Park, Kyou-Hwa;Koak, Jai-Young;Kim, Seong-Kyun;Heo, Seong-Joo
The Journal of Advanced Prosthodontics
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v.3
no.2
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pp.63-68
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2011
PURPOSE. The object of this study was to investigate the effect of UV irradiation (by a general commercial UV sterilizer) on anodized titanium surface. Surface characteristics and cellular responses were compared between anodized titanium discs and UV irradiated anodized titanium discs. MATERIALS AND METHODS. Titanium discs were anodized and divided into the following groups: Group 1, anodized (control), and Goup 2, anodized and UV irradiated for 24 hours. The surface characteristics including contact angle, roughness, phase of oxide layer, and chemical elemental composition were inspected. The osteoblast-like human osteogenic sarcoma (HOS) cells were cultured on control and test group discs. Initial cellular attachment, MTS-based cell proliferation assay, and ALP synthesis level were compared between the two groups for the evaluation of cellular response. RESULTS. After UV irradiation, the contact angle decreased significantly (P<.001). The surface roughness and phase of oxide layer did not show definite changes, but carbon showed a considerable decrease after UV irradiation. Initial cell attachment was increased in test group (P=.004). Cells cultured on test group samples proliferated more actively (P=.009 at day 2, 5, and 7) and the ALP synthesis also increased in cells cultured on the test group (P=.016 at day 3, P=.009 at day 7 and 14). CONCLUSION. UV irradiation induced enhanced wettability, and increased initial cellular responses of HOS cells on anodized titanium surface.
Jang, Won Seok;Kim, Min Gu;Hwang, Dae Suk;Kim, Gyoo Cheon;Kim, Uk Kyu
International Journal of Oral Biology
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v.42
no.4
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pp.203-211
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2017
The aim of this study was to evaluate the role of demineralized and particulate autogenous tooth, and interleukin-6 in bone regeneration. A demineralized and particulate autogenous tooth was prepared and human osteoblast-like cells (MG63) and human osteosarcoma cells were inoculated into the culture. The rate of cell adhesion, proliferation and mineralization were examined, and the appearance of cellular attachment was observed. An 8 mm critical size defect was created in the cranium of rabbits. Nine rabbits were divided into three groups including: An experimental group A (3 rabbits), in which a demineralised and particulate autogenous tooth was grafted; an experimental group B (3 rabbits), in which a demineralized, particulate autogenous tooth was grafted in addition to interleukin-6 (20 ng/mL); and a control group. The rabbits were sacrificed at 1, 2, 4 and 6 weeks for histopathological examination with H-E and Masson's Trichrome, and immunohistochemistry with osteocalcin. The cell-based assay showed a higher rate of cell adhesion, mineralization and cellular attachment in the experimental group A compared with the control group. The animal study revealed an increased number of osteoclasts, newly formed and mature bones in the experimental group A compared with the control group. Eventually, a higher number of osteoclasts were observed in the experimental group B. However, the emergence of newly formed and mature bone was lower than in the experimental group A. The current results suggest that treatment with demineralized and particulate autogenous tooth and interleukin-6 is not effective in stimulating bone regeneration during the bone grafting procedure.
Kim, Yang-Hee;Yang, Hun-Mo;Song, Ho-Yeon;Lee, Byong-Taek
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.44.1-44.1
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2010
poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) (PHBV) is a bacterially derived copolymer produced by fermentation. PHBV has been attractive because of its potential environmental, pharmaceutical and biomedical applications. Recently, the electrospinning technique has been used to fabricate fibrous mat for biomedical applications such as artificial blood vessel, drug release and scaffolds, because this method is simple and easy to get ultrafine polymer fibers. Depending on speed of rotation drum collector, fiber structure was different. In this work, PHBV fiber was aligned by electrospinnning machine. Furthermore, alignment of PHBV fiber mats was given angle such as $45^{\circ}$, $60^{\circ}$ and $90^{\circ}$. The morphology of each aligned PHBV fiber mat was observed by SEM technique. The mechanical property was evaluated depending on alignment angle. Especially, cell attachment ability depending on alignment of PHBV fiber mats was carried out using MG- 63 osteoblast like cells.
Kim, Jung-Sik;Lee, Jae-Kwan;Ko, Sung-Hee;Um, Heung-Sik;Chang, Beom-Seok
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.35
no.4
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pp.839-850
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2005
The success of an implant is determined by its integration into the tissue surrounding the biomaterial. Surface roughness is considered to influence the behavior of adherent cells. The aim of this in vitro study was to determine the effect of surface roughness on Saos-2 osteoblast-like cells. Titanium disks blasted with 75 ${/mu}m$ aluminum oxide particles and machined titanium disks were prepared. Saos-2 were plated on the disks at a density of 50,000 cells per well in 48-well dishes. After 1 hour, 1 day, 6 days cell numbers were counted. One day, 6 days after plating, alkaline phosphatase(ALPase) activity was determined. Compared to experimental group, the number of cells was significantly higher on control group. The stimulatory effect of surface roughness on ALPase was more pronounced on the experimental group than on control group. These results demonstrate that surface roughness alters proliferation and differentiation of osteoblasts. The results also suggest that implant surface roughness may play a role in determining phenotypic expression of cells.
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2009.05a
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pp.46.2-46.2
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2009
In vitro 상에서 골조직을 원활하게 재생하기 위해서는 3차원 지지체를 이용한 세포 배양과 세포 배양 시 세포의 형태와 기능을 유지/향상시키기 위한 인체 내 미세 환경 재현은 필수적이다. 따라서 본 연구에서는 뼈 성분과 유사한 생체 활성 물질인 hydroxyapatite (HA)와 생분해성 고분자인 poly $\varepsilon$-caprolactone (PCL)를 복합재료로 이용하여 내부 연결성이 우수한 골조직 재생용 3차원 지지체를 제작하였으며, 골 재생 능력 향상을 위하여 인체내 골조직의 기계적 미세 환경을 체외에서 구현한 새로운 형태의 perfusion bioreactor system을 개발/적용하였다. 또한 본 연구에서 개발된 perfusion bioreactor system의 생물학적 평가를 위해 MG63 (osteoblast like cell, 한국 세포주 은행)과 New Zealand White Rabbit에서 분리한 중간엽 줄기세포를 골조직 재생용 3차원 지지체에 파종하였다. 48시간 동안 안정화 후 perfusion bioreactor system을 이용하여 기계적 자극을 파종된 세포에 인가하였으며, 배양 기간 동안 세포의 증식 확인 및 형태학적 관찰을 실시하였다. 본 연구 결과, perfusion bioreactor system을 이용하여 기계적 자극을 인가한 실험군에서 세포의 증식 및 활성도가 대조군에 비해 우수함을 확인 할 수 있었다. 따라서, perfusion bioreactor를 이용한 세포 배양은 세포의 활성 향상 및 골조직 재생에 도움이 될 것으로 사료된다. 차후 perfusion bioreactor를 이용한 다양한 패턴의 자극이 골재생 능력 및 중간엽 줄기세포의 골 분화능에 미치는 영향에 대한 연구가 필요할 것으로 사료된다.
The ultimate aim of periodontal treatment is periodontal regeneration, which necessiates the regeneration of bone tissues. This paper investigated the effect of growth factor on bone cells. Platelet-derived growth factor(PDGF) is the one of the polypeptide growth factor that has been reported as a biological mediator which regulates activities of the cell proliferation, migration and metabolism of undifferentiated mesenchymal cells. The purpose of this study is to evaluate the effects of PDGF on bone nodule formation and ALP activity of MC3T3-El cells. Cells were seeded at $1{\times}10^5cells/well$ in alpha-modified eagle medium containing 10% fetal bovine serum, lOml beta-glycerophosphate and $50{\mu}g/ml$ of ascorbic acid. PDGF 0, 0.1, 1, 10 ng/ml were added to the cells at a confluent state and cultured for 3, 7, 14, 21, 28 days. We examined bone nodule formation and alkaline phosphatase activity. The results were as follows : There were bone nodule formation at day 21 both in control and all the experimental groups, and at day 28, all the experimental groups showed much more bone nodules than control groups. Compared to control-l group, ALP activity was increased in PDGF O.1ng/ml group and was decreased in 1,10ng/ml PDGF treated groups.{P< 0.05, P< 0.01) Compared to control-2, ALP activity was decreased in all the experimental groups except PDGF 0.1ng/ml in 21 day group. In the time-response effect, ALP activity was increased by the day 14 in all the experimental groups and thereafter ALP activity was decreased.(P<0.05, P< 0.01) In the dose-response effect, ALP activity was decreased as the dose of PDGF was increased, and after 21 day ALP activity was lowest in 1 ng/ml group, ALP activity was highest in the day 7 in control group and 0.1 ng/ml, 14 day experimental group. In conclusion, PDGF is considered more effective in the proliferation than differentiation of osteoblast-like cells, and it may be useful to study the combined effect of PDGF and other growth factors on osteoblast-like cells.
Bone remodeling is characterized by the continuing processes of osteoblast-mediated bone formation and osteoclast-mediated bone resorption. Bone metabolism is tightly regulated at the local level by networks of hormones, cytokines, and other factors. In pathological conditions of bone remodeling, including osteoporosis and periodontal diseases, inflammatory cytokines and local mediators are responsible for enhancement of osteoclast resorption and inhibition of repair at the sites of bone resorption. TNF-${\alpha}$ is a pleiotropic hormone with actions on the differentiation, growth, and functional activities of normal and malignant cells from numerous tissues. TNF-${\alpha}$ has been proposed as a local mediator of the control of bone turnover in situations of chronic inflammation, and it has been assumed that the local source of TNF-${\alpha}$ is the monocyte in the adjacent bone marrow or the local circulation. TNF-${\alpha}$ is a potent inducer of bone resorption. TNF-${\alpha}$ is known to induce the activation of apoptotic signaling pathway, which leads to the apoptosis of bone cells. We demonstrated that treatment of murine osteoblastic MC3T3E1 cells with TNF-${\alpha}$ decreases proliferation as well as alkaline phosphatase (ALP) activity in a dose depenent manner. In addition, TNF-${\alpha}$ increases osteoclast-like cell formation in $1{\alpha}$, 25(OH)2D3 or PGE2-treated bone marrow cell culture. When cells were cultured in TNF-${\alpha}$ free ${\alpha}$-MEM, this inhibitory effect of ALP activity was reversible up to 10 ng/ml TNF-${\alpha}$, in contrast, at the 20 ng/ml TNF-${\alpha}$, irreversible. In this concentration, TNF-${\alpha}$ may induce apoptosis in MC3T3E1 cells. In this study, TNF-${\alpha}$ induces apoptosis resulting in chromosomal DNA fragmentation, preceded by JNK/SAPKs and caspase-3 activation. Our present results show that JNK/SAPKs and caspase-3 are activated by TNF-${\alpha}$, suggesting that the JNK/SAPKs and caspase-3 participate in the bone resorption, associated with apoptosis.
Several features of the implant surface, such as roughness, topography, and composition play a relevant role in implant integration with bone. This study was conducted in order to determine the effects of ceramic-coatings on Ti surfaces on the biological responses of a human osteoblast-like cell line (MG63). MG63 cells were cultured on Zr (Zrconium-coated surface), Nb (Niobium-coated surface), and control (Uncoated Titanium) Ti. The morphology of these cells was assessed by SEM. The cDNAs prepared from the total RNAs of the MG63 were hybridized into a human cDNA microarray (1,152 elements). The appearances of the surfaces observed by SEM were different on each of the three dental substrate types. MG63 cells cultured on Zr, Nb and control exhibited cell-matrix interactions. In the expression of several genes were up-, and down-regulated on the different surfaces. The attachment and expression of key osteogenic regulatory genes were enhanced by the surface morphology of the dental materials used.
Several features of the implant surface, such as topography, roughness, and composition play a relevant role in implant integration with bone. This study was conducted in order to determine the effects of different-coatings on Ti surfaces on the biological responses of a human osteoblast-like cell line (MG63). MG63 cells were cultured on HA (Hydroxyapatite coating on Titanium), Ano (HA coating on anodized surface Titanium), Zr (zirconium-coating on Titanium), and control (non-coating on Titanium). The morphology of these cells was assessed by SEM. The cDNAs prepared from the total RNAs of the MG63 were hybridized into a human cDNA microarray (1,152 elements). The appearances of the surfaces observed by SEM were different on each of the three dental substrate types. MG63 cells cultured on HA, Ano, Zr, and control exhibited cell-matrix interactions. In the expression of several genes were up-, and down-regulated on the different surfaces. The attachment and expression of key osteogenic regulatory genes were enhanced by the surface morphology of the dental materials used.
Lim, Ki-Taek;Choi, Jeong Moon;Lim, Won-Chul;Kim, Jangho;Cho, Hong-Yon;Chung, Jong Hoon
Journal of Biosystems Engineering
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v.39
no.3
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pp.235-243
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2014
Purpose: The aim of this study was to prepare and evaluate a natural material extracted from germinated brown rice (GBR). Herein, we evaluated whether the natural material could positively activate the biological effects seen during bone formation, including enhancement of metabolic activity, osteogenesis, and the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), one of the growth factors in human osteoblast-like cells. Methods: The natural material was created by a hot water extraction process after being soaked for 2~3 days in tap water and dried at $50^{\circ}C$. The material was characterized using field emission scanning electron microscopy (FE-SEM), energy dispersive X-ray spectroscopy (EDX), X-ray diffraction (XRD), and Fourier transformed infrared (FTIR) spectroscopy. The biological behaviors of the material were also investigated; we performed tests to assess cell cytotoxicity, metabolic activity, osteogenic markers related to bone formation, and VEGF. Results: The EDX, XRD, and FTIR results for the natural material indicated the presence of organic compounds. The natural material caused positive increases in cell metabolic activity and mineralized bone formation without cytotoxicity. The protein levels in the extract for the $6.25{\mu}g/mL$, $12.25{\mu}g/mL$, $25{\mu}g/mL$, $50{\mu}g/mL$, and $100{\mu}g/mL$ groups were significantly different from that for the control. Conclusions: The GBR-based natural material was easy to prepare and had characteristics of a potential biomaterial. The biocompatibility of this natural material was evaluated using in vitro techniques; our findings indicate that this novel material is promising for agricultural and biological applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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