Objectives : The aim of this study was to observe prevention of allergic reactions of Sweet Bee Venom (removing enzyme components from Bee Venom). Methods: Content analysis of Sweet Bee Venom and Bee Venom was rendered using HPLC method and characterization of Anti-Sweet Bee Venom in Rabbit Serum. Clinical observation was conducted for inducement of allergic responses to Sweet BV. Results : 1. Analyzing melittin content using HPLC, Sweet BV contained 34.9% more melittin than Bee venom pharmacopuncture at same concentration. 2. Observing chromatogram of HPLC, removal of the enzyme was successfully rendered on Sweet BV. 3. The anti-serum of Sweet BV showed high titers against melittin and bee venom and relatively low titer against phospholipase A2. 4. After conducting approximately 3,000 cases of Sweet BV administration, not a single case of generalized anaphylatic reaction occurred in clinical observation. 5. Mild compared to the bee venom pharmacopuncture, Sweet BV showed some acute hypersensitive reactions of edema, itchiness, and aching locally. 6. Sweet BV was administered on six patients with previous history of suffering from generalized acute hypersensitive reactions with the bee venom. None of the patients showed allergic reactions with Sweet BV, suggesting it can effectively prevent anaphylatic shock which may occur after the bee venom pharmacopuncture procedure. Conclusion : Summarizing above results, Sweet Bee Venom appears to be an effective measurement against allergic reactions from the bee venom pharmacopuncture especially against anaphylatic shock.
Purified bee venom was collected from colonies of honeybees (Apis mellifera L.) using a bee venom collector under sterile conditions and then purified under strict laboratory conditions. Purified bee venom contained $63.9{\pm}5.4%$ melittin, $10.9{\pm}1.6%$ phospholipase A2, and $2.3{\pm}0.3%$ apamin. Purified bee venom has various anti-bacterial, anti-inflammatory and immunostimulating effects. In this study, we evaluated purified bee venom which are mammary gland cells, MAC-T cells are used to increase the synthesis of milk protein. Purified bee venom promoted the proliferation of MAC-T cells at concentrations below $1{\mu}g/mL$, but cytotoxicity at $10{\mu}g/mL$ and above. As a result of the increase in the synthesis of ${\beta}-casein$, a milk protein after treatment with MAC-T cells at a concentration of the bee venom without cytotoxicity, the ${\beta}-casein$ content in the cell culture was increased when treated at a concentration of 1 ng/mL or more. In addition, it was confirmed that purified bee venom significantly increased the expression of bovine ${\beta}-casein$ (bCSNB) mRNA, a ${\beta}-casein$ synthesis gene, at a concentration of 1 ng/mL or more. These results suggest that purified bee venom can be used to increase the production of livestock by ultimately increasing the expression of milk protein.
Houttuynia cordata Thunb, well known as 'E-Sung-Cho' in Korea, is traditional medicinal plant generally used in Oriental medicine therapy. We previously reported that the water extract of H. cordata inhibited cell proliferation and induced apoptosis in human breast carcinoma cells. In the present study, we investigated the biochemical mechanisms of anti-proliferative effects by the methanol extract of H. cordata (MEHC) in human lung carcinoma A549 cells. It was found that MEHC could inhibit the cell growth in a dose-dependent manner, which was associated with morphological change and apoptotic cell death as determined by formation of apoptotic bodies, DNA fragmentation and increased populations of apoptotic-sub G1 phase cells. Apoptosis of A549 cells by MEHC was also connected with a down-regulation of anti-apoptotic Bcl-2 and inhibitor of apoptosis proteins (IAPs) expression. MEHC treatment induced the proteolytic activation of caspase-3, caspase-8 and caspase-9, and a concomitant inhibition of poly(ADP-ribose) polymerase (PARP), ${\beta}$-catenin and phospholipase (PLC)-${\gamma}$1 protein expression. Taken together, these findings provide important new insights into the possible molecular mechanisms of the anti-cancer activity of H. cordata.
Yoo, Sungjae;Han, Shanshu;Park, Young Shin;Lee, Jang-Hern;Oh, Uhtaek;Hwang, Sun Wook
Molecules and Cells
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제27권4호
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pp.417-422
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2009
Lipoxygenase (LO) metabolites are generated in inflamed tissues. However, it is unclear whether the inhibition of the LO activity regulates the expression of c-Fos protein, a pain marker in the spinal cord. Here we used a carrageenan-induced inflammation model to examine the role of LO in the development of c-Fos expression. Intradermally injected carrageenan caused elevated number of cells exhibiting Fos-like immunoreactivity (Fos-LI) in the spinal dorsal horn, and decreased the thermal and mechanical threshold in Hargreaves and von Frey tests. Pretreatment with an inhibitor of phospholipase A2, that generates the LO substrate, prior to the carrageenan injection significantly reduced the number of Fos-(+) cells. A general LO inhibitor NDGA, a 5-LO inhibitor AA-861 and a 12-LO inhibitor baicalein also exhibited the similar effects. Moreover, the LO inhibitors suppressed carrageenan-induced thermal and mechanical hyperalgesic behaviors, which inidcates that the changes in Fos expression correlates with those in the nociceptive behaviors in the inflamed rats. LO products are endogenous TRPV1 activators and pretreatment with BCTC, a TRPV1 antagonist inhibited the thermal but not the mechanical hypersensitivity. Overall, our results from the Fos-LI and behavior tests suggest that LO products released from inflamed tissues contribute to nociception during carrageenan-induced inflammation, indicating that the LO pathway is a possible target for modulating inflammatory pain.
Objective: To explore the molecular mechanisms of fatty liver hemorrhagic syndrome (FLHS) in laying hens, an experiment was conducted to reveal the differences in histopathological observation and gene expression between FLHS group and normal group. Methods: We compared the histopathological difference using hematoxylin and eosin staining and proceeded with RNA sequencing of adipose tissue to search differentially expressed genes and enriched biological processes and pathways. Then we validated the mRNA expression levels by real-time polymerase chain reaction and quantified protein levels in the circulation by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: We identified 100 differentially expressed transcripts corresponding to 66 genes (DEGs) were identified between FLHS-affected group and normal group. Seven DEGs were significantly enriched in the immune response process and lipid metabolic process, including phospholipase A2 group V, WAP kunitz and netrin domain containing 2, delta 4-desaturase sphingolipid 2, perilipin 3, interleukin-6 (IL-6), ciliary neurotrophic factor (CNTF), and suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS3). And these genes could be the targets of immune response and be involved in metabolic homeostasis during the process of FLHS in laying hens. Based on functional categories of the DEGs, we further proposed a model to explain the etiology and pathogenesis of FLHS. IL-6 and SOCS3 mediate inflammatory responses and the satiety hormone of leptin, induce dysfunction of Jak-STAT signaling pathway, leading to insulin resistance and lipid metabolic disorders. Conversely, CNTF may reduce tissue destruction during inflammatory attacks and confer protection from inflammation-induced insulin resistance in FLHS chickens. Conclusion: These findings highlight the therapeutic implications of targeting the JAK-STAT pathway. Inhibition of IL6 and SOCS3 and facilitation of CNTF could serve as a favorable strategy to enhance insulin action and improve glucose homoeostasis, which are of importance for treating obesity-related disorders for chickens.
Kim, Jung Nam;Song, Ho Jun;Lim, Bora;Kwon, Young Kyu;Kim, Byung Joo
대한약침학회지
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제16권1호
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pp.43-49
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2013
Objective: Pyungwi-san (PWS) plays a role in a number of physiologic and pharmacologic functions in many organs. Interstitial cells of Cajal (ICCs) are pacemaker cells that generate slow waves in the gastrointestinal (GI) tract. We aimed to investigate the beneficial effects of PWS in mouse small-intestinal ICCs. Methods: Enzymatic digestion was used to dissociate ICCs from the small intestine of a mouse. The whole-cell patch-clamp configuration was used to record membrane potentials from the cultured ICCs. Results: ICCs generated pacemaker potentials in the GI tract. PWS produced membrane depolarization in the current clamp mode. Pretreatment with a $Ca^{2+}$-free solution and a thapsigargin, a $Ca^{2+}$-ATPase, inhibitor in the endoplasmic reticulum, eliminated the generation of pacemaker potentials. However, only when the thapsigargin was applied in a bath solution, the membrane depolarization was not produced by PWS. Furthermore, the membrane depolarizations due to PWS were inhibited not by U-73122, an active phospholipase C inhibitor, but by chelerythrine and calphostin C, protein kinase C inhibitors. Conclusions: These results suggest that PWS might affect GI motility by modulating the pacemaker activity in the ICCs.
Enzymatic conversion of brain glycosylphosphatidylinositol-linked alkaline phosphatase (GPI-AP), amphiphilic, was examined. When GPI-AP was incubated with glycosylphosphatidylinositol-specific phospholipase D (GPI-PLD), a negligible conversion of GPI-AP to hydrophilic form was observed. The inclusion of monoacylglycerols enhanced the enzymatic conversion, although the action of monoacylglycerols differed greatly according to the size of acyl group; the enzymatic conversion was enhanced considerably in the presence of monoacylglycerols possessing acyl group of longer chain length ($C_{10-}C_{18}$), which monoacylglycerols with acyl moiety of shorter length ($C_{4-}C_{8}$) did fail to augment the enzymatic conversion. Noteworthy, monooleoylglycerol was much more effective than the other monoacylglycerols in promoting the enzymatic conversion, indicating a beneficial role of the unsaturation in acyl chain. Meanwhile, ionic amphiphiles such as monohexadecyllysophosphatidylcholoine and palmitoyl-carnitine decreased the enzymatic conversion of GPI-AP in a concentration-dependent manner, with monohexadecyllysophosphatidylcholine and palmitoyl-carnitine deceased the enzymatic conversion of GPI-AP in a concentration-dependent manner, with monohexadecyllysophosphatidylcholoine being more inhibitory than palmitoylcarnitine. Separately when GPI-AP was exposed to various oxidants prior to the incubation with GPI-PLD, a remarkable decrease of the enzymatic conversion was observed with hypochlorite and peroynitrite generators, but not $H_{2}O_{2}$. In further study, hypochlorite was found to inactivate GPI-PLD at low concentrations ($3~100{\mu}M$). From these results, it is suggested that the enzymatic conversion of GPI-AP by GPI-PLD may be regulated in vivo system.
Vibrio harveyi, one of the major causal agent of vibriosis, affects a diverse range of marine vertebrates and invertebrates over a wide geographical area. The aims of this study were to investigate the characteristics of extracellular products (ECPs) from an isolate of the pathogenic non‐luminous V. harveyi and the luminous V. harveyi. And ECPs of V. harveyi were examined the pathogenicity to the black rockfish, Sebastes schlegeli, and histopathological traits of internal organs injected by ECPs. Four strains of V. harveyi cultures produced ECPs showing various enzymatic activites (caseinase, gelatinase, phospholipase, lipase, haemolysin). The ECPs showed strong cytotoxicity on macrophages of black rockfish, Sebastes schlegeli and olive flounder, Paralichthys olivaceus. Especially, the virulence of ECPs from the isolate of V. harveyi FR 2 was higher in the intraperitoneally injected black rockfish. Also, the ECPs of V. harveyi FR 2 caused the expansion of sinusoids in the liver, the activation of ellipsoid in the spleen and the sloughing of the epidermal cell in the intestine. It was suggested that the ECPs from V. harveyi play an important role in the pathogenicity process of the V. harveyi.
가축화된 동물종 중 하나인 개는, 다양한 목적을 위해 인간에 의하여 선택적으로 육종되었다. 개는 많은 품종을 갖고 있고, 특정한 행동과 형태를 갖도록 인공적으로 선택되어 왔다. 개들은 그들의 삶을 안내, 구조 혹은 탐지 등의 특수 목적에 대하여 인간에게 헌신하고 있다. 특수 목적견에게 요구되는 좋은 품성, 이를테면 온순함, 강건성, 그리고 인내심과 같은 특성은 그들의 특수 임무를 수행하는 데 필요하다. 많은 연구들이 우수한 특수 목적견의 선정을 위한 유전적 마커를 찾는 데 집중되었다. 본 연구에서는, 뇌에서 발현함으로써 기능하는 것으로 알려진 총 8개의 유전자(ABAT; 4-Aminobutyrate Aminotransferase, PLCB1; Phospholipase C, Beta 1, SLC10A4; Solute Carrier Family 10, Member 4, WNT1; Wingless-Type MMTV Integration Site Family, Member 1, BARX2; BarH-Like Homeobox 2, NEUROD6; Neuronal Differentiation 6, SEPT9; Septin 9 그리고 TBR1; T-Box, Brain, 1)들의 정량적인 발현 양상을 개의 네 품종의 뇌 조직에서 확인하였다. 특히, BARX2, SEPT9, SLC10A4, TBR1 그리고 WNT1 유전자들은 비글과 진돗개에서 많이 발현되는데 반하여, 삽살이와 세퍼드에서는 반대되는 발현 양상을 보여 주었다. 본 연구의 유전자들에 대한 Gene ontology (GO) 결정을 위하여 DAVID (Database for annotation, visualization and integrated discovery) 분석이 수행되었고, 이러한 유전자들이 뇌 발생과 개체의 지능에 중요한 기능을 제공할 것이라고 예상하였다. 결론적으로, 이러한 결과들을 통하여, 뇌에서의 기능과 관련된 인자들과 관련된 바이오마커를 발굴하는 데 중요한 단서를 제공해 줌과 동시에, 우수한 특수 목적견을 선발하는 데 도움을 줄 것이라 기대한다.
Hominis Placenta has a broad array of clinical applications in Korean medicine, including treatment of inflammatory conditions such as rheumatoid arthritis. The purpose of this study is to explore the global gene expression profiles in human RAW 264.7 cell lines treated with Hominis Placenta herbal-acupuncture solution (HPHAS) using microarray analysis. The RAW 264.7 cells were treated with lipopolysaccharide (LPS), HPHAS, or both. Of the 8,170 genes profiled in this study, with a cut-off level of two-fold change in the expression, 72 genes (CTD1, regulating synaptic membrane exocytosis 2, etc.) were upregulated and 135 genes(splicing factor, arginine/serine-rich 1, actinin, alpha 1, etc.) downregulated following LPS treatment. One gene (acrosin) was upregulated and 12 genes (phospholipase A2, group IB, neurofilament, heavy polypeptide 200kDa, etc.) were downregulated following HPHAS treatment. Eleven genes (RAB27A, member RAS oncogene family, eosinophil peroxidase, etc.) were upregulated and 16 genes (V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog G (avian), RW1 protein, etc.) were downregulated following co-stimulation of HPHAS and LPS. It is thought that microarrays will play an ever-growing role in the advance of our understanding of the pharmacological actions of HPHAS in the treatment of arthritis. Further studies, however, are required to concretely prove the effectiveness of HPHAS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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