Epe, Isma Akter;Bir, Md. Shahidul Haque;Choudhury, Abul Kashem;Khatun, Asma;Aktar, Most Mohshina;Arefin, Md. Shamsul;Islam, Mohammed Aminul;Park, Kee Woong
농업과학연구
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제48권2호
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pp.283-297
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2021
Investigation of genetic diversity and molecular characterization in high yielding rice varieties is important for their identification. The experiment was conducted during 2016 - 2017 to analyse the genetic diversity of fifteen high yielding rice varieties in Bangladesh by using random amplification of polymorphic DNA (RAPD) markers. Polymorphism was revealed in 12 RAPD primers out of 30, whereas no other reaction was detected on the remaining 18 primers. The 40 out of 45 bands (88.89%) polymorphics were produced by the primers and ranged from 50 to 100%. The maximum number of polymorphic bands was produced by the primer OPB-18 whereas the lowest number of polymorphic bands belonged to OPC-12. The genetic similarity coefficients were determined with the RAPD data, which ranged from 0.47 to 0.94. The unweighted paired group of arithmetic means (UPGMA) dendrogram presented the studied rice varieties into two major clusters. Moreover, the value of Nei's genetic diversity is 0.26 and the Shanon information index is 0.41. The study produced distinct positions, suggesting that the genotypes were different from each other. The results indicated that these markers could be efficient for comparing the genetic relationships, patterns of variation, and measurement of genetic distance among rice varieties. Considering all of these results, RAPD analysis is found to be an effective tool for estimating the genetic diversity of different rice varieties. The outcomes of this research may contribute to the germplasm data of rice accessions and a future breeding program of rice genotypes.
본 연구에서는 국내에 유통되고 있는 40개 표고 품종들로부터 산백향과 설백향의 구분이 가능한 CAPS 마커를 개발하였다. 제한효소 Hha I 과 HpyCH4IV를 이용한 밴드 패턴 분석을 통해 각각 산백향과 설백향을 다른 균주들과 구분하여 구별성을 확보할 수 있었다. 본 연구에서 개발된 CAPS 마커는 표고의 품종들 간에 유전적 다양성을 부여함으로써, 품종을 보호할 수 있는 분자생물학적 근거가 될 수 있다. 이로써 향후 유전자원에 대한 국가간 분쟁을 미연에 방지할 수 있을 것이다.
Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein 1 (PfEMP1), encoded by the polymorphic var multigene family, is a highly polymorphic antigen that plays a crucial role in the pathology of malaria. The contribution of the genetic diversity of var toward the immune escape of P. falciparum has not yet been fully elucidated. This study aimed to characterize the diversity of var repertoires by screening P. falciparum Duffy-binding-like α domain (PfDBLα) among field isolates from central Myanmar. Genetic analysis revealed that the D-H segments of var in Myanmar populations have an extensive polymorphic repertoire, with high numbers of unique sequence types in each individual. However, var genes from the global population, including Myanmar, shared close genetic lineages regardless of their geographic origins, indicating that they have not undergone rapid evolutionary changes.
한국의 예산과 당진에서 각각 채취된 붕어 (Carassius auratus)와 떡붕어 (Carassius cuvieri)로부터 genomic DNA를 분리 추출하여 반복해서 PCR로 증폭시켰다. 선택된 7개의 RAPD primer를 이용하여 primer 당 total loci, shared loci by each species, polymorphic 및 specific loci를 얻어냈다. 2종의 붕어로부터 primer와 2지역간에 banding patterns의 복잡성이 두드러지게 나타났다. DNA fragment의 분자적 크기는 150bp에서부터 1,600bp까지 커다란 차이를 나타내었다. 본 연구에서 CCY 붕어 종에서는 458개의 loci가 나타났고, CCD 떡붕어 종에서는 358개의 loci가 확인되었다. 또한 CCY 붕어 종에서는 84개의 polymorphic loci (18.3%)가 확인되었고, CCD떡붕어 종에서는 48개의 polymorphic loci (13.4%)가 확인되었다. CCY 붕어 종에서는 154개의 shared loci가 나타났으며, 이는 primer당 평균적으로 22개의 loci로 확인되었다. 또한 CCD떡붕어 종에서는 187개의 shared loci가 확인되었고, 평균해서 primer 당 26.7개의 loci가 나타났다. CCY붕어 종과 CCD 떡붕어 종의 polymorphic loci는 각각 84개와 48개로 확인되었다. 모든 붕어와 떡붕어 시료의 평균적인 BS value를 기초로 해서 CCY 붕어 종의 similarity matrix를 조사해 본 결과 0.434로부터 0.868까지 나타났고, CCD 떡붕어 종의 값은 0.449로부터 0.924까지 확인되었다. CCY 붕어 종내의 평균적인 BS value는 0.641±0.013이고, CCD 떡붕어 종내의 BS value의 평균값은 0.684±0.013을 나타내었다. 결과적으로 CCD 떡붕어 종내의 개체의 BS value 평균값이 CCY 붕어 종내의 평균값보다 높게 나타났다. 2 붕어와 떡붕어간의 평균적인 BS value은 0.484±0.007 (0.307~0.682)를 나타내었다. 7개의 primer를 사용하여 얻어진 dendrogram은 cluster 1 (AURATUS no. 01~AURATUS no. 11), cluster 2 (CUVIERI no. 12~CUVIERI no. 21) 및cluster 3 (CUVIERI no. 22)와 같이 3개의 유전적 클러스터로 나뉘어졌다. CCY 붕어 종내의 8번째 개체 (AURATUS no. 08)와 9번째 개체 (AURATUS no. 09) 사이가 가장 가까운 유전적 관계 (0.064)를 나타내었다. 또한 CCY붕어 종의 11번째(AURATUS no. 11)와 CCD떡붕어 종의 17번째 (CUVIERI no. 17) 사이가 가장 먼 유전적 거리 (0.477)를 나타내었다. 결과적으로 볼 때 한국 및 대서양산 lobster (0.612), 갈치 (0.708), 동자개(0.714)에 비해서 상대적으로 낮은 유전적 거리를 나타내었다.
RAPD 분석을 하기 위해서 우리나라 내륙의 충주지역과 서해에 인접한 당진지역에서 빙어 (Hypomesus nipponensis)의 두 지리적 집단으로부터 genomic DNA 를 분리 추출하였다. OPB-06, OPB-10, OPB-13, OPB-17, OPC-09, OPC-17 및 OPC-20의 7개 primer를 사용하여 shared loci, polymorphic 및 specific loci를 확인하였다. 충주 빙어집단에서는 한 primer 당 383개의 loci가 관찰되었고, 당진 집단에서는 287개의 loci가 확인되었다. 관찰된 loci 중에 23.8%에 해당되는 91개의 polymorphic loci가 충주 집단에서 확인되었고, 당진 집단에서는 47 (16.4%)개가 확인되었다. 각 집단에서 공유하는 loci의 수는 각각 충주 빙어집단에서 198개 그리고 당진 집단에서는 176개로 관찰되었다. 충주 빙어집단과 당진 집단에서는 각각 44개와 75개의 specific loci가 나타났다. 특히 두 집단이 공유하는 loci의 수는 99개로서 primer 당 평균 14.1개로 확인되었다. 두 빙어 집단의 bandsharing value의 평균값은 $0.700{\pm}0.008$로서 0.600에서 0.846의 범위를 나타내었다. 각각을 비교해 보면, 충주 집단에 속한 개체의 bandsharing value의 평균값이 당진 집단에서의 값보다 높게 나타났다. 7개의 primer를 사용하여 얻어진 dendrogram은 cluster 1 (CJ 01, 02, 03, 04, 05, 06, 07, 08, 09, 10 및 11), cluster 2 (DJ 01, 02, 03, 04, 05, 06, 07, 08 및 09) 및 cluster 3 (DJ 10 및 11)와 같이 3개의 유전적 클러스터로 나뉘어졌다. 두 집단의 유전적 거리는 0.040에서 0.545 사이로 나타났다. 따라서 RAPD-PCR 분석을 통해서 빙어 두 집단의 유의성이 있는 유전적 거리를 확인하였다.
Sharma, Amit Kumar;Bhushan, Bharat;Kumar, Sanjeev;Kumar, Pushpendra;Sharma, Arjava;Kumar, Satish
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권9호
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pp.1204-1209
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2004
Random amplification of polymorphic DNA-Polymerase Chain Reaction (RAPD-PCR) analysis was carried out using DNA samples of 30 animals of Rathi cattle and 42 animals of Tharparkar cattle. Genomic DNA was isolated as per standard protocol and evaluated for its quality, purity and concentration. Twenty three random primers were screened out of which 15 primers yielded satisfactory amplifications and were used for further analysis. Average numbers of polymorphic fragments per primer were 7.07${\pm}$0.86 in Rathi and 6.80${\pm}$0.61 in Tharparkar cattle. The percentage of polymorphic bands in these two cattle breeds were 86 and 87%, respectively. Within breed genetic similarities for pooled over primers in the animals of Rathi and Tharparkar breeds were .577${\pm}$0.30 and 0.531${\pm}$0.02, respectively on the basis of band frequency (BF) and 0.645${\pm}$0.04 and 0.534${\pm}$0.04, respectively on the basis of band sharing (BS). Averages of between breed genetic similarities for pooled over primers were 0.97 and 0.92 according to BF and BS, respectively, which reflect higher degree of genetic similarity between Rathi and Tharparkar cattle breeds. Index of genetic distance based on BF and BS for pooled over primers was 0.030${\pm}$0.011 and 0.088${\pm}$0.031, respectively. Percentage of polymorphic bands and within-breed genetic similarities on the basis of band frequency (BF) and band sharing (BS) for pooled over primers revealed higher genetic similarity in Rathi than Tharparkar cattle population. High estimates of between breed genetic similarities for pooled over primers indicated that either Rathi is having decent from Tharparkar or both the cattle breeds are having common descent. Low value of Index of genetic distances between these two cattle breeds may be due to the fact that Rathi and Tharparkar cattle breeds are the native of Thar Desert in Northwest India. The results of between breed genetic distances also confirm the existence of high degree of genetic similarity between these two breeds of cattle.
Objective: Preimplantation genetic diagnosis (PGD) is reserved for couples with a risk of transmitting a serious and incurable disease, and hence avoids the undesirable therapeutic abortion. In this study, we evaluated the efficacy of PGD for Duchenne muscular dystrophy (DMD) cases by the fluorescent PCR with polymorphic linked markers and the conventional duplex-nested PCR methods. Methods: Biopsy of one or two blastomeres was done from the embryos fertilized by ICSI on the third day after fertilization. We performed two cases of PGD-DMD by the duplex-nested PCR for the causative mutation loci and the SRY gene on Y chromosome. The triplex fluorescent PCR for the mutation loci, the SRY gene and the polymorphic microsatellite marker on X chromosome was applied for two cases of PGD-DMD. Results: By the duplex-nested PCR, successful diagnosis rate was 95.5% (21/22), but we could not discriminate the female embryos whether normal or carrier in this X-linked recessive disease. However, the triplex fluorescent PCR method showed 100% (27/27) of successful diagnosis rate, and all female embryos (n=17) were distinguished normal (n=10) from carrier (n=7) embryos. Unaffected and normal embryos were transferred into mother's uterus after diagnosis. A healthy normal male was achieved after PGD with the duplex-nested PCR method and a twin, a male and a female, were delivered with triplex fluorescent PCR method. The normality of dystrophin gene was confirmed by amniocentesis and postnatal genetic analysis in all offsprings. Conclusion: The fluorescent PCR with polymorphic marker might be useful in improving the specificity and reliability of PGD for single gene disorders.
ITS 염기서열과 RAPD를 이용하여 F. velutipes 29개의 팽이버섯 품종 간의 유전적 변이를 분석하였다. ITS 부위에서 720 bp의 염기서열을 확인 하였으나 29개의 팽이품종간에 유의적인 차이가 없었다. RAPD 분석 결과 40개의 random primer 중 다형성을 나타내는 primer는 16개였으며, 그 중 뚜렸한 다형성을 띄는 primer는 OPA-2,4,3,9,10,20 이었다. 이들 29개 품종에서 primer에 의해 증폭된 밴드는 모두 3,030개 였으며, DNA 단편의 크기는 200~2,000 bp 사이에 위치하였다. 또한 3,030개의 scrabble RAPD band들을 marker로 하여 Nei-Li's의 방법을 이용한 비유사도 지수행렬을 조사한 결과 전체 29개 품종의 종내 유전적 변이는 3.3~45%였고, 특히 한국 야생팽이의 종내 유전적 변이도는 17~38.6%로 품종 간 다형성을 확인하였다. RAPD 변이에 기초하여 neighbor-joining tree (NJ) 분석에서는 5개의 cluster로 구분되었으며, 각각의 cluster는 품종, 지역 적 특성을 나타내었다. 본 연구 결과 RAPD와 실험을 통해 확인된 OPA, OPB primer의 경우 미확인 팽이품종들을 검색 하는데 분자 유전적 표지 maker로써 이용 할 수 있는 것으로 생각된다.
참가리비($Patinopecten$$yessoensis$) 60개체를 채집하여 유전적 다양성과 집단구조를 조사하였다. 임의 유전 다형성 DNA (RAPD)로 109개 유전자형과 79개 다형성 좌위(72.8%)를 발견하였다. 전체 유전적 다양도($H_T$)와 집단내 변이($H_S$)는 각각 0.254와 0.178였다. 유전자 좌위에 근거하여 집단 간 분화 정도($G_{ST}$)는 0.299였다. 이는 전체변이의 약 70.1%가 집단 내에 존재하고 있음을 시사한다. 참가리비 세 나라 집단에서 한 집단에 국한되는 대립유전자 좌위와 한 개체에만 발현된 밴드가 발견되었다. RAPD 마커는 한국, 중국, 일본에 분포하는 참가리비를 구분하는데 매우 효과적이었다. 또한 참가리비의 집단 내, 집단 간 유전적 다양성에 대한 통찰은 동물 유전자원의 수진 전략과 양식에 유익할 것으로 사료된다.
본 연구는 차세대 염기서열 분석방법을 이용하여 굴참나무의 microsatellite 마커를 개발하고 특성을 분석하기 위해 수행되었다. GS-FLX Titanium 차세대 염기서열 분석 장비를 이용하여 305,771개의 read를 얻었고, 117 Mbp의 데이터를 생산하였다. De novo assembly를 통하여 7,326개의 contig를 확보하였다. 크기가 500 bp 이상이 되는 contig는 2,921개로 나타났다. 그 중 microsatellite 영역을 포함하는 contig는 606개(20.75%)로 나타났으며, 총 microsatellite의 수는 911개로 확인되었다. 그 중 13개의 microsatellite 유전자좌에서 굴참나무 개체 간 다형성이 관찰되었다. 이들 microsatellite 유전자좌에 대하여 주왕산 집단에서 관찰된 유효 대립유전자수($A_e$)는 평균 4.966(2.439~7.515)로 나타났다. 평균 이형접합도 관측치($H_o$)와 평균 이형접합도 기대치($H_e$)는 각각 0.873(0.731~1.000)과 0.766(0.590~0.867)으로 나타났다. 다형성이 관찰된 모든 microsatellite 유전자좌에서 null 대립유전자는 관찰되지 않았으며, 마커 간 연관불평형은 나타나지 않았다. 따라서 본 연구에서 개발된 13개의 microsatellite 마커는 굴참나무 집단의 유전변이 분석에 유용할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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