Min Li;Tao Li;Jia Zheng;Zongwei Qiao;Kaizheng Zhang;Huibo Luo;Wei Zou
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권10호
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pp.1337-1350
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2023
Caproic acid is a precursor substance for the synthesis of ethyl caproate, the main flavor substance of nongxiangxing baijiu liquor. In this study, Clostridium butyricum GD1-1, a strain with high caproic acid concentration (3.86 g/l), was isolated from the storage pit mud of nongxiangxing baijiu for sequencing and analysis. The strain's genome was 3,840,048 bp in length with 4,050 open reading frames. In addition, virulence factor annotation analysis showed C. butyricum GD1-1 to be safe at the genetic level. However, the annotation results using the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes Automatic Annotation Server predicted a deficiency in the strain's synthesis of alanine, methionine, and biotin. These results were confirmed by essential nutrient factor validation experiments. Furthermore, the optimized medium conditions for caproic acid concentration by strain GD1-1 were (g/l): glucose 30, NaCl 5, yeast extract 10, peptone 10, beef paste 10, sodium acetate 11, L-cysteine 0.6, biotin 0.004, starch 2, and 2.0% ethanol. The optimized fermentation conditions for caproic acid production by C. butyricum GD1-1 on a single-factor basis were: 5% inoculum volume, 35℃, pH 7, and 90% loading volume. Under optimal conditions, the caproic acid concentration of strain GD1-1 reached 5.42 g/l, which was 1.40 times higher than the initial concentration. C. butyricum GD1-1 could be further used in caproic acid production, NXXB pit mud strengthening and maintenance, and artificial pit mud preparation.
It is vital to understand the changing characteristics of interphase microbial communities and interspecies synergism during the fermentation of Chinese liquors. In this study, microbial communities in the three indispensable phases (pit mud, zaopei, and huangshui) of Luzhou-flavored liquor manufacturing pits and their shifts during cellars use were first investigated by polyphasic culture-independent approaches. The archaeal and eubacterial communities in the three phases were quantitatively assessed by combined phospholipid ether lipids/phospholipid fatty acid analysis and fluorescence in situ hybridization. In addition, qualitative information regarding the microbial community was analyzed by PCR-denaturing gradient gel electrophoresis. Results suggested that the interphase microbial community profiles were quite different, and the proportions of specific microbial groups evolved gradually. Anaerobic bacteria and gram-positive bacteria were dominant and their numbers were higher in pit mud ($10^9$ cells/g) than in huangshui ($10^7$ cells/ml) and zaopei ($10^7$ cells/g). Hydrogenotrophic methanogenic archaea were the dominant archaea, and their proportions were virtually unchanged in pit mud (around 65%), whereas they first increased and then decreased in zaopei (59%-82%-47%) and increased with pit age in huangshui (82%-92%). Interactions between microbial communities, especially between eubacteria and methanogens, played a key role in the formation of favorable niches for liquor fermentation. Furthermore, daqu (an essential saccharifying and fermentative agent) and metabolic regulation parameters greatly affected the microbial community.
Fluorescence in-situ hybridization (FISH) is a common and popular method used to investigate microbial communities in natural and engineered environments. In this study, two specific 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes, CLZ and KCLZ, were designed and verified to quantify the genus Clostridium and the species Clostridium kluyveri. The optimal concentration of hybridization buffer solution for both probes was 30% (w/v). The specificity of the designed probes was high due to the use of pellets from pure reference strains. Feasibility was tested using samples of Chinese liquor from the famed Luzhou manufacturing cellar. The effectiveness of detecting target cells appears to vary widely in different environments. In pit mud, the detection effectiveness of the target cell by probes CLZ and KCLZ was 49.11% and 32.14%, respectively. Quantitative analysis by FISH technique of microbes in pit mud and fermented grains showed consistency with the results detected by qPCR and PCR-DGGE techniques, which showed that the probes CLZ and KCLZ were suitable to analyze the biomass of Clostridium spp. and C. kluyveri during liquor fermentation. Therefore, this study provides a method for quantitative analysis of Clostridium spp. and C. kluyveri and monitoring their community dynamics in microecosystems.
한국산 미꾸리 Misgurnus anguillicaudatus의 피부 구조 및 조직화학적 특정을 조사하기 위해 등, 측면, 복부, 머리부분의 피부를 조사하였다. 미꾸리의 epidermis는 elongated mucous cell과 club cell의 2개의 gland로 구성되었으며 두께는 아주 두꺼웠다. mucous cell은 acid mucopolysaccharides의 물질을 분비하였으나 club cell은 mucopolysaccharides에 어떠한 반응도 보이지 않았다. 표피의 기저층은 림파구를 가지는 lymphocytic space가 발달하였으며 기저막과 상피세포사이에 배모양의 감각세포인 pit organ이 존재하였다. Dermis의 stratum laxum에는 acid mucopolysaccharides를 나타내는 부분(a definite area)이 존재하며, 이러한 물질은 비늘에도 분포하고 있다. 작은 비늘이 dermis속에 파 묻혀 있으나 머리부분에는 없다. 또한 많은 양의 모세혈관들이 기저막 바로 아래에 존재하였다. 피부의 이러한 특징들은 미꾸리가 공기를 이용하는 피부호흡과 밀접한 관계가 있다.
Proteomics is a leading technology for the high-throughput analysis of proteins on a genome-wide scale. With the completion of genome sequencing projects and the development of analytical methods for protein characterization, proteomics has become a major field of functional genomics. The initial objective of proteomics was the large-scale identification of all protein species in a cell or tissue. The applications are currently being extended to analyze various functional aspects of proteins such as post-translational modifications, protein-protein interactions, activities and structures. Whereas the proteomics research is quite advanced in animals and yeast as well as Escherichia coli, plant proteomics is only at the initial phase. Major studies of plant proteomics have been reported on subcellular proteomes and protein complexes (e.g. proteins in the plasma membranes, chloroplasts, mitochondria and nuclei). Here several plant proteomics studies will be presented, followed by a recent work using multidimensional protein identification technology (MudPIT).
As proven petroleum reserves decline through continued production. exploration for new oil and gas resources will extend into environments which present significant economic risks arid technical hurdles. Since safety is one of the biggest concerns in drilling operations. the oil industry routinely trains its personnel in areas which are critical for safe and economical drilling procedures. One of these major areas is well control. A kick is defined as an unscheduled flow of formation fluids into a wellhole. A kick occurs whenever the resultant wellbore pressure is less than the formation pressure in an exposed zone capable of producing kick fluids. The typical causes of reduced wellbore pressure are insufficient mud weight. inadequate fluid level in the hole, and swabbing.(omitted)
Lettuce is an economically important leafy vegetable that accumulates a milk-like sap called latex in the laticifer. Previously, we conducted a large-scale lettuce latex proteomic analysis. However, the identified proteins were obtained only from lettuce ESTs and proteins deposited in NCBI databases. To extend the number of known latex proteins, we carried out an analysis identifying 302 additional proteins that were matched to the NCBI non-redundant protein database. Interestingly, the newly identified proteins were not recovered from lettuce EST and protein databases, indicating the usefulness of this hetero system in MudPIT analysis. Gene ontology studies revealed that the newly identified latex proteins are involved in many processes, including many metabolic pathways, binding functions, stress responses, developmental processes, protein metabolism, transport and signal transduction. Application of the non-redundant plant protein database led to the identification of an increased number of latex proteins. These newly identified latex proteins provide a rich source of information for laticifer research.
So far it has been generally considered that proteomic approaches are very useful for studying plant-microbes interaction. In this review, recent studies based on papers published from 2010 to 2013 have investigated proteomics analysis in various interaction during plant-fungal pathogen infection by means of gel-based proteomics coupled with mass spectrometry (MS)-based analysis. In rice, three papers focused on rice-Magnaporthe oryzae interaction were mainly reviewed in this study. Interestingly, another study showed proteomic changes in rice inoculated with Puccinia triticina, which is not only an fungal pathogen in wheat and but also results to the disease resistance with non-host defense manner in rice. Additionally, proteomics analysis has been widely subjected to understand defense mechanism during other crops (wheat, tomato, strawberry and mint) and their fungal pathogen interaction. Crops inoculated are analyzed to identify differentially regulated proteins at various tissues such as leaf and apoplast using 2-DE analysis coupled with various MS approaches such as MALDI-TOF MS, nESI-LC-MS/MS and MudPIT, respectively. Taken together, this review article shows that proteomics is applicable to various organisms to understand plant-fungal pathogen interaction and will contribute to provide important information for crop disease diagnosis and crop protection.
Cho, Won Kyong;Hyun, Tae Kyung;Kumar, Dhinesh;Rim, Yeonggil;Chen, Xiong Yan;Jo, Yeonhwa;Kim, Suwha;Lee, Keun Woo;Park, Zee-Yong;Lucas, William J.;Kim, Jae-Yean
Molecules and Cells
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제38권8호
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pp.685-696
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2015
Rice is a model plant widely used for basic and applied research programs. Plant cell wall proteins play key roles in a broad range of biological processes. However, presently, knowledge on the rice cell wall proteome is rudimentary in nature. In the present study, the tightly-bound cell wall proteome of rice callus cultured cells using sequential extraction protocols was developed using mass spectrometry and bioinformatics methods, leading to the identification of 1568 candidate proteins. Based on bioinformatics analyses, 389 classical rice cell wall proteins, possessing a signal peptide, and 334 putative non-classical cell wall proteins, lacking a signal peptide, were identified. By combining previously established rice cell wall protein databases with current data for the classical rice cell wall proteins, a comprehensive rice cell wall proteome, comprised of 496 proteins, was constructed. A comparative analysis of the rice and Arabidopsis cell wall proteomes revealed a high level of homology, suggesting a predominant conservation between monocot and eudicot cell wall proteins. This study importantly increased information on cell wall proteins, which serves for future functional analyses of these identified rice cell wall proteins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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