The "crescent-egg" a new spontaneous mutant was detected in a white egg strain k37. Studies were carried out the linkage analysis, to investigate phenotypic characteristics and biochemical analysis of haemolymph and ovarian protein. The mutant, ore was independent from 20 linkage groups P(2), Ze(3),L(4), oc(5), sn8), Ia(9), w-1(10), K(11), ch(13), U(14), bl(15), cts(16), bts(17), mln(18), nb(19), oh(20),Lan(21), or(22), tub(23) and Xan(27). The fertilization, hatchability and larval growth were not different from the those of normal eggs. The content and composition of yolk protein were similared to normal eggs. Scanning electron microscopy revealed the areal specific structure in dorsal region of egg-shell of cre mutant. Analysis of chorion protein by isoelectrofocusing(IEF), was resolved no difference in the composite of the chorion protein. We conclude that the egg mutant ere is expressed only in the egg-shape formation and region specific determination.
Slime flounder, Microstomus achne is distributed in the coastal waters of Korea, west sea of Japan, BoHai, Yellow sea and East china sea. They are mainly caught by bottom trawl net during winter, from December to March. Sexual maturation of slime flounder were investigated using samples collected from commercial catch in the southern coast of Korea from November, 2006 to March, 2007. The ovary of the slime flounder is a conical bag in shape and is bilateral structure develops lengthily from the posterior of the abdomen to the end of the anal fin. The testis also is bilateral in structure, usually located in small size in the abdomen. In females, the gonadosomatic index (GSI) were peaked in January (12.46), then decreased rapidly thereafter. Female GSI values plummeted to 2.72 in March just after spawning. Male GSI values were peaked in December (2.46) before in the spawning season, then decreased slowly thereafter. The reproductive cycle would be classified into three successive developmental stages : maturation stage (November to January), ripe and spawning stage (December to February), degenerative and resting stage (February to March). Relationships between the fish sizes in total length (TL) and the number of ovarian eggs (F), the body weights (BW) and the number of ovarian eggs were indicated by the exponential equation respectively: F=29.027TL-767.8 (r$^2$=0.7686), F=0.3998BW+24.288 (r$^2$=0.8919).
We have investigated the effect of melatonin (MLT) on specific growth rate (SGR% $day^{-1}$), condition factor (k), gonado-somatic-index (GSI), histological structures of gonads, serum as well as gonadal protein and lipid in Nile tilapia Oreochromis niloticus. MLT treatment in the dose of 25 ${\mu}g/L$ for three weeks reduced SGR% $day^{-1}$ ($0.9{\pm}0.04$) as compared to control ($1.23{\pm}0.026$). The GSI value was significantly (p<0.05) reduced to $1.77{\pm}0.253$ from control where it was $2.56{\pm}0.25$. Serum protein level increased from $9.33{\pm}2.90$ mg/ml (control) to $11.67{\pm}1.45$ mg/ml after MLT treatment while there was depressed serum triglycerides ($86.16{\pm}1.078$ mg/dl) and cholesterol ($126.66{\pm}0.88$ mg/dl) as compared to control values where these were $123.0{\pm}1.23$ mg/dl and $132.0{\pm}1.65$ mg/dl respectively. Histological structure of ovary showed small eggs of early perinucleolus stage after MLT treatment while testicular structure of control and MLT treated fish was more or less similar. It is concluded that exogenous melatonin suppressed SGR% $day^{-1}$, GSI, ovarian cellular activity, protein and lipid biosynthesis, in tilapia suggesting that melatonin is useful in manipulating the gonadal maturity in fishes.
The structure of gonads, gametogenesis and reproductive cycle of the cockle, Fulvia mutice, were studied mainly by histological observation. The materials were monthly sampled in the southern area of Yeosu from October 1980 to September 1981. F. mutica was monoecious. The gonads were situated between the liver tissues and the outer fibronuscular layers compacted by the connective tissue fibers and muscle fibers beneath the outermost layer of simple cuboidal epithelium. The gonad was composed of a number of the ovarian sacs and the testicular tubules which form the tubular structure. Testicular tubules in the mature stage sometimes contained 'testis-ova' The undifferentiated mesenchymal tissues and the eosinophilic cells were abundantly distributed on the germinal epithelium in the early development stage. With the further development of the ovary and testis, these tissues and cells gradually disapprared. The undifferentiated mesenchymal tissues and the eosinophilic cells are related to the growing of the oocytes and spermatocytes . Early multiplicating oogonium was about $10{\mu}m$ in diameter. As the oocytes grow to $27-34\times50-58{\mu}m$ by increasing cytoplasm, the oocytes connected to the basement membrane by their egg-stalks. The ripe eggs were about $60{\mu}m$ in diameter and they were surrounded by gelatinous membrane. Most male germ cells in mature stage were transformed into the spermatozoa and they formed the sperm bundles. After spawning, undischarged ripe eggs and spermatozoa remained in the ovarian sac and the testicular tubule respectively for some time, then they finally degenerated. Especially the early spent ovarian sacs in May did not contract significantly and then they took part in the secondary maturation within two or three months during the summer season. The monthly changes of the fatness well agreed with the reproductive cycle. The reproductive cycle of F. mutica could be classified into six successive stages : multiplicative, growing, mature, spent, degenerative and recovery stage. It seems that the spawning season is closely rotated to the water temperature, and the spawning occurs from May to October at about $20^{\circ}C$ in water temperature. The peak spawning seasons appeared twice a year between June and July and in September. Acknowledgement The authors wish to express their gratitude to Dr. Kim, In Bae, Dr. Chun, Seh Kyu and Dr. Yoo, Sung Kyoo of National Fisheries University of Busan and Mr. Min, Byoung Seo of National fisheries Research and Development Agency for their critical reading of the manu script.
Rana ovarian follicles consist of oocyte, vitelline envelope, granulosa cells, and theca/epithelial layer. Using scanning electron microscopy, the surface structure of each follicular component was investigated. Changes in oocyte surface during oocyte maturation were also examined. Theca/epithelial layer was almost transparent and some blood vessels and granulosa cells were observed underneath in intact follicle. The number of granulosa cells was estimated to be 6700-7200 per oocyte. The granulosa cells partially overlapped each other and their microvilli penetrated the vitelline membrane via holes present in the vitelline envelope and seemed to be linked to oocyte microvilli. After removal of the vitelline envelope by microforcep, oocyte microvilli were observed on the surface of the devitellined oocyte. The oocyte microvilli formed partial clusters on the surface of white spot area which appears iust before germinal vesicle breakdown (GVBD), whereas they were evenly distributed in other areas. The microvilli became shorter and less dense with oocyte maturation. The lengths of oocyte microvilli in the immature and mature oocyte were 1.5 $\mu$m and 0.6 $\mu$m, respectively. The present study suggests a fundamental structural change occurring on the oocyte surface during maturation.
Cobitis sinensis-longicorpus complex considered as hybrid origin between C. sinensis and C. longicorpus coccurred ommonly in the upper streams of the Nakdong River, Korea. Histological examinations of their gonad were accompanied with 272 individuals of C. sinensis-longicorpus complex collected. Most of fishes collected were females, however, only 6 individuals were found males. The ovarian tissues of females are completely fertile undergoing normal oogenensis. In the male gonads, testicular lobule structure with abnormal vacuolar tissues were observed. Spermatogonia and spermatocytes were also observed of their testis however spermatids or sperms were not shown in their developmental stages. From these facts, we infer that female population of C. sinensis-longicorpus complex may be unique reproductive hierarchy accomplishing their reproduction with participation of males of their closely related bisexual species.
Early gonadal development and sexual differentiation of dark-banded rockfish (Sebastes inermis Cuvier) were followed from parturition to 400 days post parturition (dpp). During this period, average total length (TL) increased from 0.57 to 13.18 cm. Primordial germ cells (PGCs) were first detected at 0.68 cm TL (10 dpp). When fish reached 1.52 cm TL (50 dpp), initial stages of ovarian differentiation were identified by the presence of PGCs containing condensed chromatin and their transformation into meiotic oocytes. At 10.23 cm TL (300 dpp), the ovaries gradually developed into oocytes in the primary yolk stages. Ovary growth was rapid after sex differentiation, but testis tissue continued to multiply without growing until fish reached 6.97 cm TL (200 dpp), after which the production of spermatocytes, spermatogonia, and cyst cells was apparent. Histological analysis of gonadal structure suggested a gonochoristic sexual development pathway. Our analysis of the sex ratio at 400 dpp showed a significantly higher proportion of males.
It is essential to clone the peptide transporter in order to obtain better understanding of its molecular structure, regulation, and substrate specificity. Characteristics of an endogenous peptide transporter in oocytes were studied along with expression of an exogenous proton/peptide cotransporter from rabbit intestine. And further efforts toward cloning the transporter were performed. The presence of an endogenous peptide transporter was detected in Xenopus laevis oocytes by measuring the uptake of $0.25\;{\mu}M\;(10\;{\mu}Ci/ml)\;[^3H]-glycylsarcosine$ (Gly-Sar) at pH 5.5 with or without inhibitors. Uptake of Gly-Sar in oocytes was significantly inhibited by 25 mM Ala-Ala, Gly-Gly, and Gly-Sar (p<0.05), but not by 2.5 mM of Glu-Glu, Ala-Ala, Gly-Gly, Gly-Sar and 25 mM glycine and sarcosine. This result suggests that a selective transporter is involved in the endogenous uptake of dipeptides. Collagenase treatment of oocytes used to strip oocytes from ovarian follicles did not affect the Gly-Sar uptake. Changing pH from 5.5 to 7.5 did not affect the Gly-Sar uptake significantly, suggesting no dependence of the endogenous transporter on a transmembrane proton gradient. An exogenous $H^+/peptide$ cotransporter was expressed after microinjection of polyadenylated messenger ribonucleic acid $[poly\;(A)^+-mRNA]$ obtained from rabbit small intestine. The Gly-Sar uptake in mRNA-injected oocytes was 9 times higher than that in water-injected oocytes. Thus, frog oocytes can be utilized for expression cloning of the genes encoding intestinal $H^+/peptide$ cotransporters. Using the technique size fractionation of mRNA was sucessfully obtained.
Kwak, Son-Hyok;Bang, Seong-Cheol;Seo, Hyun-Hee;Shin, Hye-Rim;Lee, Ki-Cheul;Hoang, Le Tuan Anh;Jung, Sang-Hun
Archives of Pharmacal Research
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v.29
no.9
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pp.721-727
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2006
To continue exploration of structure activity relationship of novel 1-(indoline-5-sulfonyl)-4-phenylimidazolidinones (1) reported as anticancer agent with broad spectrum, three 1-(arylsulfonyl)-4-vinylimidazolidinones (2) were synthesized from methyl serinate (3) in 8 steps. Reaction of intermediate 2-phenoxycarbonylaminobut-3-enyl p-toluenesulfonate (10) with arylsulfonamide in the presence of potassium carbonate produced corresponding 2 and N-(4-vinyloxazolidin-2-yl)arylsulfonamide 11 in approximately equal ratio. This reaction is believed to undergo through urea intermediate 16 as shown in scheme 3. 1-Arylsufonyl-4-vinylimidazolidinones 2 show much reduced activity against human colon carcinoma (Colo205), human chronic myelogenous leukemia (K562), and human ovarian adenocarcinoma (SK-OV-3) and compatible activity against human lung carcinoma (A549) compared to 1. Therefore phenyl at 4-position should be the optimum planar motif for the activity of 1.
Ultrastructure of germ cell during gametogenesis of surf clam, Spisula sachalinensis were investigated by electron microscopic observations. Oogonia are oval in shape and 5-6 ${\mu}m$ in diameter. They contain a large nucleus and have several mitochondria in the cytoplasm. Vitellogenic oocytes grew attached by a stalk to the germinal epithelium in the ovarian sac and their cytoplasm contained many yolk granules, lipid granules and mitochondria. Mature oocytes measuring 50-60 ${\mu}m$ in diameter have a nucleus containing an electron dense nucleolus, and a lots of yolk granules, lipid granules, mitochondria, rough endoplasmic reticulum and cortical granules were present in the cytoplasm. The surface of the plasma membrane in mature oocytes was formed of microvilli approximately 1.5 ${\mu}m$ long and enveloped in the vitelline layer. Spematogonia are oval in shape and about 5 ${\mu}m$ in diameter. Sprmatogonia develop into spermatocyte, spermatid and spermatozoon. The spermatozoon consisted of the head, midpiece and tail. The sperm head with diameter of about 1.5 ${\mu}m$ was ovoid, and contained the nucleus which consisted of acrosome. The four mitochondria encircled the centrosome in midpiece. The flagellum measuring about 40 ${\mu}m$ long had the classical 9+2 axoneme structure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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