Sung, Mi Kyung;Seo, Jun Soo;Kim, Kyung Roc;Han, Eun Hui;Nam, Jin Woo;Kang, Dal Soon;Jung, Woo Suk;Kim, Min Chul;Shim, Sang In;Kim, Kyung Moon;Chung, Jong Il
한국육종학회지
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제43권2호
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pp.115-119
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2011
Soybean proteins are widely used for human and animal feeds worldwide. The use of soybean protein has been expanded in the food industry due to their excellent nutritional benefits. But, antinutritional and allergenic factors are present in the raw mature soybean. P34 protein, referred as Gly m Bd 30K, has been identified as a predominant immunodominant allergen. The objective of this research is to identify the genetic mode of P34 protein for the improvement of soybean cultivar with a very low level of P34 protein. Two $F_2$ populations were developed from the cross of "Pungsannamulkong" ${\times}$ PI567476 and "Gaechuck2ho" ${\times}$ PI567476 (very low level of P34 protein). Relative amount of P34 protein was observed by Western blot analysis. The observed data for the progeny of "Pungsannamulkong" and PI567476 were 133 seeds with normal content of P34 protein and 35 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=1.157$, P=0.20-0.30). For the progeny of "Gaechuck#1" and PI567476, the observed data were 177 seeds with normal content of P34 protein and 73 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=2.353$, P=0.10-0.20). From pooled data, observed data were 310 seeds with normal content of P34 protein and 108 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=0.156$, P=0.50-0.70). The segregation ratio (3:1) and the Chi-square value obtained from the two populations suggested that P34 protein in mature soybean seed is controlled by a single major gene. Single gene inheritance of P34 protein was confirmed in 32 $F_2$ derived lines in $F_3$ seeds, which were germinated from the low level of P34 protein obtained from the cross of "Pungsannamulkong" and PI567476. These results may provide valuable information to breed for new soybean line with low level of P34 protein and identification of molecular markers linked to P34 locus.
microRNAs (miRNAs) play pivotal roles in controlling cell proliferation and differentiation. miRNA expression in human is becoming recognized as a new molecular mechanism of carcinogenesis. microRNA-34a (miR-34a), a member of the p53 network, was found to be regulated in multiple types of tumor. The purpose of this study was to define roles of miR-34a expression in cervical intraepithelial neoplasia with human papillomavirus infection, and its relationship with p53 protein expression. This study was performed to analyze expression of miR-34a by using qRT-PCR, and to evaluate p53 protein expression by using immunohistochemistry in 40 cases. Down-regulation of miR-34a expression was detected in 27 (67.5%) out of 40 cases and Immunoreactivity for p53 was found in 17 (42.5%) out of 40 cases. Nineteen (82.6%) of the 23 cases with a negative p53 expression showed a down-regulation miR-34a expression, there was a significant associations between miR-34a and p53 protein expression (P=0.04). These results suggest that miRNA-34a expression tend to be reduced depending on the advanced histologic grade, and down-regulation of miR-34a expression might be associated with inactivation of p53 protein expression by human papillomavirus infection.
인체내에서 소화불량 및 알레르기 반응을 일으킴으로써 콩의 품질을 저하시키는 물질인 Kunitz trypsin inhibitor(KTI) 단백질이 결핍되고, P34 단백질을 적게 함유하는 콩 계통을 선발하기 위해서, 현재까지 보고되지 않은 KTI 단백질의 유무와 P34 단백질 함량간의 유전관계에 대한 정보를 얻기 위하여 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. 07B1과 PI567476의 교배를 통해 얻어진 479개의 $F_2$ 종자를 대상으로 SDS-PAGE를 이용한 KTI 단백질의 유무를 확인한 결과, KTI 단백질이 존재하는 종자의 수는 353개, 결핍된 종자는 126개로 3 : 1로 분리하였다. 2 Western blot을 이용한 P34 단백질의 함량을 확인 한 결과, P34 단백질 함량이 보통 또는 높은 종자가 363개, 함량이 낮은 종자는 116개로 P34 단백질 함량에 대한 유전분리비는 3 : 1로 나타났다. 3. 전체 $F_2$ 종자 479개 중에서 KTI 단백질이 존재하며, P34 단백질 함량이 보통 또는 높은 종자가 266개, KTI 단백질이 존재하고 P34 단백질 함량이 낮은 종자가 88개, KTI 단백질이 결핍이고 P34 단백질함량이 보통 또는 높은 종자가 102개, KTI 단백질이 결핍이며 P34 단백질 함량이 적은 종자가 23개로 9:3:3:1의 분리비에 적합하여 KTI 단백질 유무와 P34 단백질 함량간에는 독립유전을 하였다.
콩 알레르기에 민감한 사람들은 15가지가 넘는 콩 알레르기 단백질을 인지한다. 이러한 알레르기 단백질 때문에 콩의 광범위한 사용이 제한적이다. 시스테인 프로테아제에 속하는 P34 단백질은 콩의 주된 알러젠이다. 미국 국무부에서 16,226개의 유전자원에서 P34 단백질이 결핍된 PI567476 유전자원을 찾아냈다. P34 유전자 염기서열과 P34 유전자가 결실된 염기서열을 NCBI 데이터베이스에서 확인한 결과 P34 유전자가 결실된 염기서열에서 4 bp 가 삽입되었다는 것을 확인하였고, 그 부위에서 SSLP 마커를 개발하였다. 본 연구에서는 태광콩과 PI567476을 이용한 교배조합 $F_2$ 339개체를 개발한 분자표지마커로 확인하였다. 실험결과 태광콩 유형과 heterozygous 유형 및 PI567476 유형의 분리비는 85: 187: 67로 $X^2{_{0.05}}=5.99$, df=2에서 1:2:1의 분리비로 하나의 유전자가 관여한다는 것으로 나타났다. 앞으로 P34 단백질 관련 분자마커가 단백질 수준에서 정확히 일치하는지 확인 할 것이다.
검정종피와 녹색자엽을 가진 콩 품종이나 유전자원은 눈의 피로 등 시신경 보호와 눈 질환 예방에 도움을 줄 수 있는 루테인 성분과 인체 내 활성산소 제거, 콜레스테롤 저하, 항산화 및 항암 작용, 면역증강, 노화 방지 등의 작용을 하는 안토시아닌 성분을 풍부하게 함유하고 있다. 그러나, 성숙 종자에는 알러지 유발 및 품질을 저하시키는 P34, 7S α' subunit 및 렉틴 단백질도 포함되어 있다. 따라서, 본 연구는 P34, 7S α' subunit 및 렉틴의 3가지 단백질이 부재하면서 검정종피와 녹색자엽을 가진 콩 계통을 개발하기 위하여 진행되었다. 갈색종피와 녹색자엽을 가지면서 7S α' subunit 및 렉틴 단백질이 부재한 모본과 검정종피와 녹색자엽을 가지면서 P34 및 렉틴 단백질이 부재한 부본과의 교배로 검정종피와 녹색자엽을 가진 157개의 F2 종자가 선발되었다. P34 및 7S α' subunit 단백질의 존재와 부재는 각각 3:1로 관찰되었고, 두 단백질 간에는 9:3:3:1의 분리비와 일치하여 서로 독립적임을 나타내었다. 두 단백질에 대하여 모두 열성(cgy1cgy1p34p34)을 보인 14개의 F2 종자로부터 형질이 양호하면서 P34, 7S α' subunit 및 렉틴 단백질이 모두 없고 검정종피와 녹색자엽을 가진 한 개의 개체가 선발되었다. 선발 개체의 F3 종자를 이용하여 3가지 단백질의 부재에 대한 유전적 고정이 확인되었다. 온실에서 6월 14일 파종 시 선발 개체의 성숙일은 10월 3일, 경장은 약 68 cm였고 백립중은 26.5 g 정도였다. 선발 개체는 항영양성분이 부재하면서 녹색자엽을 가진 유색콩 품종 육성을 위한 모본으로 이용될 수 있을 것으로 보인다.
Paratuberculosis (Johne's disease), a chronic enteritis produced by Mycobacterium paratuberculosis, affects a large proportion of ruminants in all continents and causes important economic losses. The identification of well-characterized and species-specific components of M paratuberculosis would provide the means to improve the specificity and sensitivity of immunodiagnostic assays for Johne's disease. The aims of this study were to express the recombinant C-terminal of 34kDa protein (rC34P) of M paratuberculosis in E coli and to investigate the effectiveness of this protein in detecting antibodies to the native protein in sera from paratuberculosis infected cattle. The C-terminal of the gene encoding the 34kDa protein was amplified by polymerase chain reaction from the chromosomal DNA of M paratuberculosis (ATCC 19698) and cloned into vector pGEX-4T-2. Then, cloned plasmid was transformed into E coli DH5${\alpha}$ and the rC34P was overexpressed. The rC34P was purified by affinity chromatography and gel filtration. The rC34P was examined antigenicity by Western blot. The rC34P was reactive with culture positive bovine serum and hyperimmune rabbit anti-M paratuberculosis serum but was not reactive with culture negative bovine serum and tuberculin positive bovine serum in Western blot. In conclusion, the rC34P produced in this study is expected as a useful candidate for antigen in serological diagnosis of Johne's disease.
Serum from mouse orally ingested with tissue cyst forming stain (Me49) of Toxoplasma gondii was assayed by Western blot and immunofluorescene assay (IFA) to establish early responses in antigenicity of the parasite in mouse model of foodborne toxoplasmosis. Sera were collected weekly to blot the RH antigen transferred onto nitrocellulose paper after being separated by 12% SDS-PAGE. With the second week serum, 34 kDa protein (p34) was detected uniquely, and all antigens of T.gondii were detected with the sera from 3 or 4 weeks. p34 was not a member of the major surface membrane proteins and confirmed to be localized in the rhoptry by IFA. It was secreted into parasitophorous vacuolar membrane (PVM) during the entry into host cells. 10.3% of sera detected p34, while all the ELISA positive sera detected the band. It has diagnostic usefulness of presumed T.gondii infection. We suggest the name of the p34 protein as ROP9.
5'-XMP를 5'-GMP로 전환하는 효소인 XMP aminase[EC 6.3.4.1]의 활성을 증가시키기 위하여 XMP aminase의 유전자를 함유한 1.7kb gua A gene fragment를 pLC 34-10으로부터 분리하여 pBR 322에 subcloning 한 뒤 trp promoter를 가지고 있는 대장균 발현 벨터 pDR 720에 도입하였다. 재조합된 pXAR 64에 존재하는 gua A 유전자는 trp Promoter에 의하여 발현이 증대되었으며 $3-{\beta}-indoleacrylic$ acid에 의하여 XMP aminase의 생성이 유도되었다. XMP aminase의 비활성은 pLC 34-10을 함유한 균주에 비하여 약 17배 증가되었다.
Kang Song;Jeong Hyeon Lim;Young Chan Yoon;Chu Sik Park;Young Ho Kim
공업화학
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제34권5호
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pp.548-555
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2023
SAPO-34 catalysts were modified with polyethylene glycol (PEG) and Pb to improve their catalytic lifetime and selectivity for light olefins in the conversion of dimethyl ether to olefins (DTO). Hierarchical SAPO-34 catalysts and PbAPSO-34 catalysts were synthesized according to changes in the molecular weight of PEG (M.W. = 1000, 2000, 4000) and the molar ratio of Pb/Al (Pb/Al = 0.0015, 0.0025, 0.0035), respectively. By introducing PEG into the SAPO-34 catalyst crystals, an enhanced volume of mesopores and reduced acidity were observed, resulting in improved catalytic performance. Pb was successfully substituted into the SAPO-34 catalyst frameworks, and an increased BET surface area and concentration of acid sites in the PbAPSO-34 catalysts were observed. In particular, the concentrations of the weak acid sites, which induce a mild reaction, were increased compared with the concentrations of strong acid sites. Then, the P2000-Pb(25)APSO-34 catalyst was prepared by simultaneously utilizing the synthesis conditions for the P2000 SAPO-34 and Pb(25)APSO-34 catalysts. The P2000-Pb(25)APSO-34 catalyst showed the best catalytic lifetime (183 min based on DME conversion > 90%), with an approximately 62% improvement compared to that of the unmodified catalyst (113 min).
Yao, Zhuang;Liu, Xiaoming;Shim, Jae Min;Lee, Kang Wook;Kim, Hyun-Jin;Kim, Jeong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권1호
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pp.9-18
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2017
Nine bacilli with fibrinolytic activities were isolated from doenjang, a traditional Korean fermented soy food. Among them, RSB34 showed the strongest activity and was identified as Bacillus amyloliquefaciens by 16S rRNA and recA gene sequencing. During growth on LB up to 96 h, RSB34 showed the highest fibrinolytic activity ($83.23mU/{\mu}l$) at 48 h. Three bands of 23, 27, and 42 kDa in size were observed when the culture supernatant was analyzed by SDS-PAGE and 27 and 42 kDa bands by fibrin zymography. The gene encoding the 27 kDa fibrinolytic enzyme AprE34 was cloned by PCR. BLAST analyses confirmed that the gene was a homolog to genes encoding AprE-type proteases. aprE34 was overexpressed in Escherichia coli BL21(DE3) using pET26b(+). Recombinant AprE34 was purified and examined for its properties. The $K_m$ and $V_{max}$ values of recombinant AprE34 were $0.131{\pm}0.026mM$ and $16.551{\pm}0.316{\mu}M/l/min$, respectively, when measured using an artificial substrate, N-succinyl-ala-ala-pro-phe-p-nitroanilide. aprE34 was overexpressed in B. subtilis WB600 using pHY300PLK. B. subtilis transformants harboring pHYRSB34 (pHY300PLK with aprE34) showed higher fibrinolytic activity than B. amyloliquefaciens RSB34.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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