The polysaccharide (BB-pol) extracted from Bifidobacterium bifidum BGN4 showed growth inhibitory effects on several colon cancer cell lines such as HT-29 and HCT-116. To increase the yield of polysaccharide, B. bifidum BGN4 was cultured in various culture media with different compositions. When B. bifidum BGN4 was cultured in modified MRS broth containing phytic acid, the cells showed increased branch formation and enlarged morphology. The content of total carbohydrate and the ability of adhesion to intestinal epithelial cells were also increased by phytic acid. The polysaccharide obtained from the cells grown in the presence of phytic acid inhibited the proliferation of cancer cell lines such as HT-29 and MCF-7 cells but not normal colon cell line, FHC. Taken together, Bifidobacterium grown in the presence of phytic acid may confer enhanced beneficial function for the host.
The polysaccharides from fruit body of Auricularia auricula and Tremella fuciformis were extracted using hot water, and partially purified through ethanol precipitation and dialysis. Free radical scavenging activities of the crude and purified polysaccharides were examined and compared each other. Free radical scavenging activities of the partially purified polysaccharides were higher than those of crude polysaccharides. DPPH free radical, ABTS radical and SOD-like activities of partially purified polysaccharide at 1 mg/mL of concentration from A. auricula were 61.7, 9.6 and 38.9%, respectively, while those of T. fuciformis were 9.6, 5.7 and 15.3%, respectively. Results of site and non-site specific hydroxyl radical scavenging activities indicated that the partially purified polysaccharide fractions from A. auricula and T. fuciformis exhibited the hydroxyl radical scavenging effect by hydrogen donating ability and iron ion chelating ability. Also, reducing powers of A. auricula and T. fuciformis were 77.1 and 14.7% of BHT (0.1%) as standard, respectively. It was suggested that antioxidant activities of A. auricula were about 1.4~6.4 times higher than those of T. fuciformis due to different levels of polyphenol content.
A protein-polysaccharide fraction was isolated from the mycelial culture of a Korean basidiomycetous fungus, Hebeloma crustuliniforme, and was named HCA (Hebeloma crustulineforme fraction A). When intraperitoneally injected at 200 mg/kg/day once daily for 10 days, HCA inhibited the growth of sarcoma 180 solid tumor in ICR mice by 65.1% (p<0.05). HCA also exerted protective effect against leukopenia induced by cyclophosphamide with the protection ratio of 39.7% (p<0.01).
CHOI DU BOK;KANG SI HYUNG;SONG YON HO;KWUN KYU HYUK;JEONG KYOUNG JU;CHA WOL SUK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권2호
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pp.368-375
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2005
Batch cultures were carried out to optimize the exo-polysaccharide production by liquid cultures of Pleurotus ferulae. Among the various carbon sources, when $5\%$ of glucose was used, the maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration reached were 8.78 g/l and 3.59 g/l, respectively. Yeast extract and polypeptone were identified as the most suitable nitrogen sources. In particular, when a mixture of $1\%$ of polypeptone and $0.8\%$ of yeast extract was used, 9.52 g/l of mycelial growth and 4.09 g/l of exo-polysaccharide were obtained. In the case of mineral sources, K$_2$HPO$_4$ and MgSO$_4$$\codt$7H$_2$0 were found to be the best mineral sources for mycelial growth and exo-polysaccharide production. Under the optimized culture conditions, the agitation speed and aeration were investigated for mycelial growth and exopolysaccharide production in a jar fermentor. The maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration at 1.5 vvm and 200 rpm obtained were 13.2 g/l and 4.95 g/l, respectively, after 10 days of culture, which were $76\%$ and $79\%$ higher than those of the basal medium. The specific growth rate was decreased with the increase of mycelial growth. However, the specific production rate of the exo-polysaccharide was proportionally increased with the specific growth rate. The proposed model profiles showed good agreement with the experimental results for the mycelial growth and exo-polysaccharide production. The specific production rate using the optimized medium was higher than that of basal medium.
미생물유래 다당류 생산균주를 분리하기 위해 전국 각지의 토양시료로부터 가장 높은 점성과 다당류 생산성을 나타내는 균주 GP32를 분리하였으며, 분리균주 GP32의 동정을 분리균주의 형태학적, 생리학적 특성을 조사한 결과, Pseudomonas 속 세균으로 확인되었으며 최종적으로 Pseudomonas sp. GP32로 명명하였다. 플라스크 수준에서 Pseudomonas sp. GP32의 다당류 생산을 위한 가장 적합한 탄소원과 질소원은galactose와 (NH4)2SO4를 이용하였을 때 가장 많은 다당류를 생산하는 것으로 확인되었으며, 다당류 생산을 위한 최적의 C/N ratio는 50이었다. 다당류 생산을 위한 최적 pH와 온도는 각각 7.5와 32℃였다. 최적화된 배지를 이용한 fermentor 배양에서 다당류 생산은 배양 70시간에 최고치를 나타내었으며, 이때 다당류 생산량은 15.7 g/l이었다. Pseudomonas sp. GP32로부터 생산된 다당류는 ethanol 침전, cetylpyridimium 침전과 gel permeation chromatography를 통하여 정제하였으며, 정제된 다당류는 Biopol32로 명명하였다. Biopol 32의 분자량은 3×107 datons이었으며, Biopol32가 함유하고 있는 구성당은 galactose : glucose : gulcouronic acid : galactouronic acid 등이 1.85 : 3.24 : 1.00 : 1.42의 몰비로 함유되어있다. Biopol32 용액은 의가소성 성질을 갖는 고분자 화합물로서 Zoogloea ramigera가 생산하는 생물고분자인 zooglan보다 모든 농도에서 높은 점성을 나타내었다. Biopol32의 실제 폐수처리현장에서 응집제로의 사용 가능성을 검토하기 위하여 식품폐수, 섬유폐수와 제지폐수를 대상으로 응집효율을 조사한 결과, 높은 COD 감소율 (58.4~67.3%)과 SS제거율(82.6~91.3%)를 나타내어 실제 산업폐수에서 뛰어난 응집효율을 나타내었다.
생물고분자 생산 균주를 분리하여 동정한 결과, 분리균주는 Gram 음성의 간균으로 내생포자를 형성하지 않았으며, nitrate 환원과 catalase 반응에서 양성이고, oxidase 반응에서 음성인 통성 혐기성의 한 균주로 분류학상의 위치를 검토한 결과, Enterobacter sp.로 판단하였다 이 균주가 생성하는 생물고분자는 정색반응, CPC 침전, IR 분석 등에 의해 우론산을 함유한 산성의 다당인 것으로 추정되었다. TLC 및 GC에 의해 조사한 결과, mannose, galactose 및 galacturonic acid로 구성된 hetero 다당이었으며, 분자량은 약 3.7$\times$$10^{5}$이었다. 이다당의 수용액(0.5-2.0%, w/v)은 비뉴우톤 유체로 항복응력을 갖는 의가소성 유체로서 거동하였으며, 1.5% 농도 이상의 낮은 농도에서 겔 형성능을 나타내었다.다.
정제된 Aigeok Polysaccharide의 분자량은 $5.5{\times}10^4$ Da였고, 분자량 분포는 단분산도에 가까웠으며, FT-IR 스펙트럼으로부터 메칠에스테르화된 정도는 낮은 것으로 확인되었다. Aigeok polysaccharide의 겔화 속도는 칼슘이온과 온도에 크게 영향을 받으며 4.08mM 칼슘 이온이 첨가될 때까지는 탄성률의 세기가 증가하였다가 그 이상이 되면 저장탄성률과 손실탄성률 모두 감소하였다. Aigeok polysaccharide의 화학적 구조와 junction zone은 적절한 양의 칼슘이온에 의해 안정화됨을 알 수 있었고 과량의 칼슘농도하에서는 그물구조 형성이 방해를 받아 탄성률은 감소하였다. 겔화 속도 상수는 온도가 증가함에 따라 감소하였고 이는 Aigeok 분자간에 수소결합이 주된 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. Aigeok polysaccharide의 겔화 능력은 4.08mM의 칼슘 첨가와 $5^{\circ}C$에서 가장 안정한 겔을 형성함을 알 수 있었고, 반응식이 겔화를 추정하는데 좋은 표준이 됨을 알 수 있었다.
토양에서 분리한 세포외 다당류 생산균주 PS-12는 형태학적, 생리학적, 화학적 분석에 의하여 Bacillus sp.에 속하는 균주로 동정되었으며, 분리균주 PS-12는 Bacillus sp. PS-12로 명명하였다. Bacillus sp. PS-127가 생산하는 세포외 다당류는 에탄올 침전, cetylpyridinium chloride (CPC) 침전과 gel permeation chromatography를 이용하여 정제하였으며, 정제된 다당류 PS-12의 당조성은 glucose, mannose, galactose와 fucose가 7:3.2:2:1의 몰비로 구성되어있었다. Bacillus sp. PS-12로부터 분리된 다당류 PS-12를 이용하여 면역증강효과를 확인하였다. TNF-${\alpha}$ 및 lL-6 측정은 RAW264.7 대식세포주를 사용하였으며 cytokine 정량을 위하여 ELISA kit를 이용하였다. RAW264.7 세포주에 대한 PS-12의 세포독성을 확인하기 위하여 세포독성이 10% 미만을 나타내는 농도인 2 ${\mu}g$/ml을 PS-12의 최대농도로 측정하였다. PS-12는 ${\mu}g$/ml에서 TNF-${\alpha}$를 정상세포보다 50배 이상 높은 수치로 생산하였다. 또한 lL-6의 생산을 농도 의존적으로 증가시켰다. 이러한 결과로부터 PS-127가 면역세포에 대해 세포독성을 거의 나타내지 않는 농도에서 대식세포로부터 TNF-${\alpha}$와 11-6의 cytokine 생산을 함으로써 면역증강효과를 나타낸다는 것을 확인하였다.
The fermentation conditions for the maximal production of the useful polysaccharides(water soluble polysaccharide and cell bound polysaccharide) from marine bacterium Zoogloea sp.(KCCM 10036) were investigated with a 5 L jar fermentor. The maximal production of these polysaccharides was obtained under the conditions of initial pH 7.8, 30$^{\circ}C$, 400 rpm of agitation speed, 2 Wm of aeration rate, 10%(w/v) of inoculum size and 2.5%(w/v) of glucose substrate and 10.38 g/L of total polysaccharide was produced. Apparent viscosity of the culture broth was increased with the production of these polysaccharides and the maximum value was reached to 22,500 cp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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