Sabir, Farzana;Sangwan, Rajender S.;Singh, Jyoti;Misra, Laxmi N.;Pathak, Neelam;Sangwan, Neelam S.
Plant Biotechnology Reports
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v.5
no.2
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pp.127-134
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2011
The biotransformation potential of cell suspension cultures generated from Withania somnifera leaf was investigated, using withanolides, i.e. withanolide A, withaferin A, and withanone as precursor substrates. Interestingly, the cell suspension cultures showed inter-conversion of withanolides, as well converted to some unknown compounds, released to the culture media. The bio-catalyzed withanolide was detected and quantified by TLC and HPLC, respectively. There is noticeable conversion of withanolide A to withanone, and vice versa though at a lower level. The type of reaction of this biotransformation appears to be substitution of 20-OH group to 17-OH in withanolide A. In this paper, we present for the first time the possibility of biotransformation by inter-conversion of withanolides of pharmacological importance through cell suspension culture of W. somnifera. The possible role of putative cytochrome $P_{450}$ hydroxylases is implicated in the conversion.
Chattopadhyay, Saurabh;Bisaria, V.S.;Scheper, T.;Srivastava, A.K.
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.6
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pp.331-334
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2002
Culture conductivity and on-line NADH fluorescence were used to measure cellular growth in plant cell suspension cultures of Podophyllum hexandrum. An inverse correlation between dry cell weight and medium conductivity was observed during shake flask cultivation. A linear relationship between dry cell weight and culture NADH fluorescence was obtained during the exponential phase of batch cultivation In a bioreactor under the pH stat (pH 6) conditions. It was observed that conductivity measurement were suitable for biomass characterisation under highly dynamic uncontrolled shake flask cultivation conditions. However, if the acid/alkali feeding is done for pH control the conductivity measurement could not be applied. On the other hand the NADH fluorescence measurement allowed online-in situ biomass monitoring of rather heterogenous plant cell suspension cultures in bioreactor even under the most desirable pH stat conditions.
Suspension cell lines have been newly established from the calli derived from the immuature embryo culture of hexapolid (Triticum aestivum var. sicco), tetrapolid (T. durum) and diploid (T. tauchii or Aegilops squarrosa) wheat species. The chromosomal variation in suspension cultured cell lines was examined and old cell line, C82d, established from T. aestivum var. copain was also used. New method using 1-bromonaphthalene for metaphase rapping of suspension cells was developed. Variation in chromosome number was observed among all the suspension lines. Cells with doubled chromosome number and deleted chromosome were also observed. Extensive structural changes in chromosome were found in C82d line. Chromosome aberrations showed loss of chromosome arms and chromosome segment. The mean chromosome number in suspension cells of T. aestivum var. sicco was 40, in C82d line 33, in T. durum 28 and in T. tauchii 14. The stability of chromosome in suspension cells of diploid and tetrapolid wheats was higher than that of hexaploid wheat.
Culture of embryogenic callus and suspension were induced from rice seeds in MS2.5 medium. In hormone free N6 medium, whole plantlets were regenerated from embryogenic callus. We observed cell division and reformation of embryogenic callus on culture of protoplast isolated from embryogenic cell suspensions. In addition, we studied the influencing factors on viability of protoplast treated with electroporation. Viability was decreased according to the increase of voltage and capacitance during electroporation. An optimal level of viability was obtained after treatment with $200-300\;V/1180\;\mu\textrm{F}$ in HEM buffer at $4^{\circ}C$..
Several cultivars of rice were examined for induction of embryogenic callus on a medium containing MS salts, vitamins and 2, 4-D under darkness. Embryogenic callus was obtained from cultivar Cheonma with high ratio and embryo-like structures were formed from the callus on a medium with or without reduced 2, 4-D. Somatic embryoids with a plumule and radicle axis surrounded by a scutellum were observed. These embryoids germinated and produced plantlets in 30 days on the same medium. Protoplasts isolated from an embryogenic cell suspension culture derived from embryogenic callus were cultured either in liquid or in agar medium and protoplast derived cell colonies were obtained in 3-4 weeks.
Orostachys japonicus A. Berger is a Perennial herbaceous plant which has been traditionally used as an anti-inflammatory agent to treat hepatitis and as an anticancer agent. The objective of this study was 1) to establish and proliferate in vitro plant of O. japonicus 2) to induce indirect somatic embryogenesis from O. japonicus. General calli and embryogenic calli in all ranges of 2,4-D and BA combination, were induced and were best at 22% (embryogenic cell) in 5.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA combination. Embryogenic cell line was maintained by subculture at 2 week intervals and transferred to solid and liquid medium for embryo formation. In solid medium culture, globular and heart shaped embryos were observed in MS medium containing 5.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA combination. The number of embryos was 6.5 per 0.5 g cell, and then the immature embryos transferred to MS basal medium for embryo development. In a suspension culture of embryogenic cells, globular and heart shaped embryos were emerged in MS medium supplemented with 3.0 mg/L 2,4-D and 0.3 mg/L BA combination after 10 days of incubation. The embryo formation rate was about 33% by suspension culture. The ratio of embryo germination was 60.9%, on the other side, the root formation rate was 74.3% in 1/2 MS continuously.
The chemical investigation on the cell suspension culture of Morinda elliptica L. yielded eight anthraquinones, two of which, anthragallol-1,2-dimethyl ether (3) and purpurin-1-methyl ether (4), have not been isolated from the original plant. Other compounds isolated include nordamnacanthal (1), alizarin-1-methyl ether (2), rubiadin (5), soranjidiol (6), $lucidin-{\omega}-methyl$ ether (7), and morindone (8). The structures of anthraquinones were established based on spectral studies.
Oh, Myung-Jin;Na, Hye-Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk-Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.4
no.2
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pp.125-128
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2010
Culture conditions were established for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from cell suspension cultures of Nymphoides coreana. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and calluses at a frequency of 85.6% when cultured on half-strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.3 $mg\;l^{-1}$ of 2,4-D. However, the frequency of pale-yellow globular structures and white callus formation decreased slightly with an increasing concentration of 2,4-D up to 10 $mg\;l^{-1}$ with the frequency rate falling to 16.7%. Cell suspension cultures were established from zygotic embryo-derived calluses using half-strength MS medium supplemented with 0.3 $mg\;l^{-1}$ of 2,4-D. Upon plating onto half-strength MS basal medium, over 92.3% of cell aggregates gave rise to numerous somatic embryos and developed into plantlets. Regenerated plantlets were successfully transplanted into potting soil and achieved full growth to an adult plant in a growth chamber. The high frequency plant regeneration system for Nymphoides coreana established in this study will be useful for genetic manipulation and cryopreservation of this species.
The effects of various plant growth regulators, both auxins and cytokinins, on cell growth and berberine production were investigated in cell suspension cultures of Thafictrum rugosum. Indole-%-acetic acid (IAA) was found to be the best for berberine production among five examined plant growth regulators and the optimum concentration of IAA was 1 $\mu \textrm M$. The enhancement compared to control 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) was more than 60%. Simultaneous addition of cytokinins such as kinetin and 6-benzylamiroyurine (BA) was inhibitory.
Effects of various environmental factors on cell size index(FCW/DCW) in Thalictrum rugosum. Lithospermum erythrorhizon and Taxus cuspidata plant cell suspension cultures were investigated. Time course change of cell size index were also observed. In batch cultures, FCW/DCW increased according to the decrease of sugar concentration. For short-term experiment within 24 hr, FCW/DCW value could be reduced significantly by increasing sugar concentration. When an osmoticum such as mannitol was added, FCW/DCW converged to a low value. Therefore, it was confirmed that osmolality of the medium was important in determining cell size or water content of the cells. Inorganic salts or treatment with organic solvent also exhibited some effect on the cell size index. However, pH and centrifugal force did not show any influences. On the other hand, it was found that the addition of Pluronic F-68 reduced FCW/DCW. By combining these results effectively, it may be possible to increase the cell concentration in high density culture to a higher extent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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