Ji-Eun Eom;Gun-Dong Kim;Young In Kim;Kyung min Lim;Ju Hye Song;Yiseul Kim;Hyeon-Ji Song;Dong-Uk Shin;Eun Yeong Lim;Ha-Jung Kim;Sung Hoon Kim;Deuk Sik Lee;So-Young Lee;Hee Soon Shin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.5
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pp.634-643
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2023
Chronic obstructive pulmonary disease (COPD), one of the leading causes of death worldwide, is caused by repeated exposure to harmful matter, such as cigarette smoke. Although Lilium longiflorum Thunb (LLT) has anti-inflammatory effects, there is no report on the fermented LLT bulb extract regulating lung inflammation in COPD. Thus, we investigated the protective effect of LLT bulb extract fermented with Lactobacillus acidophilus 803 in COPD mouse models induced by cigarette smoke extract (CSE) and porcine pancreas elastase (PPE). Oral administration of the fermented product (LS803) suppressed the production of inflammatory mediators and the infiltration of immune cells involving neutrophils and macrophages, resulting in protective effects against lung damage. In addition, LS803 inhibited CSE- and LPS-induced IL-6 and IL-8 production in airway epithelial H292 cells as well as suppressed PMA-induced formation of neutrophil extracellular traps in HL-60 cells. In particular, LS803 significantly repressed the elevated IL-6 and MIP-2 production after CSE and LPS stimulation by suppressing the activity of the nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B (NFκB) in mouse peritoneal macrophages. Therefore, our results suggest that the fermented product LS803 is effective in preventing and alleviating lung inflammation.
Actinobacillus pleuropneumoniae is the causative agent of a porcine contagious pleuropneumonia. Among several virulence factors including exotoxin (Apx toxins), LPS, transferrin-binding proteins, OMPs, and some proteases, Apx toxins have been major targets for the protection study. In this study, cloning and expression of A. pleuropneumoniae Apx I and Apx II toxin, which are produced by all highly virulent strains, were performed by Escherichia coli expression system. Genes coding Apx I and II toxin were amplified from the A. pleuropneumoniae serotype 5 genomic DNA using polymerase chain reaction and cloned to a prokaryotic expression vector, pRSET. Expression of the Apx I and Apx II coding sequences in E. coli resulted in the formation of insoluble inclusion bodies purified according to a denaturing purification protocol, which employs the use of guanidium. Recombinant proteins were purified using $Ni^{2+}$-charged resin affinity purification. This expression and purification system made it possible to produce Apx I and Apx II in large amounts for further immunologic studies.
The primary aim of this study was to investigate biosecurity practices in pig farms and to determine the major risk factors associated with PCV2 infection for a sampled swine population in Korea. To this end, we analyzed data from a cross-sectional study of 296 farrow-to-finish farms, which was conducted between March and September 2014 to explore the prevalence of swine disease at farm level. Face-to-face interviews by on-site visit of trained veterinarians were conducted with the farm owners or managers using a standardized questionnaires with information about basic demographical data and management practices. Farms were classified as negative or positive through the use of infection profiles that combined data on serological testing including PCR antigen test result, antibody titer and sero-conversion pattern at each age category taking into account vaccination status. Data were analyzed using multivariate ordinal logistic regression. Results from this study indicated that biosecurity level of the farms was considered not good given low compliance of the biosecurity programs and facilities in the farm: off-site removal of dead stocks (7%), off-site location of storage facility for incoming feeds (12.6%), off-site pick-up location for finishers (19.3%), restrictions on feed supplier vehicles for farm entrance (19.6%), restriction of finisher trucks entering the farm (22.4%), and restriction on manure disposal trucks entering the farm (26.4%). In the final model (n = 255), allowance of finisher truck driver to the pig unit had increased risk of infection (OR = 2.4, 95% CI 1.22-4.67) whereas farms with a sign forbidding the entrance had decreased risk of infection (OR = 0.19, 95% CI 0.10-0.58). Further comprehensive research with larger sample size is required to better understand the multifactorial characteristic that some predisposing risk factors that were not available in this study. To the best knowledge of the authors, this was the first study to use empirical data to report risk factors associated with PCV2 infection in the Korean pig farms. Results from the current study could be used to decide optimal biosecurity measures to reduce the impact of PCV2 infection to farmers and policy makers.
As S-nitrosothiols were proposed as nitrergic carriers in vascular and nonvascular smooth muscle, we have investigated the relaxant properties of several S-nitrosothiols in the porcine retractor penis(PRP) muscle and compared them with the effects of exogenously added NO, electrical field stimulation(EFS) of NANC nerves and sodium nitroprusside(SNP). Also the influences of oxyhemoglobin and hydroquinone on the relaxant responses were investigated. In addition, effects of NO on membrane potentials and its involvement in the generation of inhibitory junction potential(IJP) were investigated with conventional intracellular microelectrode technique. The results were summerized as follows. 1. Frequency-dependent relaxations of PRP muscle were induced by EFS to NANC nerve. Tetrodotoxin($1{\times}10^{-6}M$) abolished the relaxations of PRP muscle induced by EFS, and L-NAME(($2{\times}10^{-5}M$) and methylene blue($4{\times}10^{-5}M$) inhibited the relaxations. L-NAME-induced inhibition of the relaxations was reversed by L-arginine($1{\times}10^{-3}M$), but not by D-arginine. 2. Exogenous NO($1{\times}10^{-5}-1{\times}10^{-4}M$), sodium nitroprusside(($1{\times}10^{-7}-1{\times}10^{-4}M$) induced dose-dependent relaxations of PRP muscle. All S-nitrosothiols($1{\times}10^{-7}-1{\times}10^{-4}M$) tested relaxed the PRP muscle in dose-dependent manner and the potency order was SNAP>GSNO>CysNO>SNAC. 3. Oxyhemoglobin($5{\times}10^{-5}M$) blocked the relaxation induced by exogenous NO and inhibited EFS-, S-nitrosothiols-, and SNP-induced relaxation. 4. Hydroquinone($1{\times}10^{-4}M$) also abolished the relaxations induced by exogenous NO, and reduced the relaxations induced by S-nitrosothiols, but did not affect EFS- and SNP-induced relaxations. 5. SNP($2{\times}10^{-6}-5{\times}10^{-6}M$) relaxed muscle strips but the membrane potentials were not affected. 6. EFS with several pulses(1ms, 2Hz, 80V) produced an inhibitory junction potential(IJP) with muscle relaxation. They were abolished by TTX($2{\times}10^{-6}M$). $N^G$-nitro-$_{\small{L}}$-arginine(L-NNA, $2{\times}10^{-5}M$) abolished the muscle relaxation, but had no effect on IJP.
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) causes major economic losses to the Korean pig industry. ELISA tests using recombinant nucleocapsid protein of PRRSV have been most commonly used for PRRS diagnostics. In the current study, two commercial PRRSV ELISA kits (Bionote PRRSV Antibody ELISA and IDEXX 3XR PRRS Antibody ELISA) have been compared using sera collected from 19 swine farms in various stages of PRRSV infection confirmed by professional diagnostic centers. Thus 130 sera collected from 5 different farms with active PRRSV infection, 130 sera from 6 different farms with PRRS-stabilized status, and 140 sera from 8 different farms with PRRS-free status were evaluated to determine the correlation of test results between those ELISA kits. Both ELISA kits showed a good correlation [PRRSV-positive farms ($R^2$=0.6375) and stabilized farms ($R^2$=0.8928)] in sample-to-positive (S/P) ratio va lues. Among the 140 sera from negative farms, one sample was falsely positive by either of the ELISA kits. In conclusion, both of the ELISA kits showed a good correlation when applied on field samples collected from farms at various stages of PRRSV infection. Bionote ELISA or IDEXX ELISA gave a false positive result on 1 out of 140 negative samples so their specificity was calculated as 99.3%. Therefore, Bionote ELISA would be a good complementary and alternative method for IDEXX ELISA kit, and vice versa.
The study is to investigate effects of andrographolide on experimental autoimmune myocarditis (EAM). Lewis rats were immunized on day 0 with porcine cardiac myosin to establish EAM. The EAM rats were treated with either andrographolide (25, 50, 100 mg/kg/day) or vehicle for 21 days. An antigen-specific splenocytes proliferation assay was performed by using the cells from control rats immunized with cardiac myosin. Survival rates, myocardial pathology and myocardial functional parameters (left ventricle end-diastolic pressure, ${\pm}dP/dt$ and left ventricular internal dimension) of EAM rats received andrographolide were significantly improved. Andrographolide treatment caused an decrease in the infiltration of $CD3^+$ and $CD14^+$ positive cells in myocardial tissue. Moreover, andrographolide treatment caused a reduction in the plasma levels of tumor necrosis factor-alpha, interleukin-17 (IL-17) and myosin-antibody, and an increase in the level of IL-10 in EAM rats. Oral administration of andrographolide resulted in the decreased expression of p-PI3K, p-Akt without any change of PI3K and Akt. Further results indicate andrographolide significantly inhibited myosin-induced proliferation in splenocytes, and this effect was inhibited by co-treatment of SC79 (Akt activator). Our data indicate andrographolide inhibits development of EAM, and this beneficial effect may be due to powerful anti-inflammatory activity and inhibitory effect on PI3K/Akt pathway.
The objective of this study was to evaluate the usefulness of detection of PRRSV and PRRSV-specific antibodies in oral fluids for monitoring of PRRSV infection in endemic farms. The level of PRRSV and anti-PRRSV antibodies in serum and oral fluids was evaluated in five age groups of pigs (6, 9, 12, 16 weeks of age and gilts). The samples (25 serums and 5 oral fluids/per a farm) were collected from 5 different farms endemically infected by PRRSV. Both serum and oral fluid samples were tested for PRRSV by quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and for anti-PRRSV antibodies by two commercial PRRSV ELISA kits. ELISA mean s/p ratios (2.98 vs 1.63) and positive rate (84.0% vs 68.8%) of the oral fluid samples showed significantly higher levels but had similar patterns to the seroprofile of the blood samples. The PRRSV positive rate of oral fluid and serum samples was 40.0% and 44.0% respectively. In conclusion, the use of oral fluids for PRRS monitoring in endemic farms is strongly recommended.
Enantioselective production of levofloxacin from ofloxacin butyl ester by porcine liver esterase was enhanced with the addition of ${\alpha}$-cyclodextrin(${\alpha}-CD$) and pH change. The conversion yield was increased from 27 to 64% and 100% with 150 mM substrate when the molar ratio of ${\alpha}-CD$ to substrate was 1 and 2, respectively. When 100 mM of substrate was added with the same molar ratio of ${\alpha}-CD$ at pH 5.6, the solubility was increased 3.8 times and the conversion yield was increased 4.4 times.
Seo, Il-Hwan;Lee, In-Bok;Moon, Oun-Kyung;Kwon, Kyeong-Seok
Journal of The Korean Society of Agricultural Engineers
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v.56
no.1
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pp.41-49
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2014
Pig chronic wasting disease, including porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) and postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS), have made a continuous economic damage in pig farms. Airborne spread of livestock viruses are an important spread factor which is difficult to analyze due to invisible airflow and limitation of measurement. The objective of this study is to analyze airborne disease spread between buildings in the experimental pig farm by means of field experiment and computational fluid dynamics (CFD). The field experiments were conducted to capture airborne virus using air sampler and teflon filter along multi points in the experimental pig farm. The samples were tested in terms of virus detection resulting in positive reaction for PRRS and PCV-2 viruses, which can be a firm evidence of airborne virus spread. The CFD simulation model was developed by considering complex topography, wind conditions, building arrangement, and ventilation systems and was used to analyze airborne virus spread according to different wind conditions. The CFD computed result showed a possibility of airborne virus spread via livestock aerosol from infected pig house to neighboring pig houses according to wind directions. The CFD simulation technique is expected to provide significant data for estimating and making a counterplan against airborne disease spread.
More than 20 years after the first report of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in Korea, the disease is still having major impact on domestic pig health and relevant industries. Although ELISA tests are commonly used by veterinarians to guide herd management, data on diagnostic performance of the test in field settings are very limited. The objective of this study was to evaluate two commercially available PRRSV ELISA (IDEXX PRRS X3 ELISA and Bionote PRRSV ELISA 4.0) to detect antibodies against PRRSV on serum samples. To this end, a total of 1,108 sera were recruited from 35 swine farms located in Gyeonggi province and tested at the Gyeonggi Province Veterinary Service Center. All tests were performed according to the manufacturer's instructions, by laboratory technicians who routinely perform PRRS testing on blood samples. Samples were collected from two sources of swine populations with different PRRS prevalence; 60 samples (5.4%) were originated from breeding farms and the remaining 1,048 samples (94.6%) were from farrow-to-finish farms. We applied Bayesian latent class model (LCM) for two-tests in the two-population when the accuracy of the gold standard is not available. The model estimated that Bionote ELISA was a bit more specific but slightly less sensitive. The estimated sensitivity and specificity of the IDEXX ELISA were 99.8% (95% CI 98.1-100%) and 86.4% (95% CI 81.4-96.5%), respectively. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value for Bionote kit were 98.7% (95% CI 92.8-100%), 89.8% (95% CI 86.2-93.1%), 93.8% (95% CI 91.5-96.0%), and 97.8% (95% CI 87.1-100%), respectively. Based on the Bayesian 95% credible intervals, the sensitivity and specificity of the two ELISAs were not significantly different each other when assuming that two kits were imperfect, indicating that two kits performed equally well in terms of sensitivity and specificity in our filed setting.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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