• Title/Summary/Keyword: peroxidase isozyme

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형질전환된 토마토 캘러스의 Superoxide Dismutase와 Peroxidase 활성 (Superoxide Dismutase and Peroxidase Activity of Transformed Callus in Tomato)

  • 유정민;정형진;김경민;곽상수
    • 식물조직배양학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.177-181
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    • 1998
  • 토마토에서 GUS 유전자를 가진 Agrobacterium을 이용하여 형질전환된 캘러스와 형질전환 되지 않은 캘러스의 peroxidase(POD)와 superoxide dismutase(SOD) 활성 차이를 조사하여 형질전환된 세포의 안전성평가의 기초자료로 삼고자 얻어진 결과는 다음과 같다. JA101 종자로부터 형성된 hypocotyl의 POD, SOD 비활성은 각각 23 unit/mg protein와 2,156 unit/mg protein로 공시품종 중 가장 높은 활성을 나타내었다. Hypocotyl 절편체로부터 유도한 캘러스 생장은 1mg/L 2,4-D의 농도에서 가장 좋았으며, 1 mg/L 2,4-D가 함유된 배지에서 유도된 캘러스에서 POD 와 SOD 비활성은 각각 47 unit/mg protein 와 95,786 unit/mg protein로 높게 나타났다. Agrobacterium과 hypocotyl 절편체와의 공동배양으로부터 형성된 캘러스중 21.6%의 형질전환된 캘러스를 얻을수 있었으며, 형질전환된 캘러스의 POD 비활성은 54 unit/mg protein로 형질전환 되지 않은 캘러스의 64 unit/mg protein보다 낮게 나타났고, SOD 비활성은 형질전환된 캘러스가 30,300 unit/mg protein로 형질전환되지 않은 캘런스의 37,077 unit/mg protein 보다 낮게 나타났다. 형질전환된 캘러스와 형질전환되지 않은 캘러스간의 isozyme pattern 차이는 인정할 수 없었다.

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Ethephon과 Gibberellin 처리(處理)가 오이의 성발현(性發現)과 이에 따른 단백질함량(蛋白質含量), Peroxidase 활성(活性) 및 Isoperoxidase Pattern에 미치는 영향(影響) (Effects of Ethephon and Gibberellin on Sex Expression, and Subsequent Changes in Protein Contents, Peroxidase Activities, and Isoperoxidase Isoperoxidase Patterns of Cucumis sativus L.)

  • 구우서;김영래
    • 농업과학연구
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    • 제12권1호
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    • pp.1-16
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    • 1985
  • 오이의 성발현(性發現) 기구(機構)에 관(關)한 기초(基礎) 자료(資料)를 얻고저 비절성(飛節成) 품종(品種)인 사엽(四葉), 절성(節成) 품종(品種)인 신록다다기, 그 중간형(中間型)인 성호원(聖護院)을 공시(供試)하여 종자(種子)와 최아종자(催芽種子)의 단백질함량(蛋白質含量)의 품종간(品種間) 차이(差異)와 2엽기(葉期)와 4엽기(葉期)의 ethephon(250 ppm)과 gibberellin(100ppm) 처리(處理)에 의한 성발현(性發現) 양상(樣相)과 식물체내(植物體內)의 단백질함량(蛋白質含量), peroxidase 활성(活性) 및 disc polyacrylamide gel 전기영동(電氣泳動)에 의한 단백질(蛋白質) banding pattern과 peroxidase isozyme banding pattern의 소장관계(消長關係)를 조사(調査)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. Ethephon 처리(處理)는 자화(雌花)의 착생(着生)을 약간 증가(增加)시키고, 웅화(雄花)의 착생(着生)을 현저(顯著)히 감소(減少)시켰으며 gibberellin 처리(處理)는 절성종(節成種)인 신록다다기와 성호원(聖護院)의 웅화수(雄花數)를 현저(顯著)히 증가(增加)시켰으나 비절성(飛節成)일 사엽(四葉)의 웅화수(雄花數)는 증가(增加)시키지 못하였다. 2. 종자(種子)와 최아종자(催芽種子)의 단백질함량(蛋白質含量), 단백질(蛋白質) 및 peroxidase의 banding pattern은 품종간(品種間)에는 약간의 차이(差異)가 있었으나 절성(節成)과 비절성간(飛節成間)에는 뚜렷한 차이(差異)를 인정(認定)할 수 없었다. 3. 2 엽기(葉期)와 4 엽기(葉期)의 단백질함량(蛋白質含量)은 잎과 생장점(生長點)에서 모두 처리후(處理後) 일수(日數)가 경과(經過)함에 따라 2엽기(葉期)에는 증가(增加)하으나 4엽기(葉期)에는 오히려 감소(減少)되는 경향(傾向)을 보였다. 그리고 4 엽기(葉期) 생장점(生長點)에 있어서 비절성(飛節成)인 사엽(四葉)은 ethephon 처리(處理)에 의해 단백질함량(蛋白質含量)이 무처리구(無處理區)에 비(比)해 높아졌으나 신록다다기와 성호원(聖護院)은 오히려 낮아졌다. 4. Peroxidase 활성(活性)은 2 엽기(葉期)에는 잎이나 생장점(生長點)에서 모두 일수(日數)가 경과(經過)함에 따라 감소(減少)하였으나 4엽기(葉期)에는 오히려 증가(增加)되는 경향(傾向)이었다. 특(特)히 ethephon 처리구(處理區)는 4엽기(葉期) 생장점(生長點)에서 그 활성(活性)이 현저(顯著)히 높아져 5일(日)째에는 타처리구(他處理區)에 비(比)해 월등(越等)히 높았다. 5. 단백질(蛋白質)의 banding pattern은 2엽기(葉期)에는 잎과 생장점(生長點) 공(共)히 처리후(處理後) 일수(日數)가 경과(經過)함에 따라 3품종(品種)모두 band 수(數)가 감소(減少)되었으나 4엽기(葉期)에는 오히려 band수(數)가 증가(增加)되는 경향(傾向)이었다. 4엽기(葉期) 생장점(生長點)의 단백질(蛋白質) pattern은 비절성(飛節成)인 사엽(四葉)의 ethephon 처리구(處理區)가 절성(節成)인 신록다다기의 무처리구(無處理區)와 같은 양상(樣相)으로 변화(變化)되어 갔다. 6. Peroxidase isozyme banding pattern은 2엽기(葉期) 잎에서 비절성(飛節成)인 사엽(四葉)의 ethephon 처리구(處理區) pattern이 성호원(性護院) 및 신록다닥기의 ethephon 처리ㅜ(處理區) pattern으로 닮아 감을 볼 수 있었고 4엽기(葉期) 생장점(生長點)에서는 처리후(處理後) 일수(日數)가 경과(經過)함에 따라 사엽(四葉) ethephon 처리구(處理區)의 pattern이 성호원(聖護院) 및 신록다다기의 무처리구(無處理區) pattern으로 닮아 감을 볼 수 있었다. 7. 이상(以上)의 결과(結果)로 볼 때 비절성종(飛節成種)은 ethephon에 의해 식물체내(植物體內)의 단백질함량(蛋白質含量), peroxidase 활성(活性) 및 단백질(蛋白質)과 peroxidase isozyme의 pattern이 절성종(節成種)에 가깝게 변화(變化)되어 절성화(節成化)되며, 따라서 이들의 변화(變化)가 오이의 성발현(性發現)에 깊이 관여(關與)하는 것으로 사료(思料)된다.

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High Light-Induced Changes in the Activities of Antioxidant Enzymes and the Accumulation of Astaxanthin in the Green Alga Haematococcus pluvialis

  • Park, Seul-Ki;Jin, Eon-Seon;Lee, Choul-Gyun;Lee, Mi-Young
    • Molecular & Cellular Toxicology
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    • 제4권4호
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    • pp.300-306
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    • 2008
  • We investigated high light-induced alterations in antioxidant enzymes by exposing green vegetative cells of the alga Haematococcus pluvialis to excess irradiance to induce the production of astaxanthin, a carotenoid pigment. Total activity of catalase decreased approximately 70% after high light exposure, whereas glutathione peroxidase (GPX) activity was slightly enhanced. Total activity of superoxide dismutase and ascorbate peroxidase (APX) also slightly decreased. Overall, we did not observe dramatically elevated levels of antioxidant isozymes, although APXn, GPX2, and GPX3 isozyme increased slightly. ${H_2}{O_2}$ content increased about sixfold after high light exposure, demonstrating severe cellular oxidative stress, whereas lipid peroxidation was notably reduced. Concomitantly, astaxanthin accumulation increased about sevenfold. This result suggests that probably massively accumulated astaxanthin may be one of the antioxidant protector against high light stress.

Activities and Isozyme Profiles of Antioxidant Enzymes in Intercellular Compartment of Overwintering Barley Leaves

  • Baek, So-Hyeon;Kwon, In-Sook;Park, Tae-Il;Yun, Song-Joong;Kim, Jin-Key;Choi, Kyeong-Gu
    • BMB Reports
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    • 제33권5호
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    • pp.385-390
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    • 2000
  • Overwintering plants should survive the various biotic and abiotic stresses that occur during winter. Previous studies indicated that active oxygen species are involved in freezing, dehydration, anoxia and pathogen infections. As the importance of the events that occur in the intercellular compartment became apparent in disease resistance, we examined the nature of intercellular antioxidant enzymes in order to access their possible involvement in the winter hardiness of barley. The levels of intercellular peroxidase, catalase, and SOD activities on the unit protein basis were 394, 18, and 9% of those of cellular activities, respectively. Major intercellular peroxidase isoforms consisted of four neutrals and four basic forms; whereas major cellular isoforms were two basic forms. Out of the two major catalase isoforms a higher molecular weight form was predominantly abundant in both cellular and intercellular compartments. Among the five major cellular SOD isoforms, three were also present in the intercellular compartment. The presence of substantial amounts of intercellular antioxidant enzymes in overwintering barley leaves may suggest the involvement of these enzymes in the tolerance mechanism to the various stresses that occur during winter.

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동위효소 분석과 제한효소 단편 다형화현상을 이용한 보리 품종의 분류 (Varietal Classification of Barley by Isozymes and Restriction Fragment Length Polymorphisms (RFLPs))

  • 진병순;박노동;은무영;이은섭
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제36권3호
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    • pp.139-145
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    • 1993
  • 등전점 전기영동법에 의한 동위효소 분석과 제한효소 단편 다형화현상(RFLP) 분석기법을 이용하여 보리 품종 19종의 품종형을 구분하고 근연관계를 검토하였다. 보리 19품종은 동위효소 형태특성 에 따라 esterase는 7가지형으로, phosphoglucose isomerase는 3가지형으로, peroxidase는 4가지형으로, alcohol dehydrogenase는 2가지 형으로 각각 분류되었으며, 그 핵 DNA를 제한효소 EcoRV로 절단하여 DNA probe pMSU 71로 RFLP를 분석한 결과 2가지 품종형으로 구분되었다. 이 4가지 동위효소의 형태특성 및 핵 DNA의 RFLP 특성을 종합하면 보리 19품종을 13가지 품종형으로 구분할 수 있었다. 이렇게 구분된 13가지 품종형들은 Nei's F-statistics의 계산식으로 그 근연관계를 분석하였더니 $97.4{\sim}66.5%$ 범위의 근연관계를 보였다.

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Effects of Various Ions on the Cellular and Secretory Isoperoxidases in Rice Suspension Culture

  • Lee, Mi-Young
    • BMB Reports
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    • 제30권6호
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    • pp.379-384
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    • 1997
  • The effects of several ions on the specific activity and isozyme patterns of cellular and secretory isoperoxidases were studied in suspension-cultured cells of rice (Oryza sativa L.). Peroxidase release into the culture medium occurred in the absence of added calcium. The addition of calcium ion greatly stimulated the secretion of cationic isoperoxidases such as C2 and C3 into the medium: a maximum 11 fold increase of secretions occurred in the presence of 5 mM $CaCl_2$, and the secretion was accomplished within 1 hour after the addition of $CaCl_2$. About a 10 fold increase of the peroxidase secretion into the medium did occur with 0. 5% NaCl, whereas cellular isoperoxidase levels were reduced notably. About a 6 fold increase of the specific activity of cellular isoperoxidase was found in 5 mM $NiCl_2$-treated cell, while $NiCl_2$ had no effect on the secretion of peroxidase into the medium. Various concentrations of KCl did not change peroxidase secretion, but 5 mM $ZnCl_2$ reduced peroxidase secretion greatly. The major secretory isoperoxidases stimulated by $CaCl_2$, NaCl and cellulase were composed of cationic isoperoxidases C2 and C3, which were found to be localized in the cell wall of rice by examination of the enzyme in the protoplast. Furthermore, the secretion rates of secretory isoperoxidases were increased rapidly when cellulase was treated in the absence of the osmotic stabilizer of 0.4 M mannitol. These results suggest that the stimulations of secretory isoperoxidase levels seem to be due to the stimulation of secretion into the culture medium of rice.

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Paraquat 스트레스를 받는 무 (Raphanus sativus L) 유식물에서 H2O2 분해 효소에 대한 폴리아민의 효과 (Effects of polyamines on hydrogen peroxide-scavenging enzymes in radish seedling plants under paraquat stress)

  • 진창덕
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제36권2호
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    • pp.149-156
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    • 2009
  • Application of exogenous polyamines (PAs) reduced the paraquat (PQ)-induced cotyledon injuries in radish seedling plants with 1 mM spermidine (Spd) being the most effective protectant. PQ injury symptoms in the cotyledons, e.g., large accumulation of $H_2O_2$, and losses of fresh weight, chlorophyll, and proteins, were significantly alleviated. Likewise, analysis of $H_2O_2$-scavenging enzymes such as catalase (CAT) and guaiacol peroxidase (GPX) showed that pretreatment with Spd among PAs remarkably increased total CAT activity and strongly retarded PQ-induced rapid decline in total GPX activity. In a native gel assay, one CAT isozyme (CAT1) and two GPX isozymes (GPX1 and a newly synthesized GPX isozyme) proved to be more responsible for PQ tolerance, as manifested by the strong increases in their activities by Spd pretreatment. Based on these results, we can suggest that PAs (especially 1 mM Spd) may function as antioxidant protectors by invoking CAT and GPX enzymes which control the endogenous $H_2O_2$ level in radish cotyledons exposed to PQ.

비병원성 Pseudomonas solanacearum 접종에 의한 담배내 항균물질생성과 Peroxidase 및 Polyphenoloxidase의 변화 (Production of Antibacterial Substance, and Changes in Peroxidase nd Polyphenoloxidase Activities in Tobacco Plants Inoculated with Avirulent Isolate of Pseudomonas solanacearum)

  • 이영근;민태기;박원모
    • 한국식물병리학회지
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    • 제3권3호
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    • pp.203-209
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    • 1987
  • Pseudomonas solanacearum의 병원성균주 및 비병원성균주를 담배의 뿌리에 접종하여 그 잎과 줄기, 뿌리에서 P. solanacearum과 Erwinia carotovora subsp. carotovora, Escherichia coli에 대한 항균물질을 분리하였다. 담배즙액을 TLC plate에 발전시킨 결과 비병원성균주에 접종된 담배에서는 $R_f$ 0.6 부근에서, 병운성균주에 접종된 담배에서는 $R_f$ 0.9 부근에서 각각 항균물질을 분리할 수 있았다. 그러나 고압살균된 담배즙액배지에 병원성균주 및 비병원성균주를 3일간 배양한 배양여액에서는 항균물질의 생성이 인정되지 않았다. 비병원성균주 및 병원성균주에 접종된 담배잎에서는 무처리 담배에 비하여 peroxidase와 polyph-enoloxidase의 활성이 높았으나, 그 줄기와 뿌리에서는 효소활성의 차이가 없었다. 비병원성균주와 병원성균주로 처리된 담배 사이, 감수성품종인 BY4와 저항성품종 NC82 사이에도 두 효소의 활성과 동위효소형태의 차이가 없었다.

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사철느타리버섯 원형질체내(原形質體內) 버들볏짚버섯 핵(核)의 전이(轉移) (Transfer of Isolated Nuclei from Agrocybe aegerita Mycelia into Pleurotus florida Protoplasts)

  • 유영복;신평균;김한경;변명옥;류창현;차동열;장권열
    • 한국균학회지
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    • 제17권3호
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    • pp.114-118
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    • 1989
  • 야생형(野生形)이며 self-fertile인 버들볏짚버섯(버들송이) 균사체(菌絲體)로부터 분리(分離)한 핵(核)을 영양요구주(營養要求株)이며 self-sterile인 사철느타리버섯 원형질체내(原形質體內)에 polyethylene glycol+$CaCI_2$+glycine 용액으로 섭입(攝入)하였다. 100균주(菌株)의 핵전이주(核轉移株) 검정(檢定)으로 양친(兩親)이 균총분리(菌叢分離)되어 버들볏짚버섯친(親) 형태(形態)에는 클램프 연결체(連結體)가 균사(菌絲)에 있고, 사철느타리버섯친(親) 형태(形態)에는 클램프 연결체(連結體)가 없는 것이 3균주(菌株), 균총형태(菌叢形態)가 안정성(安定性)이며 클램프 연결체(連結體)가 균사(菌絲)에 형성(形成)된 것이 55균주(菌株), 균총형태(菌叢形態)가 안정성(安定性)이며 클램프 연결체(連結體)가 균사(菌絲)에 존재(存在)하지 않는 것이 42균주(菌株)였다. 이들 핵전이주(核轉移株)는 모두 원기(原基) 형성(形成)되어 자실체(子實體)로 성숙되었으며 그 형태(形態)는 버들볏짚버섯과 거의 유사(類似)하였다. 핵전이주(核轉移株)를 전기영동법으로 alcohol dehydrogenase, esterase, lactate dehydrogenase, peroxidase의 동위효소(同位酵素) 분석(分析)으로 비교하였는데 클램프 연결체(連結體)를 가지는 형태(形態)의 몇 균주(菌株)가 새로운 band를 형성(形成)하였으며 다른 균주(菌株)들은 양친주(兩親株)에서 유래된 것이었다.

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랫드에서 스트레스에 의한 위궤양이 위발암화과정에 미치는 영향에 관한 연구 (Studies on the Effect of Stress-Induced Gastric Ulcer on Gastric Carcinogenesis in Rats treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)

  • 이종권;김형진;이영순
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제6권1호
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    • pp.27-40
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    • 1991
  • 랫드에서 속박 및 침수 스트레스에 의한 위궤양이 MNNG(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)의 위발암과정에 어떠한 영향이 있는지 알아보기 위하여 본 실험을 실시 하였다. 1 군은 시험시작 8시간 전에 스트레스를 가한 후 MNNG를 투여하였으며, 2군은 MNNG를 음수 투여한 후 MNNG에 의한 위발암 기간 중 촉진기간이라고 알려진 3~12주 사이에 매주 발암 물질과 함께 스트레스를 1회 가하였다. 3군은 양성 대조군으로서 MNNG만을 투여하였고, 4군은 음성 대조군으로 발암제를 처치하지 않았다. 전군 공히 20주에 부검하여 acidine-biotin peroxidase complex(ABC) 방법으로 면역조직 화학적 염색을 한 수 PAPG({Pepsinogen isozyme 1 Altered Pyloric Gland)에 대한 통계 분석을 하였으며, 각 군간의 체중 변화와 병리 변화를 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 발암 물질을 투여한 1·2·3군이 비투여군(4군)에 비해 증체율이 유의성있게 감소하였다. (p<0.05), 그러나 발암 물질 투여군간의 체중변화에는 유의성이 없었다. 2. MNNG 투여와 함께 스트레스를 가한 군이 스트레스를 가하지 않고 MNNG만을 투여한 군에 비하여 Pg 1 변이 유문선(PAPG)의 수가 유의성 있게 증가되었다. (p<0.01). 3. 위발암 과정 중 촉진기간에 스트레스를 가한 군이 스트레스를 가하지 않고 MNNG만을 투여한 군에 비해 점막 과형성(mucosal hyperplasia) 발생이 유의성있게 증가되었다. (P<0.05)

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