을 위한 최적초발 pH는 7.0이었고 최적온도는 $65^{\circ}C$이었다. 2. 효소는 lactose와 galactose에 의하여 유도되어졌으며 세포내효소이었다. 3. 조효소액을 1차 DEAE-cellulose, 2차 DEAE-cellulose column chromatography 및 Sephadex G-150로 gel filtration하여 정제도가 28.3배, 수율이 15.2%의 정제효소를 얻었다. 4. 정제효소는 polyacrylamide gel 전기 영동에 의하여 순도가 검정되었다. 5. 정제효소의 유당가수분해를 위한 최적작용 온도는 $65^{\circ}C$. pH는 6.5이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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