Rapid production of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) has been implicated in the regulation of innate immunity in plants. A potato calcium-dependent protein kinase (StCDPK5) activates an NADPH oxidase StRBOHA to D by direct phosphorylation of N-terminal regions, and heterologous expression of StCDPK5 and StRBOHs in Nicotiana benthamiana results in oxidative burst. The transgenic potato plants that carry a constitutively active StCDPK5 driven by a pathogen-inducible promoter of the potato showed high resistance to late blight pathogen Phytophthora infestans accompanied by HR-like cell death and $H_2O_2$ accumulation in the attacked cells. In contrast, these plants showed high susceptibility to early blight necrotrophic pathogen Alternaria solani, suggesting that oxidative burst confers high resistance to biotrophic pathogen, but high susceptibility to necrotrophic pathogen. NO and ROS synergistically function in defense responses. Two MAPK cascades, MEK2-SIPK and cytokinesis-related MEK1-NTF6, are involved in the induction of NbRBOHB gene in N. benthamiana. On the other hand, NO burst is regulated by the MEK2-SIPK cascade. Conditional activation of SIPK in potato plants induces oxidative and NO bursts, and confers resistance to both biotrophic and necrotrophic pathogens, indicating the plants may have obtained during evolution the signaling pathway which regulates both NO and ROS production to adapt to wide-spectrum pathogens.
Viral diseases have been a major limiting factor threating sustainable potato (Solanum tuberosum L.) production in Pakistan. Surveys were conducted to serologically quantify the incidence of RNA viruses infecting potato; Potato virus X (PVX), Potato virus Y (PVY), Potato virus S (PVS), Potato virus A (PVA), Potato virus M (PVM) and Potato leaf roll virus (PLRV) in two major potato cultivars (Desiree and Cardinal). The results suggest the prevalence of multiple viruses in all surveyed areas with PVY, PVS and PVX dominantly widespread with infection levels of up to 50% in some regions. Co-infections were detected with the highest incidence (15.5%) for PVX and PVS. Additionally the data showed a positive correlation between co-infecting viruses with significant increase in absorbance value (virus titre) for at least one of the virus in an infected plant and suggested a synergistic interaction. To test this hypothesis, glasshouse grown potato plants were challenged with multiple viruses and analyzed for systemic infections and symptomology studies. The results obtained conclude that multiple viral infections dramatically increase disease epidemics as compared to single infection and an effective resistance strategy in targeting multiple RNA viruses is required to save potato crop.
In vitro grown microtubers of potato (cv Jaju) were used for introduction of herbicide resistance gene using bombardment with DNA-coated particles. The apical shoot-tip area of newly sprouted microtubers were intensively bombarded. After bombardment, microtubers were germinated and transplanted in a greenhouse. Northern blot analysis indicated that bar gene was expressed in two plantlets. After 5 weeks of growing, commercial herbicide Basta was sprayed to screen the resistant plants. All untransformed potato plants died after 7 days while two transgenic plants survived.
The severities of major tobacco diseases had been surveyed throughout northern Kyeongbuk, a major flue-cured tobacco growing district in Korea, in relation to the actual control method used by the farmers in 1992. At seedling stage, anthracnose caused by Colletotrichum nicotianae was major disease of the plant due to poor damage of the temporary transplanting pots. Mosaic caused by tobacco mosaic virus(TMV) was very severe in certain of greenhouses. Although viral disease caused by TMV, cucumber mosaic virus(CMV) and by potato virus Y(PVY) were severe in fields, but mosaic by TMV was major of the diseases. Potato virus Y was found later than that in Honam district. The late occurrence of the disease might be caused the difference between cultivating method of potato plants in northern Kyeongbuk and that in Honam district. In fields suffered from hail disaster, the damage of tobacco plants by angular leaf spot was severe. Most of tobacco growers had wrong information about the practical methods not only of milk treatment for the protection of the plants from TMV, but also of fungicide applications for the control of other major diseases. It suggested that education on the methods to the farmers must be very important for control of the diseases.
Khan, Raham Sher;Sjahril, Rinaldi;Nakamura, Ikuo;Mii, Masahiro
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.13-20
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2008
Potato (Solanum tuberosum L.), one of the most important food crops, is susceptible to a number of devastating fungal pathogens in addition to bacterial and other pathogens. Producing disease-resistant cultivars has been an effective and useful strategy to combat the attack of pathogens. Potato was transformed with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 harboring chitinase, (ChiC) isolated from Streptomyces griseus strain HUT 6037 and bialaphos resistance (bar) genes in a binary plasmid vector, pEKH1. Polymerase chain reaction (PCR) analysis revealed that the ChiC and bar genes are integrated into the genome of transgenic plants. Different insertion sites of the transgenes (one to six sites for ChiC and three to seven for bar) were indicated by Southern blot analysis of genomic DNA from the transgenic plants. Expression of the ChiC gene at the messenger RNA (mRNA) level was confirmed by Northern blot analysis and that of the bar gene by herbicide resistance assay. The results obviously confirmed that the ChiC and bar genes are successfully integrated and expressed into the genome, resulting in the production of bialaphos-resistant transgenic plants. Disease-resistance assay of the in vitro and greenhouse-grown transgenic plants demonstrated enhanced resistance against the fungal pathogen Alternaria solani (causal agent of early blight).
Yi, Jung Yoon;Seo, Hyo Won;Yun, Song Joong;Ok, HyunChoong;Park, YoungEun;Cho, Ji Hong;Cho, HyunMook
Korean Journal of Breeding Science
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v.41
no.4
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pp.385-390
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2009
A resveratrol synthase (RS) gene was isolated from peanut (Arachis hypogaea, L. cv. Jinpoong) plants. This gene was placed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter (CaMV35S) and introduced into two Korean varieties of potato (Solanum tuberosum L. cvs. Jasim and Jowon) plants by Agrobacterium-mediated gene transfer. Putative transformants were screened by PCR with primers designed from CaMV 35S promoter, NOS terminator and RS gene. Most of selected transgenic potato plants showed the amplification of expected fragments by PCR of genomic DNA with gene-specific primers, while they were absent in untransformed control plants. Expression of the resveratrol synthase gene was also examined by northern blot analysis. The transformants showed a band which was lacking in the control plant, confirming that the introduced gene is transcribed into mRNA in the transformants. The strength of the band, which reflected the level of mRNA expression, differed among the individual transformants. Among the transformants obtained, the highest trans-resveratrol content in the transgenic young leaves of purple-fleshed "Jashim" was $2.11{\mu}gg^{-1}$ fresh weight and that in the microtubers in vitro of purple fleshed "Jashim" was $8.31{\mu}gg^{-1}$ fresh weight. This amount of resveratrol may have a positive biological effect on human health.
Oxidative stress is a major damaging factor for plants exposed to environmental stresses. Previously, we have generated transgenic potato (cv. Superior) plants expressing both CuZnSOD and APX genes in chloroplast under the control of an oxidative stress-inducible SWPA2 promoter (referred to as SSA plants) and selected the transgenic potato plant lines with tolerance against methyl viologen (MV)-mediated oxidative stress. When leaf discs of SSA plants were subjected to $3{\mu}M$ methyl viologen (MV), they showed approximately 40% less damage than non-transgenic (NT) plants. SSA plantlets were treated with $0.3{\mu}M$ MV stress, SSA plants also exhibited reduced damage in root growth. When 350 MV was sprayed onto the whole plants, SSA plants showed a significant reduction in visible damage, which was approximately 75% less damage than leaves of NT plants. These plants will be used for further analysis of tolerance to environmental stresses, such as high temperature and salt stress. These results suggest that transgenic potato (cv. Superior) plants would be a useful plant crop for commercial cultivation under unfavorable growth conditions.
Carbohydrates serve three different principal functions in the metabolism of plants. They are the primary products of energy fixation, they are important transport metabolites, and they are deposited as structural or storage compounds. Modification of carbohydrate metabolism therefore covers approaches to modify yield, to change sink/source relationships and thereby alter the ratio of harvestable material, and to improve the quality of crop plants. The scope of this article is to summarize research done at the Max-Planck-Institute related to the first two fields and to present in some detail what we learned, when we established a new carbohydrate storage form in potato.
Ferritin is ubiquitous in bacteria, animals and plants. Ferritin is thought to play two main roles in living cells to provide iron for the synthesis of iron protein such as ferretoxin and cytochromes and to prevent damage from radicals produced by iron/dioxygen interaction. To enhance the resistance of potato to Erwinia carotovora, the soybean ferritin gene was introduced into the potato either under CaMV 35S or hsr203J promoter. Potato transgenic plants were screened by PCR analysis using specific primers to the ferritin gene. Expression of ferritin gene under CaMV 35S and hsr203J promoter in potato transgenic plants was confirmed by northern blot analysis. hsr203J promoter known to pathogen inducible in tobacco drives the induction upon Phytophthora infestan in potato and the transcript level of ferritin gene was extremely high after 24 hours post inoculation. One of transformants under CaMV 35S promoter was increased 2.5 fold than untransformant. Each one of transgenic potato containing gene promoter CaMV 35S and hsr203J-ferrtin fusion exhibited tolerance against potato soft rot.
Chung, Bong Nam;Canto, Tomas;Tenllado, Francisco;Choi, Kyung San;Joa, Jae Ho;Ahn, Jeong Joon;Kim, Chun Hwan;Do, Ki Seck
The Plant Pathology Journal
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v.32
no.4
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pp.321-328
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2016
We examined the effects of temperature on acquisition of Potato virus Y-O (PVY-O), Potato virus A (PVA), and Potato leafroll virus (PLRV) by Myzus persicae by performing transmission tests with aphids that acquired each virus at different temperatures. Infection by PVY-O/PVA and PLRV increased with increasing plant temperature in Nicotiana benthamiana and Physalis floridana, respectively, after being transmitted by aphids that acquired them within a temperature range of $10-20^{\circ}C$. However, infection rates subsequently decreased. Direct qRT-PCR of RNA extracted from a single aphid showed that PLRV infection increased in the $10-20^{\circ}C$ range, but this trend also declined shortly thereafter. We examined the effect of temperature on establishment of virus infection. The greatest number of plants became infected when N. benthamiana was held at $20^{\circ}C$ after inoculation with PVY-O or PVA. The largest number of P. floridana plants became infected with PLRV when the plants were maintained at $25^{\circ}C$. PLRV levels were highest in P. floridana kept at $20-25^{\circ}C$. These results indicate that the optimum temperatures for proliferation of PVY-O/PVA and PLRV differed. Western blot analysis showed that accumulations of PVY-O and PVA coat proteins (CPs) were lower at $10^{\circ}C$ or $15^{\circ}C$ than at $20^{\circ}C$ during early infection. However, accumulation increased over time. At $25^{\circ}C$ or $30^{\circ}C$, the CPs of both viruses accumulated during early infection but disappeared as time passed. Our results suggest that symptom attenuation and reduction of PVY-O and PVA CP accumulation at higher temperatures appear to be attributable to increased RNA silencing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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