• Archives of Pharmacal Research
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• 제3권1호
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• pp.31-36
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• 1980

Seeds or beans of 55 plants belonging to 31 families were screened by using several different types of red blood cells to find new lectins. In this paper, white kidney been (phaseolus vulgaris C.) was chosen to study biochemical properties of hemagglutinating proteins(lectins). An anion exchanger, DEAE Sephadex A-50, and polyacrylamide disc gel electrophoresis were main techniques used. From three main fractions eluted by stepwise NaCl gradient in 25mM Tris-HCI buffer on DEAE Sephadex column, principal lectin was identified.

• 한국동물학회지
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• 제29권4호
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• pp.283-293
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• 1986

사람의 alpha-fetoprotein(AFP)에 대한 모노클론 항체의 생산 및 분석을 위하여, 태아조직을 재료로 추출법, DEAE-cellulose 및 concanavalin A-Sepharose, Cibacron blue F3GA-agarose, immunoadsorbent column등의 흡착크로마토그라피법에 의해 AFP를 분리하였다. 총 534g의 태아조직에서 AFP의 量은 8.76 mg으로서 순수분리되었음을 확인하였다.

• 약학회지
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• 제27권4호
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• pp.315-320
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• 1983

Ginseng proteins have been extracted and partially purified by the methods of ammonium sulfate fractionation, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions obtained (GI, GII and GIII) were subjected to paper chromatography and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular weights of polypeptide chains from each fraction were est-mated by the standard line obtained from the plot of electrophoretic mobilities against the logarithm of molecular weights of standard proteins. Results are as follows: 1) GI showed three protein spots and four polypeptides of which M.W. were 63,000, 60,000, 56,000, 51,000 and 34,200. 2) GII showed four protein spots and five polypeptides with their M.W. of 64,600, 56,000, 45,400, 35,800, end 25,200, 3) GIII showed three protein spots and four polypeptides with their M.W. of 66,000, 63,000, 56,000 and 22,000.

• 한국작물학회지
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• 제60권1호
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• pp.29-32
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• 2015

Two-dimensional electrophoresis (2-DE) was executed to separate the seed storage proteins from the buckwheat. The proteins extracted from the whole seed proteins were better separated and observed in the use of lysis buffer. Using this method, the highly reproducible isoelectric focusing (IEF) can be obtained from polyacrylamide gels, and IEF from the polyacrylamide gel at all the possible pH range (5.0-8.0) was more easily separated than IPG (immobilized pH gradient) gels. The polyacrylamide gels in the first dimension in 2-DE was used to separate and identify a number of whole seed proteins in the proteome analysis. In this new apparatus using 2-DE, 27cm in length of plate coated with polyacrylamide gel was used and the experiment was further investigated under the various conditions.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권1호
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• pp.57-63
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• 1991

토양으로부터 분리한 알칼리 내성 및 liner alkylbenzene sulfonate 내성인 lipase 생산균주를 동정하여 Pseudomonas sp. J-19로 명명하였다. 호알칼리성 lipase는 ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex와 Sephadex G-100 column chromatography로 정제하였고, 정제효소의 비활성도는 35 unit/mg protein, 수율은 17이었다. 정제효소는 polyacrylamide disc gel 전기영동에서 단일 band를 나타내었고, Sephadex G-100 gel filtration과 SDS-polyacrylamide gel 전기영동에 의하여 추정된 분자량은 36,000이었다. 정제효소의 최적 pH는 10.0 최적온도는 30'C이었다. 정제 효소의 활성은 0.1 linear alkylbenzene sulfonate 첨가에 의하여 2배 증가되었고, 0.05 Tide에 의하여 2.5배 증가되었다. 정제효소는 p8.0-10.0, 4'C이하에서 안정하였다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제7권3호
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• pp.13-20
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• 1991

율무와 염주 단백질의 식품 이화학적 특성을 알아보고자 율무쌀, 현염주 및 비교시료로서 쌀의 3가지 시료를 가지고 실험 한 결과는 아래와 같다. 1. 분리단백질의 분포는 율무쌀의 경우 알부민, 글로불린, 글리아딘 및 글루텔린의 비율이 각각 17.4:19.6:55.2:77%였으며, 현염주는 12.6:62.2:4.2:21.0% 였고, 백미는 14.2:57.4:0.77:27.8% 였다. 그러나 단백질의 분획과정에 변성으로 인하여 글로불린, 글루텔린의 손실이 있었고, 추출율이 상당히 낮아서 3.4∼13.0% 정도였으므로 단백질의 추출방법은 더 연구되어야 할 것으로 사료된다. 2. 산성 및 염기성 조건에서 실시한 Polyacrylamide gel electrophoresis의 결과, 율무쌀과 현염주의 단백질 분획들은 유사한 전기영동 패턴을 나타냈으며, 백미의 경우는 이들과 다른 전기영동 패턴을 나타냈다. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis의 전기 영동상은 율무쌀과 현염주 간에 band의 분포가 매우 유사하였으나, 그 조성비율에 있어서는 다소 차이가 있었다. 쌀의 경우는 이들과 뚜렷이 다르게 나타났는데, 특히 g1iadin의 경우 율무쌀과 현염주에서는 분자량 10,000∼30,000사이에 여러 개의 띠가 확인되었으나 백미에서는 분자량 12,000 정도에 해당하는 하나의 띠만이 확인되었다. 따라서 율무와 염주는 식물학적으로 밀접한 관계에 있음이 확인되었으며, 이들과 백미단백질의 전기영동상의 차이는 유전적인 인자의 차이에 의한 것으로 보여진다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권4호
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• pp.298-303
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• 1999

An $\alpha$-D-galactosidase ($\alpha$-D-galactoside galactohydrolase, EC 3. 2. 1. 22) from earthworm was purified by affinity chromatography using N-$\varepsilon$-aminocaproyl-$\alpha$-D-galactopyranosylamine coupled to sepharose and its properties were examined. The specific activity of the purified enzyme, tested with p-nitrophenyl-$\alpha$-D-galactopyranoside as substrate, was 314 units/mg protein, representing an 122-fold purification of the original crude extract. The final preparation obtained from by Sephadex G-25 chromatography showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 48,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified galactosidase was showed maximum activity at pH 4.5 and 4$0^{\circ}C$, and was stable in the pH and temperature ranges from 4.0 to 5.5 and 30 to 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity was inhibited by Zn2+, Hg2+ and Co2+. When the purified $\alpha$-galactosidase treated to guar gum for 6 hour, gel-promoting property was increased. It was clear that enzymatic elimination of galactose from guar gum by purified $\alpha$-galactosidase would lead to a significant increase in gelation ability.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제1권2호
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• pp.102-110
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• 1991

Alkalophilic Bacillus sp. YJ-451, which was isolated from soil at several area in Korea, produced a novel type of bacteriolytic enzyme (cell wall peptidoglycan hydrolase) extracellulary. The cell wall hydrolytic activity was identified as a clear zone on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis containing 0.2% (w/v) cell wall of Bacillus sp. as substrate. This enzyme was successively purified 66 fold with 3.2% yield in culture broth by ammonium sulfate precipitation, CM-cellulose column chromatography, and gel filtration, followed by hydroxylapatite column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 27,000 by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis and gel filtration column chromatography. The optimum pH and temperature for the activity of the enzyme were pH 10.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable between pH 5.0 and 10.0 and up to $40^{\circ}C$. Among the microorganisms used in this experiment the enzyme was active against most of gram negative strains and the genus Bacillus such as B. megaterium, B. licheniformis, B. circulans, B. pumilus, B. macerans, B. polymyxa. The release of dinitrophenylglutamic acid but not reducing group from cell wall peptidoglycan digested by the enzyme suggested that the enzyme is a kind of peptidase which hydrolyzes the peptide bond at the amino group of D-glutamic acid in the peptidoglycan.

• Applied Biological Chemistry
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• 제42권1호
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• pp.39-44
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• 1999

각각 다른 성장기의 한우 등심에서 추출한 단백질을 이차원 전기영동법으로 분리하여 젤 상의 단백질 전개 양상을 비교하였다. 성장 0, 6, 12, 24 개월령의 한우 등심 단백질들을 길이 16 cm 튜브젤에서 등전점에 따라 분리하고, 이차원적으로 $18{\times}20$ cm, 12% SDS-polyacrylamide gel 전기영동 하여 단백질을 분리하였다. 등전점 3.0에서 9.0 그리고 분자량 15,000에서 100,000 Da 사이의 단백질들이 분리되어 Silver 염색법으로 명확히 구분할 수 있었다. 흥미롭게, 성장과정에서 단백질 발현이 증가했거나 감소한 단백질들은 저분자 단백질들 이었다. 성장 과정 중 증가된 단백질들을 분리하기 위해 수용성 단백질들을 조직으로부터 1% Triton X-100 으로 추출하였다. 그리고 이를 30%와 50% 황산암모니아로 분획하였다. 이와 같이하여 각 단백질들의 분리조건을 결정하였다. 이들 조건을 이용하여 발현이 증가된 단백질들을 분리하고 PVDF membrane에 옮겨서 아미노산 서열을 결정하여 단백질을 규명하였다.

• 대한화학회지
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• 제18권2호
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• pp.132-137
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• 1974

酸性 mucopolysaccharide는 鯨胎兒의 nucleus pulposus에서 分離하였다. Gel electophoresis에 있어서 酸性 mucopolysaccharide의 分離는 $0.03{\%}$의 hexamine cobaltic chloride 를 含有하는 0.05M 醋酸소-다 緩衝溶液(pH4.8)中에서 가장 좋았다. Spacer gel 上의 mucopolysaccharide 溶液을 $40{\%}$ sucrose 溶液으로 덮었을 때 mucopolysaccharide의 移動度에 變化가 나타나는 것을 觀察하였으며 이 효과는 醋酸소-다 緩衝溶液에 hexamine cobaltic chloride 을 加하면 消失하는 것을 觀察하였다.