Taxol contents in various parts of 15 years old yew tree were determined. The descending order of taxol content per unit mass was stem bark, root bark, needle and seed. In the seed, that order was seed coat, embryo and endosperm. The total amount of taxol extractable from a 15 years old yew tree was 1.68 gram. This amount was distributed in needle, stem bark, root bark and seeds as 48.0, 23.8, 27.9 and 0.4%, respectively. Altitudinal variation of taxol content was also observed. More taxol was observed in yew trees grown at high altitude over 1000m above sea level. Calli and suspension cultures were induced from various yew trees. The presence of taxo] in cultured cells was established bv HPLC. The taxol content in cultured cells were different according to the source of explants. These results may be useful for the goal of large scale taxol production by cultured yew tree cells.
LEE, Sung-Ho;SHON, Young Geol;Lee, Soo In;DAVEY Micheal R.;COCKING Edward C.;CHO, Moo Je
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.24
no.5
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pp.295-303
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1997
To investigate the response on feeder cell cultures, protoplasts isolated from cell suspensions initiated from mature seed scutellum-derived callus of the Japonica rice variety Taipei 309, were cultured on filter membranes under various conditions. The effects of various factors, such as gelling agents, feeder cell and protoplast densities, species of feeder cells and heat shock treatment, have been investigated to improve protoplast plating efficiencies on filter membranes. Maximum protoplast plating efficiencies were obtained when protoplasts were cultured on KPR medium semi-solidified with Sea Plaque agarose at a density of $5\;\times\;10^{5}\;ml^{-1}$ protoplasts in the presence of Lolium multiflorum as feeder cells (0.5 ml pcv per 10 ml of protoplast culture medium). Pre-culture heat shock treatments for 1 min. and 5 min. to the protoplasts did not give any appreciable increase on the plating efficiency of protoplasts in the presence of feeder cells. Maltose-supplemented medium was superior for plant regeneration from protoplast-derived colonies compared with medium containing only sucrose. The plants were transferred to the glasshouse, flowered and were fertile.
The sensitivities of Chlorella ellipsoidea to ${\gamma}$-ray from Cobalt-60 were determined by measuring the photosynthetic and respiratory activities and the changes in phosphate contents in various fractions of the irradited cells, which were further grown in a standard medium after irradiation, were compared to those of non-irradiated normal cells. The photosynthetic and repiratory activities of the cells were almost inversely proportional to the dose of ${\gamma}$-ray irradiated and the photosynthetic activity was more sensitive than the respiratory activity of the cells. The most sensitive to ${\gamma}$-ray was growth activity, followed by photosynthesis, exogenous and endogenous respirations of the cells in decreasing order. Chlorella cells were so resistant to ${\gamma}$-ray comapred with other organisms that about 280,000 r dose of ${\gamma}$-ray irradiaton was necessary to reduce as much as half the subsequent photosynthetic activity. When the irradiated algae were further cultured in a standard medium, the phosphate contents in the fraction of DNA, RNA and phosphoprotein decreased considerably compared with those of non-irradiated normal cells, while the phosphate contents in the fraction of polyphosphates increased than those of control. Therefore, it was deduced that ${\gamma}$-ray inhibited the synthesis of DNA from polyphosphates, that the growth of Chlorella cells were consequently retarded.
Chloroplasts isolated from tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. Virginia 115) leaves have been transferred into protoplasts of soybean (Glycine max Merr. cv. Jangyeop) suspension-cultured cells with the help of polyethylene glycol (PEG). The increased yield in protoplasts of chloroplast uptake was depended upon the concentration of both PEG 4,000 and PEG 6,000. The highest yield(36%) occurred at 50% of both PEG, and the yield was decreased above this concentration. The rate of uptake with the incubation time was highest at one hour, then decreased. The process of the chloroplast uptake into the protoplasts was similar with that of a protoplast fusion, except forming invagination during uptake.
The optimal level of growth regulator for callus initiation stem explants was BAP 0.1mg/L combined with 2,4-D 1.0 mg/L in Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 30g/L sucrose and 10g/L agar, and that for cell growth was BAP 0.1+2,4-D 0.5 mg/L in MS liquid medium. The regeneration frequency of P. oleracea cells was significantly increased by subjecting the cells to dessication for 1and 2 h up to 83%, respectively, as compared with untreated control showing 61%. Cell viability and survival rate was inhibited by pretreatment of 0.6% NaCl for 2 days, while regeneration ability was not affected by the treatment. Pretreatment of 100g/L sucrose for 2 days markedly stimulated the regeneration of cells up to 81%. These results suggest that in addition to physiological changes, water stress resulted from dessication and high concentration of sucrose and NaCl is closely related to the regeneration of P. oleracea cultured cells.
We investigated changes in the superoxide dismutase (SOD) activity and SOD isoenzyme pattern in suspension cultures of tomato (Lycopersicon esculentum), which were compared with those of intact tomato plants. two grams (fr wt) of cells subcultured at 15-day intervals were inoculated into 50 mL MS medium containing l mg/L 2,4-D and 30 g/L sucrose in a 300 mL flask and maintained at $25^{\circ}C$ in the dark (100 rpm). The cell growth reached a maximum at 20 days after subculture (DAS), followed by a rapid decrease with further cultures. The cell colour changed from white to black from 23 DAS. The intracellular SOD activity (units/g cell dry wt) was significantly increased from 23 DAS and reached a maximum at 28 DAS (52,400 units), followed by a decrease with further cultures, whereas the extracellular SOD activity showed a maximum at 25 DAS (27,800 units/50 mL medium). The total SOD activity per flask showed a maximum at 25 DAS (35,700 units), in which the extracellular SOD activity occupied about 75%. The tomato cultured cells had four SOD isoenzymes and their patterns were well correlated with SOD activity without a qualitative change during the cell cultures. The intact tomato plants had an additional CuZnSOD isoenzyme, showing the different isoenzyme patterns from cultured cells.
Park, Young-Goo;Kim, Su-Jung;Jung, Hee-Young;Kang, Young-Min;Kang, Seung-Mi;D. Theertha Prasad;Kim, Sun-Won;Park, Myung-Suk
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.9
no.1
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pp.35-40
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2004
Ginkgolides (GK) and bilobalide are valuable compounds that belong to the lactone terpene. The contents of these metabolites were determined by HPLC from female and male tree of Ginkgo biloba L. The productivity of G. biloba cells was also compared with the corresponding individual trees. High variations in the ginkgolides and bilobalide were observed from different individuals, plant parts, and cultured cells. The ginkgolides and bilobalide contents were different depending on the plant parts. Callus was obtained from various plant tissues, and NAA was better at callogenesis than 2,4-D in both the female and male trees. The plants and their corresponding cells showed considerable variation in their ginkgolides and bilobalide concentrations. The ginkgolides and bilobalide contents were not correlated with the production between dominant trees and their corresponding cells. Light irradiation enhanced the production of GK-A and GK-B, however, the concentration of bilobalide decreased under dark conditions.
This experiment was carried out to investigate the effects of plant growth regulators on the organogenesis from the tissue culture of Arabidopsis thaliana stem, and the origin of the callus development. When the stem segments were cultured on medium with 2mg/L IAA or NAA, adventitious roots and trichomes were differentiated after 11 days of culture. Callus vigorously formed on medium with 2/L2,4 after 7 days of culture, but adventitious roots and trichomes were not differentiated from callus after 10 days of culture. This results suggesting that picloram is very effective auxin for the callus formation and organogenesis. Callus weakly formed on 0.05mg/L kinetin, and formed on combination of auxins(2mg/L) with 0.05mg/L kinetin. But the effect of combination of auxins and kinetin the callus formation was less than 2,4-D or picloram alone. A histological examination of callus formed on picloram showed that phloram showed that phloem parenchyma cells were divided and enlarged after 2 days of culture. Cortex parenchyma cells were divided and meristematic nodules were developed from these cells after 4 days of culture. Finally, callus formed on outside of cortex and epidermis by division of meristematic nodules after 7 days of culture.
Natural killer (NK) cells play have a crucial role in the early phase of immune responses against various pathogens. We compared characteristics of canine NK cells against two canine mammary carcinoma cell lines, REM134 and CF41.Mg. REM134 showed higher expression of progesterone receptor, proliferative cell nuclear antigen, Ki67, multiple drug resistance, Bmi-1, c-myc, E-cadherin, and human epidermal growth factor receptor type-2 than that of CF41.Mg. For specific expansion and activation of NK cells, we isolated CD5 negative cells from canine peripheral blood mononuclear cells and co-cultured K562 cells in the presence of interleukin (IL)-2, IL-15, and IL-21 for 21 days. As a result, we found that expression markers of activated NK cells such as NKp30, NKp44, NKp46, NKG2D, CD244, perforin, granzyme B, and tumor necrosis factor alpha were highly upregulated. In addition, we found there was upregulated production of interferon gamma of activated NK cells against target cells such as REM134 and CF41.Mg. Specifically, we observed that cytotoxicity of NK cells against target cells was more sensitively reacted to CF41.Mg than REM134. Based on the results of this study, we recommend the development of an experimental application of CF41Mg, which has not been reported in canine mammary carcinoma research.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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