The production of oilgosaccharides using Penicillium citrium cells at high sugar concentrations was investigated at 50$\^{C}$ and pH 5.0. Both 1-kestose and neokestose were produced form sucrose, while both nystose and tetrasaccharide were produced from 1-kestose. However, no reaction product was obatined from neogructo-oligosaccharides such as neokestos. Based on these experimental rsults, a hypothetical reaction route was proposed to illustrate how neofructor-oilgosaccharids are formed from 1-kestose.
An agarase was partially purified from the culture broth of marine bacterium Bacillus cereus ASK202. Optimal pH and temperature of this agarase were found to be 7.0 and 40$^{\circ}C$, respectively. The maximum productivity of agarooligosaccharides was obtained from 0.3 %(w/v) agar by using of 1 unit agarase. As the results of TLC and HPLC analysis, these oilgosaccharides consisted of neoagarobiose, neoagarotetraose and neoagarohexaose. Under the optimal reaction conditions, 77.5 %(w/v) neoagarobiose and 6.2 %(w/v) neoagarotetraose were produced from agar and the conversion yield of total agarooligosaccharides was 83.7 %(w/v) after for 2 h reaction at 40$^{\circ}C$.
Phytase of rat intestine had a large amount of oilgosacchanrides ; The enzyme consisted of two different subunits with the molecular weights of 90 KDa and 70 KDa in its intack form, whereas the apparent molecular weights tumed to 72 KDa and 52 KDa, respectively, after deglycosylation. The treatment with glycopeptidase F reduced the molecular weights from 90 KDa and 70 KDa to 83 KDa and 52 KDa, respectively, While endoglycosidase H caused no change in their molecular weights. These results indicate that the 70KDa subunit contains only the N-linked oilgosaccharide chains, while the 90KDa subunit ocntains O-linked oilgosaccharides as well as N-linked ones. Enzyme-linked lectin assays suggeted that bisecting N-acetyl-D-glucosamine and galactose 1-4 N-acetyl-D-glucosamine structures were present and that fucose was included in these oilgosaccharide moieties. Sialic acid was not found in either subunit.
A bacterial strain LC-413, producing extracellular inulin fructotransferase which converts inulin into di-D-fructofuranose dianhydride(DFAIII) and amount of oilgosaccharides, was isolated from soil and pre-sumed as Flavobacteium sp. LC-413. The enzyme production was induced by inulin as carbon source and enhanced by the addition of 0.3% malt extract and 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX} as nitrogen source. The enzyme activity in the culture supernatant reached at the maximum, 78.6units/ml, after 11 hours of cultivation in the medium composition of 1.5% inulin, 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX}, 0.05% {TEX}$K_{2}${/TEX}{TEX}$HPO_{4}${/TEX}, 0.05% {TEX}$MgSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, 0.05% KCI, a trace amount of {TEX}$FeSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, and 0.3% malt ext. at 3$0^{\circ}C$. The oilgosaccharide produced by enzyme reaction from inulin was identified as DFA III by and {TEX}${13}^C${/TEX}-NMR spectrosocpy.
대두침출액중의 비소화성 올리고당인 라피노스나 스타키오스함량에는 영향을 주지 않으면서 수크로스함량을 낮추기 위한 효모는 균주의 선택적 당이용 능력을 기준으로 선발하였다. 14종의 대상균주 중 스타키오스 이용율이 낮았던 Saccharomyces cerevisiae(ATCC 9763, KCTC 7039)와 Hansenula anomala KFRI 626이 적합하였다. 일정량의 대두침출액에 선정된 3종의 효모배양액을 각각 첨가하여 발효시간에 따른 올리고당 함량의 변화를 조사한 결과, 균주간에 차이는 있었으나, 전반적으로 균주 첨가량과 발효시간이 증가함에 따라 각 올리고당 함량이 감소경향을 보였다. 또 이들 3균주의 첨가량을 2%로 고정하고 발효 시간을 연장하여 당함량을 조사한 결과 수크로스 제거에 적당한 균주는 S. cerevisiae KCTC 7039와 H. anomala KFRI 626이었다.
5%(w/v)의 설탕과 2.5%(w/v)의 녹말로 구성된 혼합기질용액을 1.5 mL/min으로 공급하였을 때 dextransucrase와 $\alpha$-amylase의 혼합효소를 함께 고정화한 비드를 이용한 방법이 두 효소를 띠로 고정화한 비드를 혼합한 방법보다 올리고당 수율이 충전형 반응기에서는 12%, 교반형 반응기에서는 11% 높았다. 혼합효소를 함께 고정화한 비드를 200시간 이상 사용하였을 경우 교반식 반응기에서는 파괴되었으나, 충전형 반응기에서는 안전하였다. 따라서 올리고당을 연속적으로 생산하는데는 충전형 반응기가 더 적합하였다. 충치균인 S. mutans를 새로운 구조의 올리고당이 함유된 배치에서 배양하였을 때 pH가 5이하로 떨어지지 않았다. 식중독균인 S. aureus를 새로운 구조의 올리고당이 첨가된 배치에서 배양한 결과, glucose와 설탕이 첨가된 배치보다 균 성장정도가 현저히 떨어졌다.
AA의 2번 위치의 수산기에 부위특이적 활성을 갖는 Paenibacillus sp. JB-13 유래 CGTase의 AA-2G 생산최적조건을 검토하였다. AA-2G 생산에 효율적인 당공여체를 조사하기 위해 다양한 포도당 중합체를 당공여체로 사용하여 AA-2G 생산성을 검토한 결과 dextrin이 가장 높은 AA-2G 생산성을 나타내었으며, 대체적으로 중합도가 높은 당을 효율적으로 이용하였다. 최적 당공여체인 dextrin을 사용하여 AA-2G 생산최적조건을 검토한 결과 반응 혼합액을 2,500 units/ml의 CGTase, 기질농도, 15%, 기질농도비(AA-g/dextrin-g) 3:2으로 조성하여, $37^{\circ}C$ , pH 6.5에서 44시간 반응 시킨 후, 1,500 units/ml의 glucoamylase를 $55^{\circ}C$에서 15시간 반응시켰을 때 AA-2G의 생산이 최대를 나타내었다.
올리고당이 가래떡의 조직감변화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 당 조성이 다른 3가지 올리고당류 (M75, HL, G4)를 쌀가루에 고형분대치로 10% 까지 첨가하여 제조한 후 실온$(25^{\circ}C)$과 냉장$(4^{\circ}C)$ 조건하에서 5일간 보관하연서 조직감의 변화를 기계적으로 측정하였다. 가래떡의 조직감특성은 사용된 올리고당의 종류, 첨가농도, 보관온도 및 보관기간에 따라 유의적인 차이(p<0.0001)를 나타내므로 이들이 모두 가래떡의 견고성, 응집성, 탄성, 검성 및 씹힘성에 영향이 있음을 나타내었다. 모든 시료는 올리고당을 첨가하였을 때, 올리고당을 첨하지 않은 경우보다, 올리고당의 종류나 보관온도에 관계없이 시간경과에 따라 낮은 조직감 변화를 보였으며, 당농도가 증가할수록 조직감의 변화는 감소하는 경향으로 가래떡의 관능적 품질의 안정화에 효과를 보였다 특히 DE값이 높은 M75및 HL이 G4보다 노화억제에 더욱 기여하였으며 isomaltose 및 panose의 함량이 높은 HL이 maltose가 주성분인 M75보다 노화억제효과가 더 높았다. 호화된 전분젤을 $4^{\circ}C$에서 7일간 저장한 후 DSC를 이용하여 전분의 노화현상을 측정한 결과, 올리고당을 첨가했을 때 호화개시온도가 처음보다 낮아졌으며, 올리고당의 첨가농도가 증가함에 따라 재결정도는 낮은 비율을 나타냈다. 올리고당의 종류중 maltotetraose가 주성분인 G4보다 이당류, 삼당류가 주성분인 M75와 HL의 노화지연효과가 큰 것으로 나타났고, 특히 HL은 5%첨가로도 약 15%의 높은 전분 재결정화 억제효과를 나타내므로 조직감 측정 결과와 비교적 일치된 결과를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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