These experiments were carried out to develop the practical technique for the production of identical twins in cattle. Morula and blastocyst stage embryos collected from superovulated donors were bisected into halves by micromanipulation. The resulting demi-embryos were transferred to the uterine horn ipsilateral to the corpus luteum of synchronous recipients. The viability of demi-embryos after splitting was also evaluated by culturing demi-embryos with and without a zona-pellucida. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. Of total 132 embryos collected by superovulation from 29 donors, 37 embryos were morular and 30 at blastocyst stages. 2. Total 111 demi-embryos were produced from 67 embryos by bisection and 98% of those were normal in morphology. 3. The viability of the demi-embryos cultured with zona-pellucida ranged from 70 to 76.5% and that of the demi-embryos without from 53.8 to 69.2%. 4. The viability of demi-embryos obtained from morula was 63.6% and that of demi-embryos from blastocyst was 73.3%, respectively. 5. 35 demi-embryos were transferred to 21 recipients, 7 of which were confirmed to be pregnant by rectal palpation at 55∼60 days after embryo transfer. One of them produced a calf and 6 are still on pregnancy.
A study was conducted to improve breeding efficiency of dairy and beef cows on Cheju Island. Milk progesterone and plasma progesterone profiles were determined by using radioimmunoassay techniques during the oestrus cycle, onset on oestrus and during the gestation period. Progesterone connections in milk were very low during the oestrus with a means value of 2.4ng/ml and 4.6ng/ml at the onset of oestrus but gradually declined at 4 to 9 hr after oestrus. In the cyclic cow, milk progesterone concentraitons in the early part of the cycle, ranged from 3 to 5ng/ml and increased from 6.0 to 11.6ng/ml on day 13 to 21 of cycle. Milk progesterone concentrations of pregnancy cows ranged from 5.0 to 40ng/ml during the gestation and grom basal line to 3.5ng/ml for nonpregnant cows. Plasma progesterone concentrations of beef during pregnancy period ranged form 3.0 to 33ng/ml and basal levels ranged from 0 to less than 2.5ng/ml for non-pregnant beef cows.
Lim, Hyun-Joo;Lee, Ji Hwan;Kim, Hyun Jong;Kim, Min Su;Kim, Tae Il;Park, Soo Bong
한국수정란이식학회지
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제33권3호
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pp.149-157
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2018
The objective of this study was to evaluate the effect of treating dairy cattle with exogenous human chorionic gonadotrophin (hCG), five (5) days post artificial insemination (AI) on serum progesterone (P4) concentration and pregnancy rate. In this experiment, five days after AI, cows were assigned randomly to two groups namely: a) treated group (67) which were administrered with 1500 IU hCG (Chorulon) and b) control group (61), which received no treatment. On day 5, 10, 15 and 20 after the artificial insemination, blood samples from a total of 8 cows (4 from each group) were collected and were analyzed for serum P4 concentration. Cows were detected for estrus according to standing heat by visual observation. Cows that were detected still in estrus after days 18-24 were re-inseminated and recorded as not pregnant (open). Pregnancy diagnosis was conducted by ultrasonographic examination and transrectal palpation of the uterus on approximately 60 days in cows that observed to be not in estrus. The conception rate in hCG treated and control groups were 52.5 and 36.1%, respectively. The results proved that there were no significant differences in conception rate between two groups (p=0.0568). However, pregnancy rates were reduced by hCG treatment. Average serum P4 concentrations did not differ between Hcg-treated and control groups on day 5 (0.377 versus 0.375 ng/ml). On day 20 serum P4 concentrations were greater in the treated group compared with the control group (3.085 versus 2.010 ng/ml). The treatment with hCG seemed to increase P4 level compared with the control. In conclusion, the results of this study showed that 1500 IU of hCG administered on 5 day post AI increased conception rate in dairy cows. This was supported by the results on serum P4 concentration which was greater in hCG treated group.
Chaiyabutr, N.;Preuksagorn, S.;Komolvanich, S.;Chanpongsang, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권10호
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pp.1359-1366
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2000
An experiment was carried out to study plasma levels of hormones and metabolites of crossbred Holstein cattle during late pregnancy (28 days pre partum), early lactation (30 days post partum), mid-lactation (120 days post partum) and late lactation (210 days post partum). Two breed types of Holstein $Friesian{\times}Red$ Sindhi (50:50 = 50%HF) and Holstein $Friesian{\times}Red$ Sindhi (87.5:12.5 = 87.5%HF) were divided into four groups of four animals each. Two groups of each breed were fed with either rice straw treated with 5% urea or pangola hay (Digitaria decumbens) as the source of roughage throughout the experiments. There were a substantial increases in the mean levels of total triiodothyronine ($T_3$), insulin and glucagon at the onset of lactation, and maintained in a high levels during lactation advance for all groups of experiments. The mean levels of prolactin and thyroxine ($T_4$) were not significantly different among groups of animals, but the plasma cortisol concentration was slightly higher in both groups of 50%HF in comparison with those of 87.5%HF animals. The mean levels of plasma growth hormone (GH) of both groups of 87.5%HF animals feeding on either hay or urea treated rice straw markedly rose in the early period of lactation and markedly reduced in mid- and late lactation. These changes were accompanied with changes of milk yield. In contrast to 50%HF animals, plasma GH levels were considerably higher in the late pregnant period than in the early period of lactation and it remained constant as its value at the early lactation throughout the experimental period. The high levels of both plasma progesterone and estradiol concentration significantly declined after parturition and remained low through lactating period. The plasma glucose level in the 50%HF animals feeding on either hay or urea treated rice straw was higher than the 87.5%HF animals in all periods of experiments. Changes in plasma FFA levels of both types of crossbred animals were depended on the endocrine status during late pregnancy and lactation. The levels of plasma FFA of 50%HF animals were significantly higher (p<0.05) than those of 87.5%HF animals during late pregnancy. Both plasma ${\beta}$-hydroxybutyrate and lactate concentrations were not affected by feeding on either hay or urea treated rice straw during late pregnancy and lactation. These data demonstrate that there were no differences in the physiological performances in the same crossbred animals fed either hay or urea treated rice straw. The 87.5%HF animal has the genetic potential for a high milk yield and homeorhetic adaptation for mammary function differed from 50%HF animals during periods of lactation. Altering lactation persistency in 87.5%HF is regulated mainly by chronically acting growth hormones through the period of lactation.
농촌 주민들의 소 사육 실태 및 브루셀라증에 대한 인지도 등을 파악하여 사람 및 소 브루셀라증 관리방안을 수립하는데 기초 자료로 활용하고자 본 조사를 실시하였다. 설문은 울진군 북면 및 포항시 기계면 주민 1,028명을 대상으로 성별 및 연령 등 일반적 사항과 브루셀라증에 대한 인지도, 소 사육 실태, 브루셀라증 보상에 관한 내용 등이 포함된 설문지를 이용하였다. '소 브루셀라증에 대하여 들어본 적이 있거나 아십니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 283명으로 27.5%가 알고 있었다. '소 브루셀라증이 사람에게도 감염된다는 사실을 알고 있습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 215명으로 77.6%가 알고 있었다. '여자에서 브루셀라증 감염 시 유산될 수 있다는 사실을 알고 있습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 98명으로 35.1%가 알고 있었다. '소 브루셀라 예방에 대한 교육이나 홍보 책자를 받은 적이 있습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 69명으로 24.7%가 받았다고 하였다. '최근 축산가에서 발생하는 소 브루셀라증 어떤 상태라고 생각하십니까?' 에 관한 설문에서 '심각하다' 라고 응답한 경우는 189명(68.5%)이었다. '최근 우리나라에서 발생하는 사람 브루셀라증은 어떤 상태라고 생각하십니까?' 에 관한 설문에서 '심각하다' 라고 응답한 경우는 185명(67.3%) 이었다. '키우는 암소에서 유산되거나 미숙한 송아지로 태어난 적이 있습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 28명(14.9%)이었다. '암소의 유산물이나 미숙 송아지를 맨손으로 직접 만졌습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 10명(5.3%)이었다. '소 브루셀라증이 발생하면 나라에서 보상해 준다는 것을 알고 있습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 46명(25.0%)이었다. '자신의 소가 유산한다면 가축위생시험소에 브루셀라 검사 신고를 하겠습니까?' 에 관한 설문에서 '예' 라고 응답한 경우는 114명(67.9%)이었고, 안하겠다는 이유로는 '신고하는 것인지 몰라서' 라고 응답한 경우가 36명(66.7%)으로 가장 많았다.
Oxygen consumption is a useful parameter for evaluating mammalian embryo quality, since individual bovine embryos was noninvasively quantified by scanning electrochemical microscopy (SECM). Recently, several approaches have been used to measure the oxygen consumption rates of individual embryos, but relationship between oxygen consumption and pregnancy rates of Hanwoo following embryo transfer has not yet been reported. In this study, we measured to investigate the correlation between oxygen consumption rate and pregnancy rates of Hanwoo embryo using a SECM. In addition to, the expression of pluripotent gene and anti-oxidant enzyme was determined using real-time PCR by extracting RNA according to the oxygen consumption of in vivo embryo. First, we found that the oxygen consumption significantly increased in blastocyst-stage embryos (blastocyst) compared to early blastocyst stage embryos, indicating that oxygen consumption reflects the embryo quality (Grade I). Oxygen consumption of blastocyst was measured using a SECM and total cell number of in vitro blastocyst was enumerated by counting cells stained by propidium iodide. The oxygen consumption or GI blastocysts were significantly higher than those of GII blastocysts ($10.2{\times}10^{15}/mols^{-1}$ versus $6.4{\times}10^{15}/mols^{-1}$, p<0.05). Total cell numbers of in vitro blastocysts were 74.8, 90.7 and 110.2 in the oxygen consumption of below 10.0, 10.0~12.0 and over $12.0{\sim}10^{15}/mols^{-1}$, respectively. Pregnant rate in recipient cow was 0, 60 and 80% in the transplantation of embryo with the oxygen consumption of below 10.0, 10.0~12.0 and over $12.0{\times}10^{15}/mols^{-1}$, respectively. GPX1 and SOD1 were significantly increased in over -10.0 group than below 10.0 groups but in catalase gene, there was no significant difference. On the other hand, In OCT-4 and Sox2, pluripotent gene, there was a significant difference (p<0.05) between the below-10.0 ($0.98{\pm}0.1$) and over 10.0 ($1.79{\pm}0.2$). In conclusion, these results suggest that measurement of oxygen consumption maybe help increase the pregnant rate of Hanwoo embryos.
Pseudorabies is caused by Pseudorabies virus (PRV: Aujeszky's disease virus) of Herpesviridae that is characterized by 100 to 150nm in size with a linear double-stranded DNA molecule with of approximately $90{\times}10^6Da$. This disease affects most of domestic animals such as swine, cattle, dog, sheep, cat, chicken, etc. causing high mortality and economic losses. In swine, young piglets show high mortality and pregnant sows, reproductive failures. However the adult swine reveals no clinical signs in general. But they become a carrier state and play an important role for propagation of the disease. In this study, the nucleotide sequence of major casid protein gene of PRV, Yangsan strain isolated from the diseased swine in Korea was analyzed, and the recombinant MCP was produced by expression of the MCP gene in Sf-9 cell using baculovirus transfer vector system. As result, in BamHI digestion, MCP gene locus of PRV YS strain showed different from that of Indiana S strain. The patterns of enzyme mapping were also found to be unidentical each other. The sequence of the MCP gene partially analyzed showed 98.09% identity to Indiana S strain. The expression of MCP in Sf-9 cell cotransfected by pVLMCP-44 baculovirus expression vector was characterized by Southern blot hybridization, immunofluoresent and immunocytochemical tests, SDS-PAGE and Western blotting. The rMCP with M.W. 142kDa was most effectively expressed in Sf-9 cells at the 3-4th days post inoculation of the recombinant baculovirus by 2 moi.
This stduy was carried out to find a reliable method for the production of in vitro fertilized embryos having more excellent development capacity and freezability in the rabbit and cattle. The greatest number of rabbit oocytes was recovered 6hrs after HCG injection(P<0.05). The maturation rate in vitro was slightly higher in the oocytes(6-h-oocytes) from 6h than those (8-h-oocytes)from 8 hrs after HCG injection and the beneficial effect of FSH during oocyte maturation was significantly great in the oocytes from large follicles. The cleavage rate into 2-to-6-cell stage was not differ between the 6-h-oocytes and 8h-oocytes, but the cleavage of these oocytes was greatly promoted by FSH addition to maturation medium and the cleavge of 8-h-oocytes matured without FSH was significantly low. The embryo development into 16-cell to morula was not promoted by the co-culture with rabbit oviduct epithelial cells. The freezability by embryo stages was ovidusly high at 4-cell and morula stage in 6-h-oocytes and the viability of 16-cell embryos from 8h-oocytes was similar to that of morula stage. The implantation sites after surgical tranfer of fresh rabbit embryos were not implanted. In bovine experiment, the in vitro development into 16-cell and morula after in vitro maturation and fertilization in the follicular oocytes was slightly improved by the co-culture with granulosa cells compared to that with oviduct epithelial cells and the frozen-thawed viability rate of these embryos ranged from 14 to 40%. The excellent fresh embryos were transferred nonsurgically to 6 recipients, but were not pregnant.
Experiments were conducted to assess the effect of quality and viability of bovine blastocysts derived from in-vitro culture(IVC) of in vitro matured and fertilized(IVM-IVF) oocytes during their transport 2 hours. Follicular oocytes were collected form ovaries obtained at a slaughterhouse and were cultured for 24 hours in TCM-199. The IVM oocytes were fertilized in vitro with caudal epididymis spermatozoa. Fertilized oocytes were cultured for 7 to 9 days, and embryos that developed to the blastocyst stage were used for the experiment. The blastocysts, packed in straws with storage medium that consisted TCM-199 with HEPES equilibratd in air and supplemented with 10% FCS were transported at 39~(2.0 h). The quality of blastocysts was assessed and ranked as A(excel-lent), B(Good), fair or poor after transportation. The percentages of A and B grade blastocysts after transport duration for < 1 hours(97.7%) were similar to the result from transport duration for 1~2 hours (92.9%) and 2~3 hours(89.6%), but significantly(P<0.05) higher than transpot duration for 3~4 hours(76.3%). The percentages of A and B grade blastocysts after transport duration for two hours from developed blastocyst at 7day(100%) and 8day(85.0%) were higher 9day(96.6%) and >9day (40.0%). And early to expanded blastocyst produced in vitro were transferred to recipient cow by additional embryos at 7 and 8th day after AI. Three of them were pregnant to term and produced four twin calves, and two calves was premature birth. The gestation lengths of male to female and female to female twin were 282 and 281 days, respectively. And birth weight of twin calves were male to female(22.Skg) and female to female twin(20.3Okg), respectively.
Cell-free fetal RNA has been highlighted as useful tools for the fetal sex determination or other genetic inherent disorder. However, there is no knowledge about the sex determination using cell free fetal RNA in bovine field. Thus, the present study aimed to evaluate the presence of transcripts of DDX3Y, USP9Y and ZRSR2Y genes in maternal plasma of pregnant cows to determine the sex of the fetus using real-time quantitative polymerase chain reaction assay, and verify its accuracy, sensitivity and specificity compared with the molecular testing and the calf sex at birth. Transcripts of USP9Y and DDX3Y genes were expressed in the all plasma of males and females both the control group and the experimental group. However, ZRSR2Y gene was matched up with the molecular testing and the true sex in control group and has an overall accuracy of 82.6%, a sensitivity of 75%, and a specificity of 100% in experimental group. Therefore, these results indicated that real time PCR technique, as a noninvasive and cost-efficient method, is possible to determination fetal sex in the bovine species using circulating cell free RNA in maternal plasma and especially ZRSR2Y gene could be a good candidate for the RNA based sex determination work.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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