• 한국식품영양학회지
• /
• 제5권2호
• /
• pp.137-143
• /
• 1992

As a research for developing biofertilizers, Klebsiella oxytoca, an associative nitrogen fixer in the rhizosphere of rice plant in the soil of paddy field, was subjected to molecular breeding. The results obtained were as followings. 1). By transforming pbIC71A, Nif A overproducing plasmid, into Klebsiella oxytoca NGl3, Klebsiell6f oxytoca SH3l, and Klebsiella oxytoca SH161, nitrogenase activities in the absence of nitrogen source in the medium were increased 6.4, 17.2, and 13.5 times, respectively, in comparison with the parent strains. 2). Nitrogenase activity of Klebgiella oxytoca NGl3, Klebsiella oxytoca SH3l, and Klebsiella oxytoca SH161 was completely repressed In the presence of 15mM NH4+. But, nitrogenase activities of Klebsiella oxytoca NGl3/PMC71A, Klebsiella oxytoca SH3l /PMC71A, and Klebsiella oxytoca SH 161/pMC714 harboring PMC71A, were 13.7%, 7.7%, and 6.2% of the nitrogenase activities in the absence of nitrogen source in the medium, respectively.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제8권2호
• /
• pp.87-92
• /
• 1980

선정균을 장기간 보다 안전하게 관리하고 균의 성질을 개선하기 위하여 실험한 결과는 다음과 같다. 1) 선정균은 대체로 0~5$^{\circ}C$에서 soil 배지에 보존하는 것이 좋았으며 보존기간 10개월까지는 산생성력에 큰 변화를 보이지 않았다. 2) 선정균 M-315는 강산성지에 계대배양하므로서 산생성능이 약간 향상되였으며 종균으로는 포자형성배지에 7~10일간 배양한 균의 포자로 접종하는 것이 좋았다. 3) 선정균에 자외선을 조사시킨 결과 형태적으로 변화된 변이주 109주을 분리하였고 그 중 산생성력이 3.2% 향상된 변이주 M-812를 얻었다.

• 미생물학회지
• /
• 제27권3호
• /
• pp.216-220
• /
• 1989

Aamylase 활성이 높은 Aspergillus oryzae와 알콜발효능이 있는 Saecharomyccs cerevisiae의 원형질체융합을 위한 기초연구로서, amylase 활성이 있는 A. oryzae의 종내원형질체를 융합시켜 이들융합체의 특성을 조사하였다. 영양요구성 돌연변이 균주의 mycellia로부터 원형질체를 생성하기 위해서는 lytic enzyme으로 Novozyme 234가 효과적이였고 완충용액의 pH는 5.5에서 6.0사이가 최적이었다. F usogen으로 30% PEG4,000를 사용하였을 때 효과적으로 원형질체의 융합이 이루어졌으며 이들 융합체의 대부부은 heterokaryons이었다. 원형질체의 형태와 PEG처리후 융합되는 과정을 광학현미경으로 관찰하였다. 원형질체의 재생율은 재생배지와 균주에 따라 1.46~14%이었고, A. oryzae 종내융합율은 0.12-0.16이었다. 융합체의 DNA함량을 조사한 결과 모균주보다 약 1.5배정도 증가됨을 보였고 융합체들의 amylase 활성은 융합체에 따라 다소 차이를 냐타내었다. 가장 높은 amylase 활성을 나타낸 융합체들의 amylase 활성은 융합체에 따라 다소 차이를 나타내었다. 가장 높은 amylase 활성을 나타낸 융합체 F2-2에 있어서는 야생균주 ATCC 22788의 그것보다 amylase 활성이 약 1.5배 가량 높았다.

• 한국균학회지
• /
• 제41권1호
• /
• pp.14-20
• /
• 2013

URP-PCR 분석에서 유사품종으로 분류된 품종들을 이용하여 AFLP 방법과 체세포불화합성(VCG)으로 품종간 다형성을 조사하였다. AFLP로 분석 한 결과 원형 유사품종군에서는 ASI 2595와 2183이 차이를 보였으며, 수한 유사품종군에서는 ASI 2829만이 차이를 보이고 다른 균주간에는 차이를 볼 수 없었다. 그 차이는 8개의 primer 조합 중 P + AG/M + AAG와 P + GT/M + ATG primer 조합에서만 나타났다. 31개 느타리 품종에 대한 AFLP분석은 80~1000bp에서 총 330개 밴드를 나타내었다. UPGMA 유연관계 분석에서는 유사도 0.96에서 4개의 분리된 집단으로 구분되었으며 각 집단은 유사품종들로 구성되었다. 균주간 화합성 검정을 하여 버섯 품종 판별을 시도한 결과 대치배양에 의한 이질핵화는 품종간 차이가 있는 것으로 나타났으나. 유사품종간에는 대치선이 나타나지 않았다. 유사품종들의 대부분이 구별성이 인정되지 않는 것으로 나타나 품종육성에 이용된 교배모본의 계보가 아주 가깝거나 혹은 동일한 품종이 복제되어 다른 이름으로 유통되는 것으로 추정할 수 있었다.

• 농업과학연구
• /
• 제13권2호
• /
• pp.279-288
• /
• 1986

Aspergillus oryzae MF에 자외선(紫外線)을 조사(照射)하여 조사주(照射株) 151주(株)를 분리(分離)하고 이 중(中)에서 protease 생산능(生産能)이 강화(强化)된 변이주(變異株) 1주(株)(Aspergillus oryzae UM-36)를 얻었다. 변이주(變異株)의 특징(特徵)을 조사(調査)하고 밀기울국(麴) 및 간장국(麴)에서의 protease, ${\alpha}$-amylase 및 glucoamylase의 생산(生産)을 검토(檢討)하였다. 그 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 변이주(變異株)는 원주(原株)에 비(比)하여 맥아즙한천배지(麥芽汁寒天培地) 및 Czapek 한천배지(寒天培地)에서 생육(生育)이 늦고 포자착생(胞子着生)이 약(弱)하였다. 2. 맥아즙한천배지(麥芽汁寒天培地)에 배양(培養)한 경우(境遇) 변이주(變異株)는 원주(原株)에 비(比)하여 포자병(胞子柄)이 짧았다. 3. 맥아즙한천배지(麥芽汁寒天培地) 및 Czapek한천배지(寒天培地)에 평면배양시(平面培養時) 변이주(變異株)는 sector를 형성(形成)하지 않았으며 안정(安定)된 변이주(變異株)라고 생각되었다. 4. 변이주(變異株)의 protease 생산능(生産能)은 밀기울국(麴)에서 원주(原株)의 약(約) 1.4배(倍), 간장국(麴)에서 원주(原株) 약(約) 2배(倍)이었다. 5. 원주(原株)에 비(比)하여 변이주(變異株)는 밀기울국(麴)이나 간장국(麴)에서 ${\alpha}$-amylase 와 glucoamylase도 많이 생산(生産)하였다. 6. 원주(原株)와 변이주(變異株) 모두 $30^{\circ}C$에서 밀기울국(麴) 배양시(培養時) protease의 최고활성(最高活性)은 배양(培養) 3일후(日後)에 나타났고 ${\alpha}$-amylase와 glucoamylase의 최고활성(最高活性)은 배양(培養) 2일후(日後)에 나타났다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제14권4호
• /
• pp.305-310
• /
• 1986

본 연구의 목적은 yeast중 glucoamylase를 분비하는 S. diastaticus와 발효성 효모인 S. cerevisiae 간의 세포융합을 하여 당화와 발효의 두 공정을 단일화하는데 있다. 각각의 Parental protoplast를 1:1로 섞은 후 PEG(M W. 4,000) 30%와 10mM CaCl$_2$용액으로 fusion시킨 결과 $10^{-4}$~$10^{-5}$ 빈도였으며, 총 fusant중 HSDD의 경우 24%, HSDM은 36.8%가 2 회의 subculture로 친주 유리의 auxotrophic cell로 segregation하였고, glucoamylase 생성 균주 중 HSDD는 9.7%, HSDM은 12.7%만이 S. diastaticus 야생주 수준의 효소 생성을 보였다. 이들 fusant의 특징을 조사해 본 바 원 Parent보다 세포의 크기가 클 순 아니라 DNA함량도 많았으며 S. cerevisiae가 spore을 전혀 형성하지 못한데 반해 융합체들은 spore을 잘 형성하였다. 이들의 fusant중 유전안정성 이 높고 glucoamylase 생성능도 강한 HSDD-170과 HSDM-119를 최종적으로 선별하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제13권1호
• /
• pp.90-98
• /
• 2003

In vivo $^31p$ Nuclear Magnetic Resonance ($^31p$NMR) and metabolic studies were carried out on an acetic acid tolerant mutant, Zymomonas mobilis $ZM4/Ac^R$, and compared to those of the parent strain, Z. mobilis ZM4, to evaluate possible mechanisms of acetic acid resistance. This investigation was initiated to determine whether or not the mutant strain might be used as a suitable recombinant host far ethanol production from lignocellulose hydrolysates containing various inhibitory compounds. $ZM4/Ac^R$ showed multiple resistance to other lignocellulosic toxic compounds such as syringaldehyde, furfural, hydroxymethyl furfural, vanillin, and vanillic acid. The mutant strain was resistant to higher concentrations of ethanol or lower pH in the presence of sodium acetate, compared to ZM4 which showed more additive inhibition. in vivo $^31p$ NMR studies revealed that intracellular acidification and de-energization were two mechanisms by which acetic acid exerted its inhibitory effect. For $ZM4/Ac^R$, the internal pH and the energy status were less affected by sodium acetate compared to the parent strain. This resistance to pH change and de-energization caused by acetic acid is a possible explanation for the development of resistance by this strain.

• Fisheries and Aquatic Sciences
• /
• 제15권2호
• /
• pp.145-150
• /
• 2012

An improved strain of the red seaweed Porphyra suborbiculata containing an increased amount of the essential amino acid L-lysine was obtained through mutation and analog enrichment. Mutagenesis using a 10% lethal dose of ultraviolet irradiation and an enrichment culture with the L-lysine analog aminoethyl-L-cysteine (AEC) was repeated to select the most productive strain using monospores of P. suborbiculata. The concentrations of AEC required to produce 50 and 100% inhibition of survival were 60 and 115 mM in the parent strain, and 72 and 135 mM in the selected AEC-resistant strain, respectively. The AEC-resistant strain, L130, produced 1.74-fold more lysine compared to its parent strain. Thus, mutagenesis with analog enrichment shows promise for selecting seaweed strains that can overproduce this essential amino acid.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제19권4호
• /
• pp.343-347
• /
• 1991

Tobramycin 고생산성 변이주를 쉽고 신속하게 선별하 수 있는 screening 방법을 개발하였다. 고농도의 apramycin이 포함된 배지를 사용함으로서 nebramycin 생산성이 낮은 변이주들은 1차적으로 제거할 수 있었다. 모균주인 S. tenerbarius ATCC 17920에는 저지환을 나타내지 못하고 생산성이 향상된 변이주의 경우에만 저지환을 형성하는 strain No.23을 토양으로부터 분리하여 Ps. paucimobilis로 동정하였고 1차 선별된 변이주들 중 tobramycin 생산성이 높은 균주들을 선별하기 위한 피검균으로 사용하였다. 이러한 screening 전략으로 strain No.23에 명확히 저지환을 나타내는 변이주 58주를 얻었고, HPLC를 이용하여 각 변이주의 tobramycin 생산성을 비교 측정한 결과 모균주에 비해 3-8배 생산성이 향상되었음을 확인하였다.

• 환경위생공학
• /
• 제23권4호
• /
• pp.23-29
• /
• 2008

This study was performed to develop mutant strain using a combination of UV irradiation procedures with protoplast mutagenesis in order to achieve an effective kasugamycin production from Streptomyceskasugaensis. Whenlessthan 1.0g/lof Linoleic acid was used, the cell growth was not inhibited. On the other hand, the cell growth was greatly inhibited when more than 1.6 g/l of linoleic acid was used. Among the various mutant strains, SK-12 was obtained in medium containing 1.6g/l of linoleic acid, showing the highest rate of both cell growth and kasugamycin production. In order to compare kasugamycin production with the SK-12 and the parent strain using soybean oil, cultures were performed in a flask. The production of kasugamycin was increased with the increase time. The maximum kasugamycin concentration was 1.2g/l after 6 days of culture. The product yield from soybean oil was 0.05g/l/g consumed carbon source, which was roughly 5.0 fold higher than the parent strain. These results show that it was effective method for obtaining a mutant resistant to linoleic acid for the effective production of kasugamycin from soybean oil.