Kim, Jung-Mogg;Kim, Joo-Sung;Kim, Na-Young;Kim, Yeoung-Jeon;Kim, In-Young;Chee, Young-Joon;Lee, Chul-Hoon;Jung, Hyun-Chae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권9호
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pp.1584-1589
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2008
Although resistance of Helicobacter pylori to clarithromycin is a major cause of failure of eradication therapies, little information is available regarding gene mutations of clarithromycin-resistant primary and secondary H. pylori isolates in Korea. In the present study, we examined gene mutations of H. pylori 238 rRNA responsible for resistance to clarithromycin. DNA sequences of the 238 rRNA gene in 21 primary clarithromycin-resistant and 64 secondary clarithromycin-resistant strains were determined by PCR amplification and nucleotide sequence analyses. Two mutations of the 238 rRNA gene, A2143G and T2182C, were observed in primary clarithromycin-resistant isolates. In secondary isolates, dual mutation of A2143G+T2182C was frequently observed. In addition, A2143G+T2182C+ T2190C, A2143G+T2182C+C2195T, and A2143G+T2182C+A2223G were observed in secondary isolates. Furthermore, macrolide binding was tested on purified ribosomes isolated from T2182C or A2143C mutant strains with $[^{14}C]$erythromycin. Erythromycin binding increased in a dose-dependent manner for the susceptible strain but not for the mutant strains. These results indicate that secondary isolates show a greater variety of 238 rRNA gene mutation types than primary isolates, and triple mutations of secondary isolates are associated with A2143G+T2182C in H. pylori isolated from Korean patients.
Magnaporthe grisea, a causal agent of blast, forms a specialized infection structure, an appressorium, to infect host. Hydrophobicity of contact surface and cAMP have been suggested as a primary environmental signal and a second messenger to trigger and mediate appressorium formation in this fungus, respectively. To generalize these factors in field isolates of M. girsea, twenty isolates originated from rice and other gramineous hosts were tested. Seventeen including rice and non-rice isolates formed appressoria on hydrophobic surface, but none of isolates formed appressoria on hydrophilic surface. Eighteen isolates formed appressoria on hydrophilic surface in the presence of IBMX, an inhibitor of phosphodiesterase, except two rice isolates. These results strongly support the hypothesis that appressorium formation by M. grisea is induced by hydrophobic hard surface and regulated by the endogenous level of cAMP in the cells. Understanding fungal development is not only of biological interest but provides new targets for novel disease control strategies.
Recently, the importance of management and cultivation of grasses has been increased in Korea. Among these cultural practices, the appropriate control of diseases is considered more important than other cultivation techniques such as fertilization and irrigation. The damages of brown patch and large patch caused by Rhizoctonia spp. and Pythium blight caused by Pythium spp. are serious in the major cultivation area of turfgrass in Korea. Since these diseases are difficult to control by agrochemicals, the damages are very serious if these are occured. The periodic spray of agrochemicals, to protect and control these diseases could make some problems of toxicity and environmental pollution as well as rising of non-target diseases. Therefore, the biological methods to control diseases have been required to decrease problems resulted from overuse of agrochemicals, to conserve natural ecosystem, and to control effectively diseases of grasses in the long period. The number of studies about biological control using antagonistic microorganisms have been increased for last half century. However, the application of biological control method has been very limited. In this study, thirteen isolates of R. cerealis, 8 isolates of R. solani and 3 isolates of Phthyn spp. have been isolated from diseased turfgrass in golf course and grass-culture area that have patch and wilting symptoms of zoysia grass and creeping bentgrass. Isolation frequency of R. cerealis and R. solani was high in especially zoysiagrass, while Pythym spp. was isolated from bent grass at low frequency but showed high pathogenicity. Totally, 205 isolates of soil microorganisms were isolated in this study as primary antagonistic microorganism by Herr's triple agar layer plate and dual culture method using rhizosphere of grasses, soil of crop field as the source of antagonistic microorganisms. Among the 205 isolates, 23 isolates were actinomycetes and 182 isolates were bacteria. All of the actinomycetes were isolated by Herr's method. Antagonistic effect of primary isolated microorganisms was tested for in vitro mycelial growth inhibition against pathogenic fungi isolated from grasses and for inhibition of disease occurrence in 24 well tissue culture plate and pot experiment. Then, four isolated of bacteria which are BG23, BG74, BG136 and BG171 were selected as antagonistic microorganisms against soil-born pathogenic fungi of bentgrass.
Seven transmembrane segment (7TMS) receptors for chemokines and related molecules have been demonstrated to be essential, in addition to CD4, for HIV and SIV infection. The beta-chemokine receptor CCR5 is the primary, perhaps sole, coreceptor for HIV-1 during the early and chronic phases of infection, and supports infection by most primary HIV-1 and many SIV isolates. Late-stage primary and laboratory-adapted HIV-1, HIV-2, and SIV isolates can use other 7TMS receptors. CXCR4 appears especially important in late-stage HIV infection; several related receptors can also be used. The specificity of SIV viruses is similar. Commonalities among these receptors, combined with analyses of mutated molecules, indicate that discrete, conformationally-depenclent sites on the chemokine receptors determine their association with the third variable and conserved regions of viral envelope glycoproteins. These studies are useful for elucidating the mechanism and molecular determinants of HIV-1 entry, and of inhibitors to that entry.
While many isolates of Alternaria alternata are common saprophytes on trees and shrubs, this study clearly demonstrated that A. alternata is a primary pathogen in lilac (Syringa sp.), causing a leaf-blight that affects different Syringa species. Isolates of Alternaria sp. were collected from leaf blight samples of lilacs in the field. The internal transcribed spacer (ITS) region and morphological characterization were used to identify lilac blight pathogen. Based on 100% ITS nucleotide sequence identities to the Alternaria genus in the GenBank and morphological features, these isolates were identified as A. alternata. Disease symptoms were reproduced in lilac plants inoculated with A. alternata mycelial plugs and sprayed with a fungus-free culture filtrate, indicating that pathogenesis in lilac involves secondary metabolites or toxins. Diagnostic primers were developed to detect Alternaria sp. and A. alternata in lilac leaf blight based on ITS region and four known genes associated with pathogenesis in A. alternata: mixed-linked glucanase precursor, endopolygalacturonase, hsp70, and histone genes. The results from our study indicated A. alternata is a primary pathogen in lilac leaf blight, and these diagnostic primers can be used as a tool for the fast detection of A. alternata associated with lilac leaf blight.
Gafur, Abdul;Mujim, Subli;Aeny, Titik Nur;Tjahjono, Budi;Suwanto, Antonius
Mycobiology
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제31권1호
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pp.19-22
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2003
The primary objective of the current research was to detect genetic variations within the Indonesian isolates of Cochliobolus heterostrophus collected from ecologically different places of the country at molecular level using PCR-RFLP analyses. The primer pair of NS3 and NS6 produced amplification fragment in all of the isolates tested. A single fragment of estimated 907 bp was observed in the PCR product pattern. RFLP analysis of the PCR product employing three restriction enzymes, HaeIII, HhaI, and RsaI, respectively, did not reveal intraspecific variations within the fungus. Similarly, nucleotide sequences of portion of small subunit of the ribosomal DNA gene of two of the isolates collected showed no appreciable differences, indicating the absence of genetic diversities among the isolates tested. A phylogenetic tree was constructed and the Indonesian C. heterostrophus, represented by SM-1 isolate, was found to be phylogenetically located near C. sativus, a closely related species.
The halophilic bacterium Vibrio vulnificus, previously called lactose-positive(L+) Vibrio and Beneckea vulnifica, causes acute, fulminating wound infections and septicemia in humans. Septicemia is very serious infection with a fatality rate of about 50%. Most patients with primary septicemia due to V. vulnificus have preexisting liver disease. V. vulnificus also cause severe wound infections usually after trauma and exposure to marine animals or the marine environment. The mortality rate is not nearly as high as in primary septicemia caused by this organism. In most cases human disease results from ingestion of contaminated seafood or from infection of a wound, frequently of seawater or crab origin. The author made an attempt to isolation of the V vulnificus from seawater, seamud, fish, shellfish, and algae on the southern sea of Korea from January to September in 1987, using for the purpose of vaccine preparation. The author investigated for bacteriological identification, hemolysis and determination of serotypes of isolated V. vulnificus strains. Eighty-five strains(5.9%) out of 1450 specimens collected of V. vulnificus were isolated. The distribution of the 85 isolates were as follows: 21 strains from seawater, 11 strains from seamud, 28 strains from fish, 19 strains from shellfish, and 6 strains from algae, respectively. All 85 isolates were positive reaction on human blood agar. The distribution of serotypes of V. vulnificus isolates were O1 to O8: 13 strains of O1, 6 strains of O2, 11 strains of O3, 9 strains of O4, 10 strains of O5, 7 strains of O6, 15 strains of O7, and 10 strains of O8, respectively. Eighty-one strains showed agglutination with O antisera, but 4 strains failed to show agglutination. In this study, the author suspected that serotypes of V. vulnificus isolates distributed also in the seaside of Korea as well as in most seaside of the world, and new serotypes were in existence in the seaside of Korea except reported up to now.
The objective of this study was to identify mutations in the quinolone resistance determining region (QRDR) of the gyrA, gyrB, parC and parE genes, and the presence of plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) genes: qnrA, qnrB, qnrS, aac(6')-lb-cr and qepA in 40 nalidixic acid- resistant ($NA^R$) Salmonella isolates isolated from poultry slaughterhouse. The MIC of NA and ciprofloxacin for 40 $NA^R$ Salmonella isolates was $128{\sim}512{\mu}g/mL$ and < $0.125{\sim}0.25{\mu}g/mL$, respectively. The Salmonella isolates were resistant to NA (100%), gentamicin (5.0%) and ampicillin (2.5%). All $NA^R$ Salmonella isolates represented point mutation in codons Aspartic acid(Asp)-87 (90%) and Serine(Ser)-83 (10%) of QRDR of gyrA gene: $Asp87{\rightarrow}glycine$, $Ser83{\rightarrow}tyrosine$. No mutations were observed in QRDR of the gyrB, parC and parE gene. Moreover PMQR genes was not found in any of the tested isolates. Our findings showed that DNA gyrase is the primary target of quinolone resistance and a single mutation in codon Asp87 and Ser83 of the gyrA gene can confer resistance to NA and reduced susceptibility ciprofloxacin in Salmonella isolates.
Nguyen, Manh Ha;Yong, Joo Hyun;Sung, Han Jung;Lee, Jong Kyu
Mycobiology
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제48권6호
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pp.484-494
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2020
Oak wilt disease caused by Raffaelea quercus-mongolicae has emerged obviously in Korea. We selected antifungal isolates against R. quercus-mongolicae among 368 endophytic fungal isolates from different parts of oak and pine trees. The experiment was conducted in the primary and secondary screenings by dual culture test. The antifungal activity of the selected isolates was assessed in culture filtrate test based on the inhibition rates in mycelial growth, sporulation, and spore germination of oak wilt fungus. Five isolates, E089, E199, E282, E409 and E415, showed strong antifungal activity in culture filtrate test, and their antifungal activity decreased on the culture media supplemented with heated culture filtrate. Higher mycelial growth inhibitions on the unheated media were recorded in E409 (Colletotrichum acutatum), E089 (Daldinia childiae), E415 (Alternaria alternata) and E199 (Daldinia childiae) with the inhibition rates of 79.0%, 70.1%, 68.9% and 64.5%, respectively. These isolates also had the higher sporulation inhibitions on unheated media with the rates of 96.8%, 84.2%, 82.8% and 80.5%, respectively. The spore germination of the oak wilt fungus was completely inhibited by E282 (Nectria balsamea) on both unheated and heated media. These results showed that a higher number of potent antifungal isolates against oak wilt fungus was isolated from the petiole compared to the other parts. This study could contribute to the development of biological control approaches for the management of oak wilt disease caused by R. quercus-mongolicae.
유아 분변으로부터 분리한 52 균주는 그람 양성균인 Listeria monocytogenes KCCM 40307$^T$에 대하여 항균활성이 있었고 그 중에서도 선별 균주 A24의 항균활성이 45% 이상으로 가장 높았다. Bifidobacterium longum A24의 생육 및 항균 물질 생산을 검토하였을 때 균체의 생육은 28시간 배양 시 최고에 도달하였고 항균 활성은 36시 간 배양 시 최고를 나타내었다. 선별균주 A24는 16S rRNA-based molecular typing 결과Bifidobacterium 속 균주임을 확인할 수 있었고 형태학적 ${\cdot}$ 생화학적인 방법으로 검토하여 보았을 때 Bifidobacterium longum으로 판단되었으며, 16s rDNA sequencing 결과 최종적으로 Bifidobacterium longum로 동정 되었으며 이것을 Bifidobacterium longum A24로 명명하였다. Bifidobacterium longum A24의 항균 활성 물질은 균체의 생육이 가장 좋은 28시간 배양에서가 아니라 그보다 늦은 36시간 배양에서 최고를 나타내었고 그 이후로는 활성이 감소하는 경향을 보였다. 이것은 Bifidobacterium longum A24이 생성하는 항균 활성 물질이 bacteriocin과 같은 2차 대사 산물임을 암시하는 결과로 해석된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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