• 제목/요약/키워드: p-NPP

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Effect of brazilin on phosphatase activity in isolated rat epididymal adipocytes

  • Lee, Yong-Khil;So, Dhong-Soo;Moon, Chang-Kiu
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1996년도 춘계학술대회
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    • pp.218-218
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    • 1996
  • Brazilin은 포도당 수송을 증가시키는 물질로 autooxidation에 의하여 산화되면서 hydrogen peroxide를 생성할 것으로 추정되었으며, hydrogen peroxide는 phosphatase를 억제하여 포도당 수송을 증가시키는 것으로 보고되었다. 따라서 본 실험에서 brazilin의 산화에 의한 hydrogen peroxide의 생성여부를 확인하고 phosphatase 활성에 미치는 braziline의 작용을 살펴보았다. 먼저 UV absorption spectra를 이용하여 brazilin이 반응액중에서 구조적인 변화를 일으키는지 확인하였다. Hydrogen peroxide의 생성은 rhodamine 123를 이용한 형광측정법으로 측정하였으며, phosphatase의 활성은 pH에 따른 phosphatase의 활성을 p-NPP의 탈인산화의 UV 흡광도 변화로 측정하였다. PP2A의 활성은 phosphorylase a를 기질로 하여 측정하였다.

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국립생태원 캠퍼스 내 주요 식생의 탄소수지 (Carbon Budget in Campus of the National Institute of Ecology)

  • 김경순;임윤경;안지홍;이재석;이창석
    • 생태와환경
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    • 제47권3호
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    • pp.167-175
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    • 2014
  • 본 연구는 국립생태원 캠퍼스의 탄소수지를 정량화하기 위하여 수행하였다. 현장조사는 국립생태원 캠퍼스의 기존 식생 중 침엽수림과 활엽수림에서 가장 넓은 면적을 차지하고 있는 곰솔군락과 밤나무군락을 대상으로 수행하였다. 순생산량(NPP)은 상대생장법을 적용하여 측정하였고, 토양호흡량은 EGM-4를 적용하여 측정하였다. 곰솔군락과 밤나무군락의 순생산량은 각각 $4.9ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$$5.3ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$으로 나타났고, 종속영양생물 호흡량은 각각 $2.4ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$$3.5ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$으로 나타났다. 순생산량과 종속영양생물 호흡량을 차감 계산하여 얻은 순생태계생산량(NEP)은 곰솔군락과 밤나무군락에서 각각 $2.5ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$$1.8ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$로 나타났다. 본 연구로부터 얻은 곰솔군락과 밤나무군락의 생태계순생산량 지수를 기존 식생에 적용하고 다른 연구로부터 얻은 여러 식생유형의 생태계순생산량 지수를 도입 식생에 대입하여 평가된 국립생태원에 성립된 전 식생의 탄소흡수능은 $147.6ton\;C\;ha^{-1}yr^{-1}$로 나타났고, 이를 이산화탄소로 환산하면 $541.2ton\;CO_2ha^{-1}yr^{-1}$이었다. 이러한 탄소흡수능은 에코리움으로 알려진 유리온실을 비롯하여 국립생태원 내 여러 시설을 운용하며 배출하는 탄소량의 62%에 해당한다. 이러한 탄소상쇄능은 대한민국 국토 전체 및 전형적인 농촌지역인 서천군의 탄소상쇄능의 약 5배에 해당한다. 현재 진행 중인 기후변화가 지구적 차원의 탄소수지 불균형에 기원했음을 고려하면, 본 연구에서 시도한 토지이용 유형을 반영한 공간차원의 탄소수지 평가는 기후변화 문제를 근본적으로 해결하기 위해 요구되는 기초정보를 제공할 수 있을 것으로 판단된다.

Screening of Exiguobacterium acetylicum from Soil Samples Showing Enantioselective and Alkalotolerant Esterase Activity

  • Hwang Bum-Yeol;Kim Ji-Hyun;Kim Juhan;Kim Byung-Gee
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제10권4호
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    • pp.367-371
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    • 2005
  • About 3,000 bacterial colonies with esterase activities were isolated from soil samples by enrichment culture and halo-size on Luria broth-tributyrin (LT) plates. The colonies were assayed for esterase activity in microtiter plates using enantiomerically pure (R)- and (S)-2-phenylbutyric acid resorufin ester (2PB-O-res) as substrates. Two enantioselective strains (JH2 and JH13) were selected by the ratio of initial rate of hydrolysis of enantiomerically pure (R)- and (S)-2-PB-O-res. When cell pellets were used, both strains showed high apparent enantioselectivity ($E_{app}>100$) for (R)-2PB-O-res and were identified as Exiguobacterium acetylicum. The JH13 strain showed high esterase activity on p-nitrophenyl acetate (pNPA), but showed low lipase activity on p-nitrophenyl palmitate (pNPP). The esterase was located in the soluble fraction of the cell extract. The crude intracellular enzyme preparation was stable at a pH range from 6.0 to 11.0.

Bacterial 및 Fungal Phytase의 단일 및 혼합 급여가 산란계의 생산성과 영양소 이용에 미치는 영향 (Effects of Single or Mixed Supplementation of Bacterial Phytase and Fungal Phytase on Laying Performance and Nutrient Digestibility)

  • 강환구;박수영;유동조;김지혁;강근호;나재천;김동욱;서옥석;이상진;이원준;김상호
    • 한국가금학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.137-142
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    • 2008
  • 본 시험에서는 bacteria 또는 fungi로부터 유래된 phytase를 단일 및 혼합으로 45주령 Hy-Line Brown 산란계 450수에 12주 동안 급여하였다. 공시계는 시험개시 전 일주일 동안 산란조사를 하여 처리간에 비슷한 산란율이 되도록 하였다. 대조구(Control)사료는 nonphytate phosphorus 함량이 0.3% 되게 하였으며, 처리구는 bacterial phytase(BP)와 fungal phytase (FP) 2종류를 각각 T1(300 DPU, 0 DPU), T2(300 DPU, 300 DPU), T3(300 DPU, 3000 DPU), T4(0 DPU, 3000 DPU)로 하여 급여하였다. 처리구들의 nonphytate phosphorus 함량은 Control의 60%로 하였다. 사료와 물은 전 기간 자유채식토록 하였고, 점등은 17L7D로 하였다. 산란율은 T4가 Control에 비해 유의하게 낮았으며(P<0.05), 두 종류 phytase의 동시 급여 효과는 없었다. 평균 난중과 1일 산란량은 처리구간에 통계적인 차이는 없었으나, 후자의 경우 시험 후반기에 T4에서 Control에 비해 유의하게 낮았다(P<0.05). 사료 섭취량, 사료요구율, 계란의 품질은 처리구간에 차이가 없었다. 건물, 조단백질 및 지방 소화율은 처리구간 유사하였으며, 무기물, 칼슘 및 인 이용율은 뚜렷한 경향이 없었다. 본 실험 결과에서 산란계 사료에 BP 300 DPU 수준일 때 NPP 첨가량을 NRC (1994) 권장량 대비 약 40%가 저감되었으며, 인 이용율 역시 개선되었으나 FP와의 혼합 급여로 인한 개선 효과는 나타나지 않았다.

Impact-resistant design of RC slabs in nuclear power plant buildings

  • Li, Z.C.;Jia, P.C.;Jia, J.Y.;Wu, H.;Ma, L.L.
    • Nuclear Engineering and Technology
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    • 제54권10호
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    • pp.3745-3765
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    • 2022
  • The concrete structures related to nuclear safety are threatened by accidental impact loadings, mainly including the low-velocity drop-weight impact (e.g., spent fuel cask and assembly, etc. with the velocity less than 20 m/s) and high-speed projectile impact (e.g., steel pipe, valve, turbine bucket, etc. with the velocity higher than 20 m/s), while the existing studies are still limited in the impact resistant design of nuclear power plant (NPP), especially the primary RC slab. This paper aims to propose the numerical simulation and theoretical approaches to assist the impact-resistant design of RC slab in NPP. Firstly, the continuous surface cap (CSC) model parameters for concrete with the compressive strength of 20-70 MPa are fully calibrated and verified, and the refined numerical simulation approach is proposed. Secondly, the two-degree freedom (TDOF) model with considering the mutual effect of flexural and shear resistance of RC slab are developed. Furthermore, based on the low-velocity drop hammer tests and high-speed soft/hard projectile impact tests on RC slabs, the adopted numerical simulation and TDOF model approaches are fully validated by the flexural and punching shear damage, deflection, and impact force time-histories of RC slabs. Finally, as for the two low-velocity impact scenarios, the design procedure of RC slab based on TDOF model is validated and recommended. Meanwhile, as for the four actual high-speed impact scenarios, the impact-resistant design specification in Chinese code NB/T 20012-2019 is evaluated, the over conservation of which is found, and the proposed numerical approach is recommended. The present work could beneficially guide the impact-resistant design and safety assessment of NPPs against the accidental impact loadings.

Pichia pastoris와 Escherichia coli를 이용한 Candida antarctica Lipase A의 기능적 발현 (Functional Expression of Candida antarctica Lipase A in Pichia a pastoris and Escherichia coli)

  • 박혜정;김용환
    • KSBB Journal
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    • 제24권4호
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    • pp.341-346
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    • 2009
  • 본 연구에서는 Candida antarctica로부터 genomic DNA을 추출하여 lipase A(CalA) 유전자를 PCR 증폭하였고, 재조합 pColdIII/CalA, $pPICZ{\alpha}A$/CalA, $pPICZ{\alpha}A$/CalA$his{\times}6$을 구축하였다. 재조합 CalA 유전자의 기능적 발현을 위해 최적화된 시스템을 구축하고자 Escherichia coli와 Pichia pastoris 시스템에서 각각 수행하여 비교, 분석하였다. SDS PAGE gel을 통해 CalA의 발현의 여부 및 발현양을 확인하였고, pNPP를 기질로 한 가수분해 반응을 통해 활성을 측정하였다. E. coli 발현 시스템은 형질전환 방법이 간단하고, 미생물의 성장 속도가 빠르다는 장점을 갖지만 CalA의 활성이 0.02 Unit/ml으로 비교적 낮았으며 세포질 (cytoplasm)에서 발현되므로 비목적 단백질과의 분리 및 정제과정이 필요하다. 재조합 $pPICZ{\alpha}A$/CalA을 P. pastoris 시스템에서 발현한 경우 높은 발현양 뿐만 아니라 분비작용으로 인해 고순도 발현이 용이하였고, 활성 또한 약 0.7 Unit/ml으로 가장 높았다. 결론적으로 CalA의 기능적 발현을 위해 P. pastoris 시스템을 구축하는 것이 가장 적합함을 확인하였다.

Purification and Characterization of a Thermostable Alkaline Phosphatase Produced by Thermus caldophilus GK24

  • Kim, You-Jin;Park, Tae-Shin;Kim, Hyun-Kyu;Kwon, Suk-Tae
    • BMB Reports
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    • 제30권4호
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    • pp.262-268
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    • 1997
  • The thermophilic and thermostable alkaline phosphatase was purified to near homogeneity from the osmotic lysis of Thermus caldophilus GK24, The purified enzyme had an apparent molecular mass of 108, 000 Da and consisted of two subunits of 54,000 Da. lsoelectric-focusing analysis of the purified enzyme showed a pi of 7.3. The enzyme contained two Cys residues, and its amino acids composition was quite different from that of Thermus aquaticus YT-1 alkaline phosphatase and Escherichia coli alkaline phosphatase, The optimum pH and temperature of the enzyme were 11.0-11.5 and $80^{\circ}C$ respectively. The enzyme was stable in the pH range of 9.0-12.0 at $25^{\circ}C$ for 36 h. and the half-life at $80^{\circ}C$ (pH 11.0) was 6 h. The enzyme was activated by $MgCl_2$ and inhibited by EDTA. With ${\rho}-nitrophenyl\;phosphate\;({\rho}NPP)$ as the substrate, the enzyme had a Michaelis constant $(K_m) $of $3.6{\times}10^{-5}M$, The enzyme preferentially hydrolyzed the phosphomonoester bond of AMP in ribonucleotides and glycerophosphate.

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중대사고관리를 위한 훈련도구(TRAIN)의 개발 (Development of TRAIN for Accident Management)

  • Moo-Sung Jae
    • 한국안전학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.84-87
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    • 2001
  • 중대사고관리는 원전의 노심손상사고를 예방하거나 완화시키기 위하여 기존의 가용자원이나 시스템, 운전의 행위를 사용하는 것을 말한다. 제어실이나 기술지원반을 위하여 중대사고관리를 위하여 개발된 TRAIN(Training pRogram for Accident Management Program In Nuclear Power Plant)의 초기문자로 명명된 시스템을 본 논문에 소개하였다. TRAIN은 중대사고현상 KB(Knowledge Base)와 사고시나리오 KB, 제어도와 함께 사고관리 절차도 그리고 필요정보로 구성되어있으며 제어실이나 기술지원반에게 중대사고의 현상지식을 취득하게 하고, 발전소의 취약특성을 파악하게 하며, 상당한 스트레스하에서 주어진 문제를 해결하게 하는데 본 연구의 결과는 기여할 것이다.

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Saccharomyces uvarum의 Alkaline 및 Acid Phosphatase의 Isoenzyme 양상에 대하여 (Isoenzyme pattern of Aldaline and Acid Phosphatase in the Culture of Saccharomyces uvarum)

  • 이기성;최영길
    • 미생물학회지
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    • 제23권3호
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    • pp.172-176
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    • 1985
  • 본 연구는 효모세포 (Saccharomyces uvarum)의 ACPase, ALPase의 Isoenzyme type을 규명함과 아울러, iso-enzyme type중 어느 것이 constituitive 또는 repressible enzyme type인가를 조사하고, 각각의 isoenzyme활성도 비율을 살펴보아 배양조건(catabolic repression and derepression) 및 무기인산 제한에 따른 각 type의 세포내 조절기능을 분석하고자 하였다. Acid phosphatase는 또 다른 isoenzyme type이 발견되지 않았으나, alkaline phosphatase의 경우는 3가지 type이 p-NPP에 specificity를 지녔다. 세포질의 수용성단백질 분석결과 exponential phase의 세포는 주로 음전하를 띤 단백질이 높은 함량을 나타내었다. 당과 인산이 결핍된 배지에서 생육권(catabolic repression)세포에서 AL P Pase isoenzyme 중 type “B"의 활성도가 매우 높아졌으나, 완전배지에서 배양된 (catabolic derepression)세포에서는 type “B"의 활성도 감소 및 type “C"의 활성도 증가 현상을 볼 수 있었다. ALPase 중 “A" peak는 constituitive enzyme, “B" peak는 repressible enzyme, peak “C"는 L-histidinol phosphatase로 추정되었다.

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DEPENDENCY OF SINGLE-PHASE FAC OF CARBON AND LOW-ALLOY STEELS FOR NPP SYSTEM PIPING ON PH, ORIFICE DISTANCE AND MATERIAL

  • Moon, Jeong-Ho;Chung, Hung-Ho;Sung, Ki-Woung;Kim, Uh-Chul;Rho, Jae-Seong
    • Nuclear Engineering and Technology
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    • 제37권4호
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    • pp.375-384
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    • 2005
  • To investigate the flow-accelerated corrosion (FAC) dependency of carbon steel (A106 Gr. B) and low-alloy steels (1Cr-1/2Mo, 21/4Cr-1Mo) on pH, orifice distance, and material, experiments were carried out. These experiments were performed using a flow velocity of 4 m/sec (partly 9 m/sec) at pH $8.0\~10.0$ in an oxygen-free aqueous solution re-circulated in an Erosion-Corrosion Test Loop at $130^{\circ}\;{\ldots}$ for 500 hours. The weight loss of the carbon steel specimens appeared to be positively dependent on the flow velocity. That of the carbon and low-alloy steel specimens also showed to be distinguishably dependent on the pH. At pH levels of $8.0\~9.5$ it decreased, but increased from 9.5 to 10.0. Utility water chemistry personnel should carefully consider this kind of pH dependency to control the water system pH to mitigate FAC of the piping system material. The weight loss of the specimens located further from the orifice in the distance range of $6.8\~27.2$ mm was shown to be greater, except for 21/4Cr-1Mo, which showed no orifice distance dependency. Low alloy steel specimens exhibited a factor of two times better resistance to FAC than that of the carbon steel. Based on this kind of FAC dependency of the carbon and low-alloy steels on the orifice distance and material, we conclude that it is necessary to alternate the composition of the secondary piping system material of NPPs, using low-alloy steels, such as 21/4Cr-1Mo, particularly when the system piping has to be replaced.