Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.18
no.2
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pp.143-150
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1998
Six field bean (GI-vcine soza S and Z ) plants were examined for their genetic polymorphisms and intraspecific variations using randomly amplified polymorphic DNA(RAPD) markers. In RAPD analysis of 5 random primers (Rp-1, Rp2, Rp-3, Rp-4, Rp-5), 30 of total 155 bands obtained kom 5 primers were polymorphic and sizes of polymirphic band ranged between 0.5 and 3.0 kb. Number of bands amplyfied per primer was varied from 2 to 11 and average number was 6.0. Genetic variation of intraspecies in the samples of six region was ranged behveen 11 to 25 percent, and genetic similarity among intraspecies was ranged from 0.69 to 0.78. In pairwise genetic similarity test of six field bean plants, Mun and Hoj showed highest coefficient of genetic similarity as 0.67, whereas Sin and Hoj was lowest as 0.45. According to the genetic similarity, the level of intraspecific variation is higher than that of regional distance in GI-vcine soza.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2001.05a
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pp.559-560
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2001
The objective of the present study was to analyze genetic variation and characteristics in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) using amplified fragment length polymorphism(AFLP) method as molecular genetic technique, to evaluate the usefulness of AFLP as genetic markers, and to compared the efficiency of agarose and polyacrylamide sequencing gels. The amplified products were performed by agarose and sequencing gel electrophoresis to detect AFLP band patterns, respectively. Using 9 primer combinations, total of 141 AFLP bands were produced, 108 bands(82.4%) of which were polymorphic in agarose gels. In sequencing gels, total of 288 bands were generated, and 220 bands (76.4%) were polymorphic. The level of bandsharing(BS) ranged from 0.18 to 0.32 for the 9 primer combinations tested, with a mean of 0.24. Consequently, AFLP markers of these rainbow trout could be used as genetic information such as species identification, genetic relationship or analysis of genome structure, and selection aids for genetic improvement of economically importment traits in fish species.
Previously, we found the operon random primer (OP-5A) that is characteristic the genus Panax by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. However, OP-5A primer is limited to apply on the differentiation of only crude herbal plants. To construct more sensitive and unique primers on the genus Panax, ginseng-specific DNA profile (350 bp) that was amplified by OP-5A primer were inserted in a plasmid vector in the TA cloning method and sequenced. We designed the PCR primers (Forward: 5"-AGGGGTCTTGCTAT AGCGGAAC-3", Reverse: 5"-AGTCTTAATTTCATATTTTCGTATG-3") and identified the unique ginseng band (350 bp) in commercial granule products including ginseng extracts as well as crude ginseng plants by nascent PCR.(omitted)
Murrah and NiliRavi are the important North Indian buffalo breeds occupying the prominent position of being the highest milk producers. These breeds are more or less similar at morphological as well as physiological levels. The technique of RAPD-PCR was applied in the present study to identify a battery of suitable random primers to detect genetic polymorphism, elucidation of the genetic structure and rapid assessment of the differences in the genetic composition of these two breeds. A total of 50 random primers were screened in 24 animals each of Murrah and NiliRavi buffaloes to generate RAPD patterns. Of these, 26 (52%) primers amplified the buffalo genome generating 263 reproducible bands. The number of polymorphic bands for the 26 chosen RAPD primers varied from 3 (OPG 06 and B4) to 26 (OPJ 04) with an average of 10.1 bands per primer and size range of 0.2 to 3.2 kb. DNA was also pooled and analyzed to search for population specific markers. Two breed specific RAPD alleles were observed in each of Murrah (OPA02 and OPG16) and NiliRavi (OPG09) DNA pools. RAPD profiles revealed that 11 (4.2%) bands were common to all the 48 individuals of Murrah and NiliRavi buffaloes. Pair-wise band sharing calculated among the individual animals indicated considerable homogeneity of individuals within the breeds. Within breed, band sharing values were relatively greater than those of interbreed values. The low genetic distance (Nei's) value (0.109) estimated in this study is in accordance with the origin and geographical distribution of these breeds. The RAPD analysis indicated high level of genetic similarity between these two important North Indian buffalo breeds.
RAPD technique was employed for the genetic analysis of major Lilium cultivars and horticultural hybrids. As a result of RAPD with 10-mer random primers, total 107 bands were observed within 300bp and 2kb range, and the same band patterns were observed within the same cultivar for different primers. However, Casa Blanca in Orientals and Adelina in Asiatics showed different band patterns with others in the same. Cultivars within L. longiflorum showed different band patterns. RAPD markers produced with random primers OPA- 02, 03, 04, 14, 16 and 17 can be used for the classification of Lilium cultivars.
Molecular markers are useful to confirm the hybridity of F1 plant derived from cross of two homozygous parents with similar morphological traits. RAPD markers were used to test F1 hybrid plant obtained from cross of two homozygous soybean (Glycine max) parents. Fl plant for cross I was made from the mating of Hobbit87 (female) and L63-1889 (male) and Fl plant for cross II was obtained from the mating of H1053 (female) and L63-1889 (male). Selfing plant per each cross was also obtained. Among 20 Operon primers used, OPA04 and OPA09 show polymorphism between cross I and II parent. Band in size 1Kb of OPA04 and 2.1Kb of OPA09 primer was polymorphic band. This fragment identified Fl hybrid plant and selfing plant in cross I and II. Female parent Hobbit87 in cross I and H1053 in cross II has no this fragment (recessive allele). However, male parent L63-1889 and Fl hybrid plant in cross I and II has this size of polymorphic band (dominant allele). This indicated that Fl hybrid and selfing plants were detected by RAPD marker before phenotypic marker would be used to identify Fl hybridity. Amplification products of selfing plant for cross I and II were completely same to the those of female parent. When mature, flower color of Fl hybrid plant in cross I and II was purple and flower color of selfing plant in cross I and II was white. Purple flower is dominant trait. Fl hybridity was successfully detected at very early growth stage using RAPD marker. Therefore, RAPD marker can be used broadly to confirm Fl hybridity in many crops.
Rhododendron micranthum is an endangered species in Korea. In order to develop the strategy of gene diversity conservation, estimation of the amount of genetic diversity, the genetic variation and relationship in the native populations of Rh. micranthum was performed on the basis of AFLP and RAPD analysis. Analysis of 56 accessions derived from 6 populations of Rh. micranthum with four AFLP primer combinations and ten RAPD primers detected a total of 33 polymorphic AFLP fragments and 15 polymorphic RAPD fragments, respectively. By UPGMA cluster analysis with molecular markers, the 56 accessions were grouped into three major clusters at 73.3% genetic similarity; group I consists of most accessions of populations I, II, IV, V and Ⅵ, group II consists of 7 accessions of population III, and group III consists of only two accessions of population IV. The geographic locations of the most accessions derived from six populations were not related to their position in the UPGMA cluster analysis, except for several accessions of populations III and IV. The genetic similarity of among six populations measured by AFLP and RAPD markers ranged from 0.66 to 0.99. Among them, population Ⅵ showed the highest GS with means of 0.87, while population I showed the lowest GS with means of 0.78. This result will be useful for designing the strategy of conservation in the native populations of Rh. micranthum.
Through a screening and selection approach method, decamer random markers were used in a technique called random amplified polymorphic DNA (RAPD) assay with 252 genomic DNAs isolated from four major Haimen chicken populations: Rugao (62), Jiangchun (62), Wan-Nan (63) and Cshiqishi (65). A total of 3-score decamer random primers (S241-S260, S1081-S1100 and S1341-S1360) were employed in the preliminary RAPD-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) assay with 50 random template DNA samples from all the populations. Four (6.67%) of the primers that produced obvious polymorphic patterns, interpretable and reproducible bands were selected and used with both the individual DNAs from each population and with pooled DNA samples of the four populations in subsequent analyses. The selected primers produced a total of 131 fragments with molecular size ranging from 835 to 4,972 base pairs (bp) when used with the individual DNAs; 105 (80.15%) of these fragments were polymorphic. With the pooled DNAs, 47 stable and characteristic bands with molecular size ranging from 840 to 4,983 bp, of which 23 (48.94%) polymorphic, were also generated. The band-sharing coefficient (BSC) calculated for the individuals in the population and among populations of bulked samples was between 0.8247 (Rugao) and 0.9500 (Cshiqishi); for pairwise populations, it was between 0.7273 (Rugao vs. Wan-Nan) and 0.9367 (Jiangchun vs. Cshiqishi) chicken populations. Using the BSC for individual and pairwise populations, the Nei's standard genetic distances between the chicken populations were determined and ranged from 0.0043 (Jiangchun vs. Cshiqishi) to 0.1375 (Rugao vs. Cshiqishi). The reconstructed dendrogram linked the Jiangchun and Cshiqishi chickens as closely related populations, followed by Wan-Nan, while the Rugao was the most genetically distant among the populations.
Molecular subtyping of Listeria monocytogenes, including type strains and isolates from Korean foods, were performed using random amplification of polymorphic DNA (RAPD). Each Listeria species showed specific RAPD band patterns, and L. monocytogenes serotypes and isolates were divided into two clusters. RAPD results showed that L. monocytogenes isolates from Korean foods were divided into two groups. Group I contained L. monocytogenes serotypes 1/2b and 4b, whereas Group II contained serotypes 1/2a and 1/2c. These results suggested RAPD as possible subtyping methods for Listeria species. Also, RAPD Results showed significant correlation between molecular subtyping and serotyping of L. monocytogenes, and classified two different groups of L. monocytogenes isolated from Korean foods.
Kim, Kil-Ung;Sohn, Jae-Keun;Shin, Dong-Hyun;Kim, Kyung-Min;Kim, Hak-Yoon;Lee, In-Jung
Korean Journal of Weed Science
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v.18
no.1
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pp.76-83
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1998
Echinochloa species maintained by selling for more than 10 years were classified using random amplified polymorphic DNAs(RAPDs) analysis. Seventy-four decamer of randomly sequence markers were used to classify intraspecific variation irt Echinochloa species. The number of amplification products increased with increasing GC content of the primer in the range between 60% and 70% GC. Single-base substitutions of a primer altered amplification, providing new polymorphisms. The size of amplified DNA was mostly between 0.40kbp and 1.4kbp with the most common bands at 1.1kbp. Echinochloa species were detected with 6 primers which generated 26 polymorphic amplified DNAs. By hierarchical cluster analysis, Echinochloa species collected in Korea were divided into three groups. These results revealed that RAPD markers are useful tools for the determination of genetic variations in Echinochloa species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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