Objective: This study evaluated the effects of nitric oxide (NO) on the proliferation and differentiation of human periodontal ligament cells involved in orthodontic tooth movement. Methods: A range of concentrations of sodium nitroprusside (SNP), a NO donor, were administered to samples of human periodontal ligament cells, followed by measurement of cell viability, alkaline phosphatase (ALP) activity, and expression of osteonectin and bone sialoprotein. Results: Cell viability, ALP activity and the expression of osteonectin and bone sialoprotein were increased in human periodontal ligament cells treated with SNP concentrations of < 0.2 mM compared with controls, but were decreased with SNP concentrations of > 1.0 mM. Conclusion: NO has a biphasic effect on proliferation and differentiation in human periodontal ligament cells, with a stimulatory effect at low concentrations and an inhibitory effect at high concentrations.
Park, Seong-Jin;Kim, Uk-Kyu;Chung, In-Kyo;Hwang, Dae-Seok;Kim, Yong-Deok;Shin, Sang-Hun;Kim, Cheol-Hoon;Byun, June-Ho
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.33
no.4
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pp.288-296
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2007
Distraction osteogenesis(DO) is a technique of lengthning bone including soft tissue by gradual separation of surgically divided bone surfaces. Distraction osteogenesis combination with a compression stimulation(DO-CO) was a new technique by authors to enhance new bone quality and to shorten the consolidation period. The purpose of this study was to compare DO with DO combined with compression force in efficiency by evaluating the expression of TGF-${\beta}1$, osteonectin and BMP-4 on bone regenerate in rabbit mandible. Fourty two rabbits were used for this experiment. On the control group, the distraction was carried out at the rate of 1 mm per day to obtain the amount of 8 mm distraction for 8 days. On the experimental group, the distraction was carried out at the rate of 1 mm per day for 10 days, 3 days-latency period, and then the compression was carried out as counter direction 1 mm per day for 2 days. After 0 day, 5 days, 13 days, 20 days, 27 days, 34 days and 41 days, three rabbits on each group were sacrificed and the distracted portion of mandible were cut and treated for RT-PCR observation. The level of expression of TGF-${\beta}1$ and osteonectin were shown more and longer expression in the experimental group than in the control group. The expression of BMP-4 was maintained with high level during the entire experimental period in both groups. These findings suggested that DO with compression stimulation could be a favorable technique for obtaining a good new bone quality.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.35
no.1
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pp.30-38
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2008
Dental pulp cells are assumed to possess the capacity to elaborate both bone and dentin matrix under the pathological conditions following tooth injury. The purpose of this study is to examine the effects of mineral trioxide aggregate (MTA) on various gene expression regarding dentinogenesis and cell viability assay in cultured primary human dental pulp cells. The author also examined the effects of this material on cellular alkaline phosphatase activity as a potential indicator of dentinogenesis. For gene expression on MTA, reverse transcriptase polymerase chain reaction was performed using primer sets of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, type I collagen, alkaline phosphatase(ALP), osteonectin, and dentin sialoprotein after 2 and 4 days. Cell viability assay showed that the proportion of MTA-treated pulp cells which had been exposed for 5 days to MTA was higher than that of the control cells. Among the genes investigated in this study, ALP and osteonectin(SPARC) were increased in MTA treated group than in control. These findings suggest that this dental pulp culture system may be useful in the future as a model for studying the mechanisms underlying dentin regeneration after the treatment with MTA. Exposure to MTA material would not induce cytotoxic response in the dental pulp cells. In addition, MTA could influence the behavior of human pulp cells by increasing the ALP activity and SPARC synthesis.
Purpose : To characterize the effects of 2-deoxy-D-glucose (2-DG) and quercetin (QCT) on gene expression of osteonectin (ON) and osteopontin (OP) in irradiated MC3T3-El cells. Materials and Methods : When MC3T3-El osteoblastic cells had reached 70-80% confluence, cultures were transferred to a differentiating medium supplemented with 5 mM 2-DG or 10 ${\mu}M$ QCT and then irradiated with 2, 4, 6, and 8 Gy. At various times after irradiation, the cells were analyzed for the expression of bone mineralization genes such as ON and OP. Results : The mRNA expression of both ON and OP was increased according to the culture time in the differentiation medium, and the increase of the genes peaked at 14 days after the differentiation induction. In the case of OP, the increase of mRNA expression was maintained to 28 days after the differentiation, while the mRNA level of ON was reduced to the basal level at the same time. Irradiation adding 2-DG showed a significant peak value in the expression pattern of ON at 4 Gy 7 days after irradiation. Irradiation adding QCT increased the mRNA expression of ON and OP in a dose-dependant manner, but irradiation adding 2-DG did not show any differences between the control and experiments 14 days after irradiation. Irradiation adding QCT increased significantly the expression patterns of ON 21 days after irradiation. Conclusion : The results showed that QCT acted as a radiosensitizer in the gene expression of ON and OP during differentiation of the late stage of irradiated MC3T3-E1 osteoblastic cells in vitro. (Korean J Oral Maxillofac Radiol 2008; 38: 195-202)
Journal of Korean Academy of Oral and Maxillofacial Radiology
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v.28
no.1
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pp.171-191
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1998
The present study was designed to elucidate the effects of the Co-60 γ irradiation and/or calcium-deficient diet on the periodontal tissue formation in rat pups. The pregnant three-week old Sprague-Dawley rats were used for the study. The experimental group was divided into two groups, irradiation/normal diet group (Group 2) and irradiation/calcium-deficient diet group (Group 3). The control group was non-irradiation/normal diet group (Group 1). The abdomen of the rats at the 19th day of pregnancy were irradiated with single absorbed dose of 350 cGy. The rat pups were sacrificed on the 14th day after delivery, and the maxillae including molar tooth germ were taken. The specimens including the 1st molar tooth germ were prepared to make tissue sections for light and transmission electron microscopy. Some of tissue sections for light microscopy were stained immunohistochemically with anti-fibronectin and anti-osteonectin antibodies. The results were as follows; 1. In the periodontal ligament forming area, the fibroblasts of Group Z showed irregular arrangement and low activity. The immunoreactivity between the fibroblasts and collagen fibers was decreased, compared with Group 1. The fibroblasts of Group 3 showed atrophic change and clumped nucleus. The collagen fibers showed cystic change and low immunoreactivity to the fibronectin. 2. In the cementum forming area, the cementoblasts of Group 2 showed decrease of number and atrophic change. The cementoblasts of Group 3 showed edematous change, atrophy of cytoplasm, and clumping of nucleus. 3. In the alveolar bone forming area, the bone of Group 2 was thin and various degree of immunoreactivity to the osteonectin. Group 3 showed edematous osteoblasts, fibrous degeneration of bone marrow, and weak immunoreactivity to the osteonectin.
Purpose: This study sought to compare the elemental constitution, morphological characteristics, particle size distribution, biocompatibility, and mineralization potential of Ortho MTA (OMTA) and ProRoot MTA (PMTA). Materials and Methods: OMTA and PMTA were compared using energy-dispersive spectrometry, particle size analysis, and scanning electron microscopy. The biocompatibility and mineralization-related gene expression (osteonectin and osteopontin) of both MTAs were also compared using methylthiazol tetrazolium assay and reverse transcription-polymerization chain reaction analysis, respectively. The results were analyzed by Kruskal-Wallis test with Bonferroni correction. P-value of <0.05 was considered significant. Result: The morphology of OMTA powders was similar to that of PMTA. The constituent elements of both MTAs were calcium, silicon, and aluminum. The mean particle sizes of OMTA and PMTA were 4.60 and 3.34 mm, respectively. Both MTAs had equally favorable in vitro biocompatibility and affected the messenger RNA expression of osteonectin and osteopontin. Conclusion: Within the limitations of this study, OMTA could be a promising biomaterial in clinical endodontics.
Periodontal ligament cells may have a role in the regulation of hard and soft periodontal tissues, but their specific function has not yet to be determined. To evaluate further their role in periodontal regeneration, they were examined for osteoblast-like behavior. Periodontal ligament cells and gingival fibroblasts were primarily cultured from extracted premolar with non-periodontal diseases. Cells were cultured with DMEM at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 100% humidity incubator, and as a measure of cell characterization, it was examined that the morphology, alkaline phosphatase activity, collagen synthesis, and immunocytochemistry for osteonectin, osteocalcin, and collagen type I. Healthy periodontal ligament cells has more osteoblastic-like cell property in alkaline phosphatase activity. and collagen synthesis than gingival fibroblast. Immunocytochemistry localization explained that calcitonin were expressed in periodontal ligament cells only, and osteonectin and type I collagen were produced in both cells simultaneously. This results indicate that the growth characteristics of periodontal ligament cells and gingival fibroblasts exhibit some differences in proliferative rates and biochemical synthesis. The differences may help to calrify the role such cells play in the regenearation of periodontal tissues.
Kang Han Seung;Lee Chae Kwan;Moon Deog Hwan;Kang Sung Goo
Development and Reproduction
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v.7
no.1
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pp.41-48
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2003
This report aimed at investigating the differential gene expressions of the adhesion receptors between ovariectomized (OVX) and estrus stage rat uteri (OVX vs. estrus pair) using the cDNA expression away analysis. In addition, this report aimed at confirming of the differential gene expressions of the adhesion receptors between OVX and progesterone (P$_4$) injected OVX rat uteri (OVX vs. OVX+P$_4$ pair). RNA samples were extracted from the uterus and reverse-transcribed in the presence of [$\alpha$$^{32}$ P]-dATP. Membrane sets of Rat Atlas array 1.2 II (Clontech) were hybridized with CDNA probe sets. RT-PCR was employed to validate the relative gene expression patterns obtained by the cDNA array. The results were well consistent to cDNA array analysis data except the fold changes of gene expression. Among a total of 1176 cDNAs, 5 genes of adhesion receotor including embigin protein, activated leukocyte cell adhesion molecule, afadin, neuroligin 2, semaphorin Z showed significant (more than 2-fold) changes in the OVX vs. late estrus pair. All of these genes were up regulated in estrus stage than OVX rat uterus. In the OVX vs. OVX+P$_4$ pair, 4 genes including osteonectin, afadin, neuroligin 2, semaphorin Z showed significant changes. All of these genes were also up regulated in OVX+P$_4$ injected rat uterus than OVX control. Three genes including afadin, neuroligin 2, semaphorin Z which were up regulated in estrus and OVX+P$_4$ injected rat uteri of both experimental pairs than OVX rat uteri. These genes seem to be under the control of P$_4$.
It is difficult to treat the endodontic apical perforation successfully. In this study, we hypothesized that the application of PDGF-BB and IGF-I into periapical perforation site may accelerate periapical healing and lead to bone deposition. And the specificity of osteonectin in periapical healing was investigated. The experiments were performed on the upper and lower 51 premolar teeth of 4 beagle dogs. The pulp chamber of each tooth was opened and the dental plaque was inserted into the canal for developing the periapical lesion for 5 weeks. Then, the roots were artificially perforated at the apex with the number 4 profile of .06 taper. In each step, standard periapical radiographs were taken to compare the size of lesion each other. The radiographs were scanned and analyzed by image analysis system. The mean and standard deviation of periradicular radiolucency ratios were calculated in each group. ANOVA was used for comparison. 51 premolars were grouped into 3 groups; control group, calcium hydroxide-treated group and calcium hydroxide plus growth factors-treated group. In the control group, the apical perforations were not sealed and obturated with gutta-percha and ZOE sealer by lateral condensation technique. In the experimental groups, the apical perforation were sealed with calcium hydroxide and with/without $4{\mu}g$ of PDGF-BB & IGF-I in cellulose gel and obturated by lateral condensation technique. Fluorescent bone markers were used to measure new bone formation. Following 2, 4, 12 weeks after experiment the dogs were sacrificed and histologic sections were prepared. Each tooth block including periapical lesion was sectioned mesiodistally. One half of the sections were decalcified with 6% nitric acid and processed by standard paraffin embedding technique. The sections were stained by hematoxylin and eosin, and immunostained for osteonectin. Histomorphometrical measurement of neoformed bone was performed using a light microscope. And the other half of the sections were prepared by undecalcified preparation, and confocal laser scanning microscopic investigations were done.
IL-1${\alpha}$ and TNF-${\alpha}$ play an important role in initiating and coordinating the cellular events that make up the immune response to infection. The purpose of this study was to examine the effects of proinflammatory cytokines on mineralization and HO-1 protein expression in the human pulp cells. Human pulp cell cultures between the fifth and sixth passage were used in this study. Alkaline phosphatase and osteonectin were selected as markers for mineralization that is, odontoblast-like differentiation.(omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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