The base sequences representing human- and cow-specific 168 rRNA gene markers identified in a T-RFLP analysis were recovered from clone libraries. The human- and cow-specific primers were designed from these sequences and their specificities were analyzed with fecal DNAs from human, cow, and pig. The AllBac primer set showed positive results for all human, cow, and pig samples, whereas the human-specific primer set showed positive result only for the human sample but not for the cow or pig samples. Likewise, the cow-specific primer set showed positive results only for the cow sample but not for the human or pig samples. Real-time PCR assay with these primers was developed for the identification and quantification of fecal pollution in the river water. The human- and cow-specific markers were detected in the order of 9 $\log_{10}$ copies per gram wet feces, which were two orders of magnitude lower than those of total Bacteroidales. For the river water samples, the human-specific marker was detected in $1.7-6.2\;\log_{10}$ copies/100 ml water, which was 2.4-4.9 orders of magnitude lower than those of total Bacteroidales. There was no significant correlation between total Bacteroidales and conventional fecal indicators, but there was a high correlation between Bacteroidales and the human-specific marker. This assay could reliably identify and quantify the fecal pollution sources, enabling effective measures in the watersheds and facilitating water quality management.
Porcine proliferative enteritis (PPE) is a transmissible gastroenteric disease caused by Lawsonia intracellularis. Clinically, PPE causes hemorrhagic diarrhea and sometimes death in growing pigs, but when the disease progresses to a chronic phase, the infected pig no longer displays significant symptoms. The purpose of the present studies were carried out to determine L. intracellularis in the pig farms and slaughter house, in Gyeongnam area. A survey of proliferative enteritis in pig was conducted using polymerase chain reaction (PCR) testing method, total 1,495 samples. PCR products showed a specific band at the 210bp, 329bp in the specimens of feces and mucosal scraping. Of 420 fecal specimens, 113 (26.9%) were identified as positive to PPE. Of 1,075 mucosal scraping specimens, 109 (10.1%) were identified as positive to PPE. Of total 1,495 specimens, 222 (14.8%) were identified as positive to PPE.
양돈농가에서의 계절별 돈사배출수 발생량은 돈사내에서 스크레퍼 및 인력으로 돈분을 분리수거하여 분은 퇴비화하고 배출수는 활성오니법을 이용하여 정화처리하고 있는 농가를 6농가를 선정하여 돈사배풀수랸 및 배출수의 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 돈사배출수량의 평균배출량은 4.15 l/일/두였으며, 계절별로는 여름철 5.02, 겨울철 4.11, 겨울철에 3.44, 봄철에 4.04 l/일.두로 여름철에 가장 많은 세정수가 발생되었다. 2. 돈사배출수 조사농가의 돈분은 수분 함량은 평균 82.9%였고 돈분의 BOD 및 SS농도는 각각 56,847mg/l, 119,750mg/l였으며, 돈사배풀수의 BOD, SS농도는 각각 2,951, 1,983mg/$\ell$였다.
Two probiotic strains, Lactobacillus johnsonii x-1d-2 and Lactobacillus mucosae x-4w-1, originally isolated from piglet feces, have been demonstrated to possess antimicrobial activities, antibiotic resistances and interleukin-6 induction ability in RAW 267.4 macrophages in our previous study. These characteristics make L. johnsonii x-1d-2 and L. mucosae x-4w-1 good candidates for application in feed probiotics. In this study, soybeal meal, molasses and sodium acetate were selected to optimize the growth medium for cultivation of L. johnsonii x-1d-2 and L. mucosae x-4w-1. These two strains were then freeze-dried and mixed into the basal diet to feed the weaned piglets. The effects of L. johnsonii x-1d-2 and L. mucosae x-4w-1 on the growth performance and fecal microflora of weaned piglets were investigated. The results showed that the bacterial numbers of L. johnsonii x-1d-2 and L. mucosae x-4w-1 reached a maximum of 8.90 and 9.30 log CFU/mL, respectively, when growing in optimal medium consisting of 5.5% (wt/vol) soybean meal, 1.0% (wt/vol) molasses and 1.0% (wt/vol) sodium acetate. The medium cost was 96% lower than the commercial de Man, Rogosa and Sharpe medium. In a further feeding study, the weaned piglets fed basal diet supplemented with freeze-dried probiotic cultures exhibited higher (p<0.05) body weight gain, feed intake, and gain/feed ratio than weaned piglets fed basal diet. Probiotic feeding also increased the numbers of lactobacilli and decreased the numbers of E. coli in the feces of weaned piglets. This study demonstrates that L. johnsonii x-1d-2 and L. mucosae x-4w-1 have high potential to be used as feed additives in the pig industry.
Beef, pork, chicken and milk are considered representative protein sources in the human diet. Since the digestion of protein is important, the role of intestinal microflora is also important. Despite this, the pure effects of meat and milk intake on the microbiome are yet to be fully elucidated. To evaluate the effect of beef, pork, chicken and milk on intestinal microflora, we observed changes in the microbiome in response to different types of dietary animal proteins in vitro. Feces were collected from five 6-week-old pigs. The suspensions were pooled and inoculated into four different media containing beef, pork, chicken, or skim milk powder in distilled water. Changes in microbial communities were analyzed using 16S rRNA sequencing. The feces alone had the highest microbial alpha diversity. Among the treatment groups, beef showed the highest microbial diversity, followed by pork, chicken, and milk. The three dominant phyla were Proteobacteria, Firmicutes, and Bacteroidetes in all the groups. The most abundant genera in beef, pork, and chicken were Rummeliibacillus, Clostridium, and Phascolarctobacterium, whereas milk was enriched with Streptococcus, Lactobacillus, and Enterococcus. Aerobic bacteria decreased while anaerobic and facultative anaerobic bacteria increased in protein-rich nutrients. Functional gene groups were found to be over-represented in protein-rich nutrients. Our results provide baseline information for understanding the roles of dietary animal proteins in reshaping the gut microbiome. Furthermore, growth-promotion by specific species/genus may be used as a cultivation tool for uncultured gut microorganisms.
Porcine transmissible gastroenteritis (TGE) has been a significant cause of economic losses in pig farming industry since 1950s. Although transmissible gastroenteritis virus (TGEV) has declined in recent years, it should not be excluded because of its characteristics; the frequency of gene mutation, the mortality in piglets, and the possibility for sudden incidence. Therefore, the herd-level monitoring of the virus is important to prevent further circulation of TGE. The aim of this study is to develop a large-scale sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with high specificity to rapidly detect TGEV in feces by using monoclonal antibodies (Mabs). The TGEV specific Mabs were produced in hybridoma cells. Among the Mabs belonged to the IgG class developed by this study, the final selected 8H6, 1B7, 4G3, and 1F8 were identified to have the neutralization ability against TGEV. The sandwich ELISA was established using 8H6 as a reporter antibody and 1B7 and the reported 5C8 as a capture antibody. The developed sandwich ELISA was able to distinguish TGEV from other pathogenic diarrheal agents (porcine rotavirus, porcine reovirus, porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), E. coli, and C. perfringens) in tissue culture as well as fecal samples. And the detection rate of TGEV in feces was 80% compared with RT-PCR. The results suggested that the developed sandwich ELISA may be useful in the herd-level monitoring for effective preventive measures due to the early diagnosis of TGEV using a large amount of samples.
Hyunwoong Jo;Geongoo Han;Eun Bae Kim;Changsu Kong;Beob Gyun Kim
Journal of Animal Science and Technology
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제66권2호
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pp.340-352
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2024
This study measured the potential changes of the microbiota in the gastrointestinal tract and energy and nutrient digestibility by supplemental bacteriophages in pigs. Twelve castrated male pigs (initial mean body weight = 29.5 ± 2.3 kg) were surgically cannulated using T-cannula. The animals were housed individually in pens equipped with a feeder and a nipple waterer. The pigs were allotted to 1 of 3 experimental diets in a quadruplicated 3 × 2 Latin square design with 3 experimental diets, 2 periods, and 12 pigs resulting in 8 replicates per diet. The 3 diets were a control mainly based on corn and soybean meal with no antibiotics or bacteriophages, a diet containing 0.1% antibiotics, and a diet containing 0.2% bacteriophages. On day 5 of the experimental period, feces were collected and on days 6 and 7, ileal digesta were collected. Genomic DNA for bacteria were extracted from the ileal digesta and feces and the V4 region of the 16S rRNA gene was amplified. The ileal and fecal digestibility of energy, dry matter, organic matter, crude protein, and fiber was unaffected by dietary antibiotics or bacteriophages. At the phylum level, the supplemental antibiotic or bacteriophage tended to result in a higher proportion of Firmicutes (p = 0.059) and a lower proportion of Bacteroidetes (p = 0.099) in the ileal digesta samples compared with the control group with no difference between the antibiotic and bacteriophage groups. At the genus level, the supplemental antibiotic or bacteriophage tended to result in a higher proportion of Lactobacillus (p = 0.062) and a lower proportion of Bacteroides (p = 0.074) and Streptococcus (p = 0.088) in the ileal digesta compared with the control group with no difference between the antibiotic and bacteriophage groups. In the feces, supplemental antibiotics or bacteriophages reduced the proportion of Bifidobacterium compared with the control group (p = 0.029) with no difference between the antibiotic and bacteriophage groups. Overall, supplemental antibiotics and bacteriophages showed positive effect on the microbiota of in the ileal digesta without largely affecting energy or nutrient digestibility, with no differences between the antibiotic and bacteriophage groups in growing pigs.
Hepatitis E Virus (HEV) infection is a worldwide disease and the primary cause of acute viral hepatitis in the world. It can be isolated from many different species including pigs. HEV is a zoonotic pathogen and foodborne disease. The main animal reservoir is domestic pigs. It is usually asymptomatic in pig but it is a public health concern, causing acute hepatitis in humans of varying severity. This study focused on the presence of HEV in pig and pork product. One hundred feces and one hundred fifty serum samples were randomly collected from pigs in slaughterhouses in Gwangju from November in 2018 to February in 2020. In addtion, seventy-five pork products were collected from markets in Gwangju. Feces and pork product samples were examined for the presence of HEV RNA using an reverse-transcription realtime PCR (RT-qPCR) assay. Serum samples were tested for the presence of HEV-specific IgG antibodies using Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HEV antigen and antibody positive rates were 3.0% (3/100) and 19.3% (29/150), respectively, in Gwangju and nearby areas such as Jeonnam and Jeonbuk. However, HEV antigen was not detected from any of pork product in this study. In conclusion, the prevalence of HEV should be continuously monitored because HEV was sporadically detected in Gwangju and nearby areas.
The effect of mecadox, trade name of carbodox, in the treatment of colibacillosis and in the prevention of experimental Salmonella infection in swine was studied throughout the experimental period of four weeks using a total of 70 piglets. The results obtained are as followings. 1. Mecadox was found moderately effective as a therapeutic for colibacillosis of piglets when administered orally as pig doser or added to the feed at the ratio of 50 ppm with or without the addition of vitamin A and $D_3$. 2. In the prevention of experimental infection with Sal. choleraesuis, mecadox was found highly effective. As judged by clinical symptoms such as diarrhea and fever together with the confirmation of excretion of the causative organisms in the feces, the best result was obtained with mecadox pig doser followed by mecadox (50ppm) with vitamin A and $D_3$, and mecadox (50 ppm) without the vitamins in the descending order of effectiveness.
Livestock production in Vietnam is, as in most Asian countries, increasing rapidly and changing into specialized highly intensified operations. The volume of animal excreta generated exceeds the capacity of the operation land base and cannot be utilized efficiently. As a consequence, there is a loss of plant nutrients from livestock farms that causes environmental pollution. This study carried out a feed and excretion experiment measuring fecal characteristic, daily fecal production, daily nitrogen and phosphorous excretion from grower-finisher pigs fed prevalent rations in Vietnam. Furthermore, equations for assessing the excretion were tested, which can be used in farm models for optimal recycling of manure while focusing on reducing pollution. The results indicated that fecal production and nutrient excretion were affected by the different rations tested. This study showed that five selected equations for predicting excretion from grower-finisher pigs in Danish conditions can also be used with precision in Vietnamese pig farming systems. The equations have been proven valid and can, therefore, be used as a much needed tool for assessing fecal production and nitrogen in excreta on pig farms. The study also showed that about 12% of nitrogen excreted was emitted during housing. Waste water contains more than half of the nitrogen excreted, mainly in ammonium form which has a high potential for gaseous emission.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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