• Applied Biological Chemistry
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• 제31권4호
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• pp.356-360
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• 1988

토양에서 분리된 Alkaline Protease생산균주는 Bacills subtilis로 동정되었다. 본 균주의 최적배양온도는 최적 배지조건에서 $35^{\circ}C$이며, 초기 배지 pH는 10.5였다. 효소역가는 Casein-Folin법으로 약 2,300 Unit/ml로 나타났다. 배양액에 일련의 정제과정을 실시한 결과 정제배수 9.2, 회수율 14%의 정제효소를 얻었으며, 분자량은 19,000이었다. 정제효소의 반응최적온도는 $70^{\circ}C$, 최적 PH는 12였다. $Fe^{++}$에 의해 활성이 저하되었으며, 또한 serine protease inhibitor인 PMSF에 의해 활성이 저해되었다. 이것으로 부터 본 효소는 활성부위에 serine을 갖는 serine protease의 일종임을 알 수 있었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제11권6호
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• pp.673-677
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• 1998

A inhibitor acting on substrate proteolytic enzyme was isolated from culture broth of Streptomyces sp. SK-862, which had been isolated from soil in Wonju City, by using the colloidal agar medium. The optimum culture temperature and initial pH for the production of the protease inhibitor was 28$^{\circ}C$ and pH 8.5, respectively. The optimum culture medium was composed of 1.5% glucose, 0.5% peptone, 0.1% K2PHO4, 0.05% CaCO3 and initial pH 8.5. The inhibitor production was maximum when the strain was incubated in shaking incubator at 70 strokes for 60 hours.

• 한국식품영양과학회지
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• 제31권5호
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• pp.754-759
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• 2002

공업적으로 광범위하게 이용되고 있는 protease 중 중성 영역에서 최적의 활성을 갖는 중성 protease에 대한 연구의 일환으로, 토양으로부터 protease의 생성능이 우수한 10여 균주를 순수 분리하였으며, 이들 중에서 protease의 활성 이 가장 우수한 PANH765를 최종 선별하였다. 이 균주의 형태학적, 배양학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 조사하여 Bergey의 세균 분류서의 색인에 따라 체계적으로 분류한 결과, Bacilius subtilis 또는 그 유연균으로 동정되어 분리균을 Bacilius .Subtilis PA-NH765로 동정하였다. B. subtilis PANH-765 균주에 의한 protease의 최적 배지 조성은 2.0% glucose, 1.0% yeast extract, 0.2% ammonium nitrate, 0.02% ferrous sulfate 및 0.02% di-potassium hydrogen phosphate이었으며, 최적 생산 조건은 배양온도 ,3$0^{\circ}C$, pH 7.0, 진탕 속도 150 rpm이었다. 이 조건에서 초기 균체량을5%(w/v)접종하여 배양하였을 때 시간에 따른 효소의 최대 활성은 배양 ,36시간일 때 6.34 U이었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권5호
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• pp.342-348
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• 1998

대두단백질 가수분해물의 이용과 특성 등을 향상시키기 위한 연구의 일환으로, 쓴맛성분이 적고 향미가 우수한 가수분해물의 제조에 이용되는 protease를 생산하기 위하여, 전국 각지역의 메주에서 대두 단백 분해 효소의 생산이 우수한 균을 분리하였고, 형태학적, 생화학적 특징을 검토한 결과, Bacillus subtilis로 동정 되었고, Bacillus subtilis YG-95로 명명하였다. 단백분해효소 생산을 위한 배지의 최적 조건을 검토한 결과 soluble starch 3.5%, soy protein isolate 3.0%, dextrose 0.25%, NaCl 0.5%, dipotassium phosphate 0.25%의 배지의 조건에서 배양 최적 pH는 7.6, 최적 배양온도는 $45^{\circ}C$, 최적 배양시간은 60시간으로 배양했을 때 효소의 생산에 최적조건이었다.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제10권3호
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• pp.186-191
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• 2005

In this study, a microorganism-produced protease was used to improve the quality of fabrics. First, the protease-producing bacteria were isolated from soils, and one of them was selected and identified as Bacillus sp. SJ-121. The optimal medium composition for its growth and protease production was determined to be as follows: glucose 1g/L, soybean meal 0.5g/L, soy peptone 0.5, $K_2HPO_4\;0.2,\;MgSO_4\cdot7H_2O\; 0.002,\;NaCl\;0.002,\;and\;Na_2CO_3g/L$. Also, the optimal temperature for the production of the protease by Bacillus sp. SJ-121 was about $40^{\circ}C$ at pH 7. The wool and silk were treated with the protease from Bacillus sp. SJ-121. Following the protease treatment, changes in the surface of a single yarn of the fabrics were observed by both an optical microscope and a scanning electron microscope (SEM). Changes in the K/S value of the wool and silk were measured by spectrophotometric analysis, in order to determine the amount of dye uptake in the fabrics. We also performed a tensile strength examination in order to determine the degree and nature of mechanical changes in single yarns of the wool and silk fabrics. By increasing the protease treatment time to 48 h, the dyeing characteristics of the fabrics were enhanced, and the surfaces of the single yarns of the fabrics became smoother, due to the removal of soil and scale in them. However, no mechanical changes were detected in the fabrics. Therefore, we suggest that proper treatment of the protease produced by Bacillus sp. can improve the quality of silk and wool.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권1호
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• pp.26-32
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• 2002

저염상태에서 속성 발효를 통한 멸치 어간장의 대량 생산을 위하여 시중 어간장에서 단백질 분해효소 생산이 우수한 균주를 분리 동정하여, B. amyloliquefaciens HTP-8로 명명하였다. 효소생산을 위한 배양 최적온도, 초기 pH, 그리고 배양시간은 각각 $30^{\circ}C$, pH 7.0과 3일이었다. Jar fermenter 배양시 pH를 7.0으로. 조절한 경우가 조절하지 않은 경우에 비해 효소활성이 최대에 이르는 시간이 단축되었다. 효소의 부분정제는 조효소액을 80% ammonium sulfate에 의한 염석과 CM-Sephadex C-50을 이용하여 정제한 결과, 수율이 0.4%, 정제배수가 43.0배였다. 정제효소의 최적 pH와 온도는 pH 10.0과 $50^{\circ}C$였으며, pH 7.0~l2.0의 pH 범위와 $40^{\circ}$ 이하에서 안정하였다. 금속이온 중 $Ag^{＋}$ /, $Ba^{2＋}$ /에 의하여 효소활성이 저해되었다. 한편, 본 효소는 PMSF에 의하여 선택적으로 활성이 억제됨으로써 활성부위에 serine을 가진 serine protease에 속하는 것으로 판단되었다.

• 미생물학회지
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• 제48권1호
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• pp.48-51
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• 2012

세포외 단백질분해효소를 생산하는 신종세균 Chryseobacterium sp. JK1은 토양으로부터 분리되었다. JK1 균주는 $30-35^{\circ}C$에서 skim milk를 첨가한 고체배지상에서 가장 큰 투명환을 보여주었다. 액체배지에서 JK1 균주의 세포생육은 24시간에 최대이었고, 세포외 단백질분해효소의 최대활성은 정지기인 22시간에 560 unit/ml에 도달하였다. Nutrient 배지에 maltose 혹은 glucose, mannitol을 첨가하면 생육이 향상되었지만, 단백질 분해효소 생산은 64-77%로 저조하였다. Skim milk 혹은 beef extract, yeast extract, malt extract, tryptone의 첨가는 향상된 생육과 줄어든 효소생산을 보인 반면, $(NH_4)_2HPO_4$ 또는 $(NH_4)_2SO_4$의 첨가는 저조한 생육과 121-146%의 향상된 효소생산을 보여 주었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제39권6호
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• pp.449-454
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• 1996

곤충 병원성 곰팡이 Beauveria bassiana(ATCC7159)로부터 곤충 cuticle 분해 효소인 extracellular protease의 최적 생산 조건을 gelatin, vine serum albumin(BSA), casein 및 polypeptone 등을 첨가하여 조사하였다. 이 효소의 최적 생산 배양 조건은 미량원소를 함유한 0.5% Polypeptone, 50mM potassium phosphate pH 6.0이었다. 이 조건에서 pretense의 생산은 배양 1일 후부터 급격히 상승하여 배양 3일 이후 최대로 생산되었으며 배양액의 pH가 7.0 이상이 되면 효소 생산효과가 거의 없었다. 이 pretenses는 phenyl methyl sulfonyl fluoride (PMSF)에 저해받는다. 효소 활성은 pH 8.5와 11.5에서 높게 나타났다. 또한 비변성 isoeletricfocusing gel 전기영동 후 각 gel 절편의 활성을 측정한 결과 protease활성이 세부분에서 나타났다. 따라서 탄소원 및 질소원으로 polypeptone을 이용하여 생산되는 pretense는 세종류 이상인 것으로 판단된다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제33권3호
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• pp.247-251
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• 1990

오징어 젓갈로 부터 분리한 protease를 생산하는 H5-2 균주는 Halobacterium 속 균으로 동정되었으며 NaCl 2.0M 이하의 배지에서는 생육하지 못하는 고도 호염성균이었고, 이 균의 protease 생산은 Nan 4.5M, yeast extract 0.4%, gelatin 1.5%를 첨가한 pH7.0의 Norberg & Hofsten 배지에서 $38^{\circ}C$로 $4{\sim}5$일간 배양했을 때 가장 양호하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제19권4호
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• pp.227-232
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• 1976

고춧가루가 국균(麴菌)의 각종(各種) 효소생산(酵素生産) 및 균체생육(菌體生育)에 미치는 영향을 규명할 목적(目的)으로 Aspergillus oryzae A (단모균)와 Aspergillus oryzae G(장모균) 균주를 고춧가루를 첨가한 밀기울 배지 및 Czapek-Dox 액체배지에 배양하여 그 효소력(酵素力), 건조균체중량 pH. 적정산도 등을 측정한 결과는 다음과 같다. 1. 밀기울 고체배지에 $0.05{\sim}30%$ 농도(濃度)의 고춧가루를 첨가한 구에서는 무염기질(無鹽基質)에서의 중성 및 알카리 protease의 활성이 대조구(밀기울 단독 배양구)에 비하여 높았으나 Aspergillus oryzae G의 경우는 고춧가루 첨가시 무염기질(無鹽基質)에서의 산성 protease의 생성이 오히려 저하 되었다. 2. $0.05{\sim}10%$의 고춧가루 첨가시는 내염(耐鹽)기질에서의 중성 및 알카리 protease의 활성이 대조구에 비하여 높았다. 3. 고춧가루 첨가(添加)는 amylase활성(活性)에 별(別)로 효과(效果)가 없었다. 4. Cellulase활성은 밀기울 단독구에 비하여 고춧가루 첨가구(添加區)에서 전반적(全般的)으로 높은 경향을 보였다. 5. Czapek-Dox액체배지상(液體培地上)에서 각균(各菌)의 건조균체중량(乾燥菌體重量)은 고춧가루 첨가농도(添加濃度)가 증가함에 따라 증가하는 경향을 보였고 단모균은 장모균에 비해 그 증가 현상이 현저하였다. 6. 고춧가루는 Czapek-Dox 첨가배지((添加培地)의 pH를 저하(低下)시키는 경향을 나타내었다. 7. 고춧가루 첨가농도(添加濃度)가 증가함에 따라 Czapek-Dox 액체배지의 적정산도는 증가현상을 나타내었으며 장모균에 비하여 단모균의 경우 적정산도의 증가현상이 현저했다.